Consequences of oxygen deprivation on myelination and sex-dependent alterations.

Oxygen deprivation is one of the main causes of morbidity and mortality in newborns, occurring with a higher prevalence in preterm infants, reaching 20 % to 50 % mortality in newborns in the perinatal period. When they survive, 25 % exhibit neuropsychological pathologies, such as learning difficulties, epilepsy, and cerebral palsy. White matter injury is one of the main features found in oxygen deprivation injury, which can lead to long-term functional impairments, including cognitive delay and motor deficits. The myelin sheath accounts for much of the white matter in the brain by surrounding axons and enabling the efficient conduction of action potentials. Mature oligodendrocytes, which synthesize and maintain myelination, also comprise a significant proportion of the brain's white matter. In recent years, oligodendrocytes and the myelination process have become potential therapeutic targets to minimize the effects of oxygen deprivation on the central nervous system. Moreover, evidence indicate that neuroinflammation and apoptotic pathways activated during oxygen deprivation may be influenced by sexual dimorphism. To summarize the most recent research about the impact of sexual dimorphism on the neuroinflammatory state and white matter injury after oxygen deprivation, this review presents an overview of the oligodendrocyte lineage development and myelination, the impact of oxygen deprivation and neuroinflammation on oligodendrocytes in neurodevelopmental disorders, and recent reports about sexual dimorphism regarding the neuroinflammation and white matter injury after neonatal oxygen deprivation.

Manipulation of the soil microbiome regulates the colonization of plants by arbuscular mycorrhizal fungi.

Arbuscular mycorrhizal fungi (AMF) are important symbionts of many plant species, facilitating the acquisition of soil nutrients by roots. We hypothesized that AMF root colonization is strongly influenced by the composition of the soil microbiome. Here, we evaluated mycorrhizal colonization of two plants, the grass Urochloa brizantha (Brachiaria) and the legume Crotalaria juncea (Crotalaria). These were cultivated in the same soil but hosting eight distinct microbiomes: natural soil (i); soil exposed to heat treatments for 1 h at 50 ºC (ii), 80 ºC (iii), or 100 ºC (iv); sterilized soil by autoclaving (AS) followed by re-inoculation of dilutions of the natural soil community at 10-1 (v), 10-3 (vi), and 10-6 (vii); and AS without re-inoculation (viii). Microbial diversity (bacteria and fungi) was assessed through 16S rDNA and ITS1 metabarcoding, respectively, and the soil acid phosphatase activity (APASE) was measured. Sequencing results showed the formation of distinct microbial communities according to the soil manipulations, which also correlated with the decline of APASE. Subsequently, seedlings of Brachiaria and Crotalaria were grown in those soils inoculated separately with three AMF (Acaulospora colombiana, Rhizophagus clarus, and Dentiscutata heterogama) which were compared to an AMF-free control treatment. Brachiaria showed higher colonization in natural soil when compared to the microbial community manipulations, regardless of the AMF species inoculated. In contrast, two mycorrhiza species were able to colonize Crotalaria under modified microbial communities at similar rates to natural soil. Furthermore, Brachiaria showed a possible inverse relationship between APASE and mycorrhization, but this trend was absent for Crotalaria. We conclude that mycorrhizal root colonization and soil acid phosphatase activity were associated with the structure of the soil microbiome, depending on the plant species evaluated.

Melatonin attenuates developmental deficits and prevents hippocampal injuries in male and female rats subjected to neonatal anoxia.

Hypoxia in preterm infants is a clinical condition that has been associated with cognitive and behavioral disturbances for which treatment strategies are strongly required. Melatonin administration following brain insults has been considered a promising therapeutic strategy due to its antioxidant and anti-inflammatory effects. Not surprisingly, it has been extensively studied for preventing disturbances following brain injury. This study evaluated the effects of melatonin on developmental disturbances, memory disruption, and hippocampal cell loss induced by neonatal anoxia in rats. Neonatal Wistar rats were subjected to anoxia and subsequently treated with melatonin. Later, maturation of physical characteristics, ontogeny of reflexes, learning and memory in the Morris water maze (MWM), and estimates of the number of hippocampal neurons, were evaluated. Melatonin treatment attenuated (1) female anoxia-induced delay in superior incisor eruption, (2) female anoxia-induced vibrissae placement reflexes, and (3) male and female anoxia-induced hippocampal neuronal loss. Melatonin also promoted an increase (5) in swimming speeds in the MWM. In addition, PCA analysis showed positive associations between the acoustic startle, auditory canal open, and free fall righting parameters and negative associations between the male vehicle anoxia group and the male melatonin anoxia group. Therefore, melatonin treatment attenuates both anoxia-induced developmental deficits and hippocampal neuronal loss.

Fuzzy Modeling Development for Lettuce Plants Irrigated with Magnetically Treated Water.

Due to the worldwide water supply crisis, sustainable strategies are required for a better use of this resource. The use of magnetic water has been shown to have potential for improving irrigation efficacy. However, a lack of modelling methods that correspond to the experimental results and minimize error is observed. This study aimed to estimate the replacement rates of magnetic water provided by irrigation for lettuce production using a mathematical model based on fuzzy logic and to compare multiple polynomial regression analysis and the fuzzy model. A greenhouse study was conducted with lettuce using two types of water, magnetic water (MW) and conventional water (CW), and five irrigation levels (25, 50, 75, 100 and 125%) of crop evapotranspiration. Plant samples for biometric lettuce were taken at 14, 21, 28 and 35 days after transplanting. The data were analyzed via multiple polynomial regression and fuzzy mathematical modeling, followed by an inference of the models and a comparison between the methods. The highest biometric values for lettuce were observed when irrigated with MW during the different phenological stage evaluated. The fuzzy model provided a more exact adjustment when compared to the multiple polynomial regressions.

Experimental validation under controlled conditions of real time PCR to quantify arbuscular mycorrhizal colonization in root.

Mycorrhizal colonization of roots is traditionally evaluated by empirical methods, such as root microscopy. We compared this method with data from using a real time PCR technique, and determined the correlation between methods, indicating particularities of a promising system for a quick and accurate molecular diagnostic of arbuscular mycorrhization.

Neonatal anoxia increases nociceptive response in rats: Sex differences and lumbar spinal cord and insula alterations.

Neonatal anoxia is a well-known world health problem that results in neurodevelopmental deficits, such as sensory alterations that are observed in patients with cerebral palsy and autism disorder, for which oxygen deprivation is a risk factor. Nociceptive response, as part of the sensory system, has been reported as altered in these patients. To determine whether neonatal oxygen deprivation alters nociceptive sensitivity and promotes medium- and long-term inflammatory feedback in the central nervous system, Wistar rats of around 30 h old were submitted to anoxia (100% nitrogen flux for 25 min) and evaluated on PND23 (postpartum day) and PND90. The nociceptive response was assessed by mechanical, thermal, and tactile tests in the early postnatal and adulthood periods. The lumbar spinal cord (SC, L4-L6) motor neurons (MNs) and the posterior insular cortex neurons were counted and compared with their respective controls after anoxia. In addition, we evaluated the possible effect of anoxia on the expression of astrocytes in the SC at adulthood. The results showed increased nociceptive responses in both males and females submitted to anoxia, although these responses were different according to the nociceptive stimulus. A decrease in MNs in adult anoxiated females and an upregulation of GFAP expression in the SC were observed. In the insular cortex, a decrease in the number of cells of anoxiated males was observed in the neonatal period. Our findings suggest that oxygen-deprived nervous systems in rats may affect their response at the sensorimotor pathways and respective controlling centers with sex differences, which were related to the used stimulus.

Impact of neonatal anoxia and hypothermic treatment on development and memory of rats.

Therapeutic hypothermia (TH) is well established as a standard treatment for term and near-term infants. However, therapeutic effects of hypothermia following neonatal anoxia in very premature babies remains inconclusive. The present rodent model of preterm neonatal anoxia has been shown to alter developmental milestones and hippocampal neurogenesis, and to disrupt spatial learning and memory in adulthood. These effects seem to be reduced by post-insult hypothermia. Epigenetic-related mechanisms have been postulated as valuable tools for developing new therapies. Dentate gyrus neurogenesis is regulated by epigenetic factors. This study evaluated whether TH effects in a rodent model of preterm oxygen deprivation are based on epigenetic alterations. The effects of TH on both developmental features (somatic growth, maturation of physical characteristics and early neurological reflexes) and performance of behavioral tasks at adulthood (spatial reference and working memory, and fear conditioning) were investigated in association with the possible involvement of the epigenetic operator Enhancer of zeste homolog 2 (Ezh2), possibly related to long-lasting effects on hippocampal neurogenesis. Results showed that TH reduced both anoxia-induced hippocampal neurodegeneration and anoxia-induced impairments on risk assessment behavior, acquisition of spatial memory, and extinction of auditory and contextual fear conditioning. In contrast, TH did not prevent developmental alterations caused by neonatal anoxia and did not restore hippocampal neurogenesis or cause changes in EZH2 levels. In conclusion, despite the beneficial effects of TH in hippocampal neurodegeneration and in reversing disruption of performance of behavioral tasks following oxygen deprivation in prematurity, these effects seem not related to developmental alterations and hippocampal neurogenesis and, apparently, is not caused by Ezh2-mediated epigenetic alteration.

Impairment of nociceptive responses after neonatal anoxia correlates with somatosensory thalamic damage: A study in rats.

Chronic neuropathic pain resulting from damage to the central or peripheral nervous system is a prevalent and debilitating condition affecting 7-18% of the population. Symptoms include spontaneous pain, dysesthesia, paresthesia, allodynia and hyperalgesia. The reported sensory symptoms are comorbid with behavioral disabilities such as insomnia and depression. Neonatal anoxia, a worldwide clinical problem in both neonatal and pediatric care, causes long-term deficits similar to those mentioned. The effect of neonatal anoxia on the maturation of nociceptive pathways has been sparsely explored. To address this question and to determine whether the effects differ depending on sex, a neonatal anoxia model was used in which Wistar rat pups approximately 30 h old and of both sexes were placed in a chamber with 100% nitrogen flow at 3.5 L/min for 25 min at 36 °C ± 1 °C. After recovery, the animals (n = 16 in each group (anoxia and control; males and females)) were returned to their mothers. The control animals were subjected to the same conditions, but no gas exchange was performed. At postnatal day (PND) 18 and PND43, the animals were subjected to pain testing by stimulation of the hind paws with von Frey monofilaments. The results revealed a significant reduction (approximately 50%) in the pain threshold in the animals exposed to anoxia in comparison with their respective controls. The pain threshold increased between PND18 and PND43. A sex-based difference was observed in the male control group at PND18. Histological analysis revealed decreased cell numbers in the ventral posterolateral thalamic nucleus (VPL), with sex differences. These results demonstrate the long-lasting negative impact of neonatal anoxia and indicate the relevance of performing suitable approaches taking in consideration the possible sex differences.

Estudo da adesão ao tratamento anti-hipertensivo em funcionários de uma instituição pública de saúde e educação / Study of adherence to antihypertensive treatment in employees of a public health and education institution

Introdução: A hipertensão arterial está relacionada a altos custos para as áreas da saúde e previdência, devido às complicações decorrentes de sua evolução crônica. Faz-se, portanto, necessário o seu controle, por meio da adesão ao tratamento farmacológico e não farmacológico. Objetivo: Analisar a adesão de funcionários da saúde, de serviço público hospitalar ao tratamento anti-hipertensivo medicamentoso e suas possíveis relações. Método: Pesquisa observacional, transversal e descritiva de abordagem quantitativa composta por 57 trabalhadores que se auto-referiram hipertensos. Foram avaliadas características do perfil socioeconômico e laboral dos profissionais e sua adesão ao tratamento anti-hipertensivo. Os resultados foram analisados por meio de estudo de frequência absoluta e relativa e a associação entre as variáveis por meio do teste do Qui-quadrado e Teste Exato de Fisher. Resultados: identificaram-se características do perfil dos participantes que contribuíram para a adesão ao tratamento anti-hipertensivo e outros aspectos que limitavam a adesão terapêutica e demandavam intervenções, como: ampliação das ações de educação em saúde para todos os funcionários, possibilidades de seguimento daqueles já diagnosticados e rastreamento dos demais, com fortalecimento do vínculo e da comunicação entre o profissional de saúde e o funcionário, assim como ações voltadas a atividades físicas e qualidade de vida. No cuidado individual salientou-se o uso de pílula única e medidas para evitar o esquecimento das tomadas da medicação. Conclusões: O estudo foi capaz de caracterizar os funcionários e sua adesão ao tratamento anti-hipertensivo, fatores facilitadores e dificultadores, e de sinalizar estratégias institucionais de intervenção para melhoria da adesão e qualidade de vida (AU).

Introduction: The arterial hypertension is related to high costs to the health and social security systems, due to complications of its chronic evolution. Therefore, its control is necessary through pharmacological and non-pharmacological treatment adherence. Objective: To analyze the health worker's adherence to anti hypertensive treatment in a public hospital and its possible relations. Method: observational, cross-sectional, descriptive with quantitative approach research, consisting of 57 workers who self-report as hypertensive. Characteristics of the socioeconomic and work profile of professionals and their adherence to anti hypertensive treatment were evaluated. The results were analyzed by the study of absolute and relative frequency and the association between the variables using the Chi-square test and Fisher's exact test. Results: characteristics of the participants' profile that contributed to adherence to anti-hypertensive treatment and other aspects that limited therapeutic adherence and demanded interventions were identified, such as: expansion of health education actions for all employees, possibilities of following up those already diagnosed and tracking others, strengthening the bond and communication between the health professional and the employee, as well as actions aimed at physical activities and quality of life. In individual care, the use of a single pill and measures to avoid forgetting of medication taken were highlighted. Conclusion: the study was able to characterize the employees and their adherence to anti-hypertensive treatment, facilitating and hindering factors, and to point out institutional intervention strategies to improve adherence and quality of life (AU).

Breast cancer mammographic diagnosis performance in a public health institution: a retrospective cohort study.

OBJECTIVES: To evaluate the quality assurance of mammography results at a reference institution for the diagnosis and treatment of breast cancer in southern Brazil, based on the BIRADS (Breast Imaging Reporting and Data System) 5th edition recommendations for auditing purposes. MATERIALS AND METHODS: Retrospective cohort and cross-sectional study with 4502 patients (9668 mammographies)) who underwent at least one or both breast mammographies throughout 2013 at a regional public hospital, linked to a federal public university. The results were followed until 31 December 2014, including true positives (TPs), true negatives (TNs), false positives (FPs), false negatives (FNs), positive predictive values (PPVs), negative predictive value (NPV), sensitivity and specificity, with a confidence interval of 95%. RESULTS: The study showed high quality assurance, particularly regarding sensitivity (90.22%) and specificity (92.31%). The overall positive predictive value (PPV) was 65.35%, and the negative predictive value (NPV) was 98.32%. The abnormal interpretation rate (recall rate) was 12.26%. CONCLUSIONS: The results are appropriate when compared to the values proposed by the BIRADS 5th edition. Additionally, the study provided self-reflection considering our radiological practice, which is essential for improvements and collaboration regarding breast cancer detection. It may stimulate better radiological practice performance and continuing education, despite possible infrastructure and facility limitations. MAIN MESSAGES: • Accurate quality performance rates are possible despite financial and governmental limitations. • Low-income institutions should develop standardised teamwork to improve radiological practice. • Regular mammography audits may help to increase the quality of public health systems.

The central vein sign in multiple sclerosis: a biomarker evaluated on a 3T MRI scanner

The central vein sign (CVS) is a promising MRI biomarker in multiple sclerosis (MS). CVS has recently been proposed to improve the accuracy and speed of MS diagnosis. Evidence indicates that the presence of CVS in individual lesions can accurately differentiate MS from other diseases that mimic this condition, such as hypertensive microangiopathy, atypical demyelination, and neuromyelitis optica. Most studies have used 7T MRI scanners, which limits their clinical applicability. Recently, it has been demonstrated that the fusion of the FLAIR and SWI sequences, generating FLAIR*, allows CVS visualization even on 3T scanners. Many studies have confirmed that CVS at 3T is a specific imaging finding for MS. (AU)

Causas gastrointestinais de dor abdominal em quadrante inferior direito: manejo, tratamento e imagem à TC / Gastrointestinal causes of right low quadrant abdominal pain: handling, and treatment according to CT image

A dor abdominal em quadrante inferior direito (QID) é uma queixa freqüente nos pronto-atendimentos médicos. A apendicite e alguns dos seus diagnósticos diferenciais (gastrointestinais) mais prevalentes serão abordados neste artigo, com destaque ao manejo e investigação associando clínica e imagem à Tomografia Computadorizada (TC).

The right low quadrant abdominal pain is a frequent cause of emergency care. Appendicitis and some of its main differential diagnoses (gastrointestinal) will be addressed in this article, especially the management and investigation associating clinic and image at computed tomography (CT).

Neuroimagem na emergência: o que todo clínico deve saber identificar em uma tomografia de crânio / Neuroimaging in the emergency department: what all clinicians should identify on a brain CT scan

O objetivo deste capítulo é auxiliar o médico emergencista a identificar alterações em Tomografias de Crânio nas patologias neurorradiológicas mais prevalentes nesse tipo de serviço. Será realizada breve explicação sobre a definição, epidemiologia, aspectos clínicos e achados de imagem acerca de cada patologia.

The purpose of this chapter is to help the emergency physician to identify changes in skull CT scans of the most prevalent neuroradiological pathologies in this type of service. A brief explanation of the definition, epidemiology, clinical and imaging findings about each pathology will be presented.

Traumatismo crânio encefálico e suas implicações cognitivas e na qualidade de vida / Traumatic brain injury and its implications on cognition and quality of life

O traumatismo cranioencefálico é uma das principais causas de mortalidade em crianças e adultos jovens. Os pacientes com traumatismo cranioencefálico moderado ou grave podem apresentar sequelas motoras, cognitivas, emocionais, comportamentais e de funcionalidade social, provocando impacto negativo para o próprio indivíduo, sua família e também para a sociedade. Objetivo: Verificar o impacto que o traumatismo cranioencefálico grave ocasionou na vida de pacientes que apresentaram a lesão durante a infância e adolescência, considerando-se questões cognitivas, emocionais e de qualidade de vida, bem como verificar se existem diferenças com relação à idade na época da lesão. Método: Estudo quantitativo, qualitativo de abordagem transversal. Realizado no Centro de Reabilitação da Associação de Assistência à Criança Deficiente (AACD), unidade Ibirapuera. Participaram do estudo, 13 pacientes com traumatismo cranioencefálico grave, procedentes do estado de São Paulo, atendidos entre janeiro de 2010 e março de 2014. Os instrumentos utilizados foram: questionário sociodemográfico, Short Form Health Survey (SF-36), Escala Geral das Matrizes Progressivas de Raven e as Pirâmides Coloridas de Pfister. Os dados obtidos na avaliação foram avaliados na amostra geral e posteriormente divididos em dois grupos com base na idade no ato da lesão, considerando grupo 1 (3 a 7 anos e 11 meses) e grupo 2 (8 à 16 anos e 11 meses). Resultados: Com relação ao Raven, 76,9% dos participantes apresentaram indício de deficiência mental. Todos os participantes obtiveram boa avaliação da qualidade de vida. Sobre os aspectos afetivos-emocionais observou-se boa capacidade de adaptação e interação. Na comparação entre os grupos, não se evidenciaram diferenças. Conclusão: Os resultados obtidos foram compatíveis com estudos que indicam comprometimento cognitivo e boa percepção da qualidade de vida

The treatment for patients with Duchenne Muscular Dystrophy (DMD) is multidisciplinary. It is necessary to understand the effects of activities performed on dry ground as well as water-immersed to allow the development of intervention protocols. Objective: To compare the motor function of children with DMD in physiotherapy carried out on the ground and immersed over a 2-year period. Method: A retrospective study, assisted by the Brazilian Association of Muscular Dystrophy (ABDIM), of 23 patients diagnosed with DMD, 8-24 years of age. We collected assessment data both water-immersed (adaptation to the water, bipedalism, sitting position, cross and longitudinal rotation, swimming, and running) and on the ground (Egan Klassifikation Scale and Vignos Scale) over a 2-year period. Results: Analyzing the ratings between semesters during the 2-year period, there were differences in the performance of water-immersed activities (p < 0.001) and there was no difference on the Egan Klassifikation Scale (p < 0.003) or the Vignos Scale (p < 0.012). Conclusion: Due to the physical properties of the water, patients either improved or maintained their scores for motor function in water immersion. However, their scores for the Egan Klassifikation and the Vignos scales, which represent motor function on the ground, diminished

Promoção da saúde e da qualidade de vidacom idosos por meio de práticas corporais / Health and quality of life promotion for old people using bodilypractices

O crescimento da população idosa está relacionado às melhores condições materiais de sobrevivência, aos avanços daspráticas de saúde e ao maior acesso à informação. As práticas corporais são reconhecidas como importante estratégiade promoção da saúde e prevenção de doenças na população idosa. O presente estudo visou a analisar dois grupos depráticas corporais orientados pelo método Self-healing, de Meir Schneider, desenvolvidos com pessoas em processo deenvelhecimento e idosos. Os grupos ocorreram no período de março a setembro de 2012, com duração de doze encontros,em um serviço universitário. Utilizou-se de questionário semiestruturado e da aplicação do SF-36. Participaram dogrupo vinte e cinco pessoas, com o predomínio de mulheres (88%). As idades variaram entre 57 e 76 anos, média de 65,8anos e escolaridade média de 3,6 anos. A maioria dos participantes realizava em casa as orientações aprendidas no grupo,com benefícios tanto físico, mental como emocional. No SF-36 houve melhora com significância estatística nos escoresdos domínios / aspectos físicos, dor e emocionais. Os efeitos na relação mente-corpo foram identificados pelos resultadospositivos em todos os domínios do SF-36, e no questionário semiestruturado. Os resultados sugerem que o método é eficaze traz benefícios para a capacidade funcional e qualidade de vida dessas pessoas.

The increasing of the elderly population is related to better material conditions for survival and progress of health practices.Bodily practices are recognized as an important strategy for health promotion and disease prevention for this population.This study aims to analyze the benefits of participating in groups of bodily practices under the perspective of Meir Schneider’sSelf-healing technique, developed with adults and the elderly. Groups took part from March to September 2012 intwelve meetings, coordinated by the INTEGRA Laboratory of the Occupational Therapy School at the University of SãoPaulo. A semi-structured questionnaire and the SF-36 were used. There were 25 participants; most of them women (88%),with an average age of 65.8 years (ranging from 57 to 76) and an average of 3.6 years of education. Most participantsperformed the guidelines taught in the group at home, with referred physical, mental and emotional benefits. There werestatistically significant improvements in SF36’s physical, emotional and bodily pain domains. The effects on the mind-bodyrelationship were identified by positive results in all domains of the SF-36 and the semi-structured questionnaire. Resultsindicate that the method used is effective and beneficial for functional capacity and quality of life of this population.

Existe variabilidade para o caráter tempo de cocção em feijão? depende do erro! / IS there variability for the character of beans cooking time? depends of the error!

O reduzido tempo para a cocção de feijão é uma característica almejada pelos programas de melhoramento. Assim, a técnica empregada para a mensuração do tempo de cozimento deve ser precisa e discriminar os genótipos pelo seu potencial genético. Neste aspecto, este estudo teve como objetivo verificar a existência de variação no método utilizado para determinação do tempo de cocção em feijão. O experimento foi desenvolvido na Universidade do Estado de Santa Catarina, nas dependências do Instituto de Melhoramento e Genética Molecular da UDESC (IMEGEM), no ano de 2009/10. Grãos oriundos de 36 populações mutantes de feijão foram submetidos ao teste de cocção por meio do aparelho cozedor de Mattson, com duas repetições por unidade experimental. Os dados foram analisados considerando três modelos estatísticos: i) especificando informações referentes ao erro experimental; ii) ao erro de amostragem e; iii) considerando as repetições como um fator de variação. Foram empregados três tipos de resíduos nas análises, sendo, o erro total, o erro experimental e o erro de amostragem. Para o mesmo conjunto de dados, resultados discrepantes foram gerados com a utilização de diferentes resíduos, evidenciando a necessidade de rigor nas especificações dos modelos estatísticos e na escolha do resíduo apropriado para testar as hipóteses. A técnica empregada para a avaliação do tempo de cocção apresentou variação intrínseca ao método, sendo necessária a utilização de repetições dentro da unidade experimental para estimar o erro de amostragem e purificar o erro experimental.

The lower cooking time for common bean is a characteristic desired by breeding programs. Thus, the technique used to measure the cooking time must be precise and efficient for the differentiation of genotypes for their genetic potential. The objective of this study was to verify the existence of variation in the method used to determination the bean cooking time. The experiment was developed in Universidade do Estado de Santa Catarina - UDESC (Santa Catarina State University - Brazil), in the premises of Instituto de Melhoramento e Genética Molecular (IMEGEM) - Molecular Genetics and Breeding Institute, in 2009/10. The grains from thirty six mutant common bean populations were subjected to the cooking test using the Mattson cooker apparatus, with two replications each experimental unit. The data were analyzed using three statistics models: i) specifying information related to experimental error; ii) to the sampling error and; iii) considering the replications as a variation factor. Three types of error were used in the statistics analysis (total error, experimental error and sampling error). Different results were obtained with use of three types of error for the same data set, shown the need of criterion about specification of statistics models and choice of appropriate error for testing the hypotheses. The technique used to evaluation of the bean cooking time showed intrinsic variation, being necessary to use the replications within the experimental unit to estimate the sampling error and purify the experimental error.

Evaluation of real time PCR technique to diagnosis of human T-lymphotropic virus type I (HTLV-I) in patients in the Hematologia da Fundação Hemope Hospital, in Northeastern Brazil / Avaliação da técnica de PCR em tempo real para o diagnóstico do virus linfotrópico tipo I de células T humana (HTLV-I) em pacientes do Hospital de Hematologia da Fundação Hemope, no Nordeste do Brasil

As a high degree of homology exists between the proviral genomes of HTLV-I and HTLV-II, there is significant cross-reactivity. Therefore although detection of HTLV antibodies is characteristic of viral infection, it is not sufficient to confirm the presence of the viral type. Molecular tests used to diagnose the HTLV-I/II viruses are based oninvestigations of proviral genomic sequences, and allow for an infection to be diagnosed prior to the appearance of any sign or symptom. The HTLV proviral load in infected individuals can be determined using real-time PCR, a faster method with less risk of contamination than simple or nested PCR. We analyzed 63 samples from the Hemope Hospital, of which 33 were from HTLV seropositive individuals and 30 from blood donors, to determine the type of virus and the proviral load. The sensitivity of qualitative PCR in comparison to ELISA was 87.5% (95% IC: 70.1 - 95.9%) and the specificitywas 100% (IC 95%: 85.9 - 100.0%). The sensitivity and specificity of real-time PCR in comparison to the serological test (ELISA) were 100% (95% IC: 86.7 - 100.0%) and 96.67% (95% IC: 80.9 - 99.8%) respectively. The proviral load in the seropositiveindividuals ranged from 13 to 343820 copies/106 PBMC cells. Our study also observed that individuals with TSP/HAM had a higher proviral load than those who showed no symptoms. The use of real time PCR for routine clinical testing of infected individuals will play a significant role in identifying the virus type and determining the proviral load, thereby providing more appropriate treatment.

Como os genomas provirais do HTLV-I e HTLV-II exibem grande homologia, há uma expressiva sororeatividade cruzada. Assim, a detecção de anticorpos anti-HTLV-I/II embora caracterize infecção viral, não permite estabelecer distinção entre os agentes. Os testes moleculares empregados para o diagnóstico dos vírus HTLV-I/II, baseiam-se na pesquisa de seqüências genômicas provirais permitindo o diagnóstico da infecção antes de aparecer sinal ou sintoma. A carga proviral de HTLV pode ser determinadaatravés da utilização da PCR em tempo real, uma técnica rápida e com menor risco de contaminação que a PCR simples ou nested PCR. Analisamos, 63 amostras do Hospital HEMOPE, das quais 33 foram de indivíduos com sorologia reagente para HTLV e 30 de doadores de sangue, para determinar o tipo de vírus e a carga proviral. A sensibilidade da PCR qualitativa emrelação ao ELISA foi de 87,9% (IC 95%: 70,9-96,0%) e a especificidade foi de 100% (IC 95%: 85,9-100,0%). A sensibilidade e especificidade da PCR em tempo real foram de 100% (IC95%: 86,7-100,0%) e 96,67% (IC 95%: 80,9-99,8%), respectivamente.A carga proviral variou entre 13 cópias/106 células PBMC e 343820 cópias/106 células PBMC. Nosso estudo também observou que os indivíduos com PET/MAH tiveram carga proviral mais elevada que a dos indivíduos assintomáticos. A utilização da PCR em tempo real na rotina clínica dos indivíduos infectados poderá desempenhar um papel relevante na identificação do vírus e na determinação da carga proviral, contribuindo para direcionar um tratamento adequado.

Avaliação da técnica de PCR em tempo real no diagnóstico da infecção pelo HTLV-I / Evaluation of the technique of real time PCR in the diagnosis of the infection for the HTLV-I

Os vírus linfotrópicos de células T humanas do tipo I (HTLV-I) e do tipo II (HTLV-II) são retrovírus humanos que causam destruição e/ou transformação nos linfócitos T. A transmissão ocorre através de relações sexuais, transfusões sanguíneas e produtos hemoderivados, agulhas e seringas contaminadas, da mãe infectada para seu filho, especialmente através do aleitamento materno. O diagnóstico da infecção pelo HTLV-I/II é feito, habitualmente, com testes sorológicos, baseados na pesquisa de anticorpos contra antígenos do vírus presentes no soro do indivíduo infectado. Como os genomas provirais do HTLV-I e HTLV-II exibem grande homologia, há uma expressiva sororeatividade cruzada. Assim, em muitos casos, a detecção de anticorpos anti-HTLV-I/II embora caracterize a infecção viral, não permite que se estabeleça a distinção entre ambos os agentes. Os testes moleculares empregados para o diagnóstico dos vírus HTLV-I/II, baseiam-se na pesquisa de seqüências genômicas provirais permitindo, com isso, o diagnóstico da infecção pelo antes do aparecimento de qualquer sinal ou sintoma. A carga proviral de HTLV em indivíduos infectados pode ser determinada através da utilização da PCR em tempo real, uma técnica mais rápida e com menor risco de contaminação que a PCR simples ou nested PCR. Para isso, 63 amostras, sendo 33 amostras de indivíduos com sorologia reagente para HTLV e 30 amostras de doadores de sangue da Fundação HEMOPE foram analisadas para identificação do tipo viral (I ou II) e determinação da carga proviral. A sensibilidade da PCR qualitativa, para identificação do tipo viral, em relação à sorologia foi de 87,5 por cento (IC 95 por cento: 70,1-95,9 por cento) e a especificidade foi de 100 por cento (IC 95 por cento: 85,9-100,0 por cento). Já a sensibilidade e especificidade da PCR em tempo real foram de 100 porcento (IC 95 por cento: 86,7-100,0 por cento) e 96,67 por cento (IC 95 por cento: 80,9-99,8 por cento), respectivamente. A carga proviral dos indivíduos reagentes na sorologia variou entre 13 cópias/ 106 células PBMC e 343820 cópias/106 células PBMC. Nosso estudo também observou que os indivíduos com PET/MAH tiveram carga proviral mais elevada que a dos indivíduos assintomáticos. A utilização da PCR em tempo real na rotina de monitoramento clínico dos indivíduos infectados permitirá um papel relevante na identificação do vírus e na determinação simultânea da carga proviral, contribuindo para direcionar um tratamento adequado.

Avaliação da técnica de PCR em tempo real no diagnóstico da infecção pelo HTLV-I / Evaluation of the technique of real time PCR in the diagnosis of the infection for the HTLV-I

Os vírus linfotrópicos de células T humanas do tipo I (HTLV-I) e do tipo II (HTLV-II) são retrovírus humanos que causam destruição e/ou transformação nos linfócitos T. A transmissão ocorre através de relações sexuais, transfusões sanguíneas e produtos hemoderivados, agulhas e seringas contaminadas, da mãe infectada para seu filho, especialmente através do aleitamento materno. O diagnóstico da infecção pelo HTLV-I/II é feito, habitualmente, com testes sorológicos, baseados na pesquisa de anticorpos contra antígenos do vírus presentes no soro do indivíduo infectado. Como os genomas provirais do HTLV-I e HTLV-II exibem grande homologia, há uma expressiva sororeatividade cruzada. Assim, em muitos casos, a detecção de anticorpos anti-HTLV-I/II embora caracterize a infecção viral, não permite que se estabeleça a distinção entre ambos os agentes. Os testes moleculares empregados para o diagnóstico dos vírus HTLV-I/II, baseiam-se na pesquisa de seqüências genômicas provirais permitindo, com isso, o diagnóstico da infecção pelo antes do aparecimento de qualquer sinal ou sintoma. A carga proviral de HTLV em indivíduos infectados pode ser determinada através da utilização da PCR em tempo real, uma técnica mais rápida e com menor risco de contaminação que a PCR simples ou nested PCR. Para isso, 63 amostras, sendo 33 amostras de indivíduos com sorologia reagente para HTLV e 30 amostras de doadores de sangue da Fundação HEMOPE foram analisadas para identificação do tipo viral (I ou II) e determinação da carga proviral. A sensibilidade da PCR qualitativa, para identificação do tipo viral, em relação à sorologia foi de 87,5 por cento (IC 95 por cento: 70,1-95,9 por cento) e a especificidade foi de 100 por cento (IC 95 por cento: 85,9-100,0 por cento). Já a sensibilidade e especificidade da PCR em tempo real foram de 100 porcento (IC 95 por cento: 86,7-100,0 por cento) e 96,67 por cento (IC 95 por cento: 80,9-99,8 por cento), respectivamente. A carga proviral dos indivíduos reagentes na sorologia variou entre 13 cópias/ 106 células PBMC e 343820 cópias/106 células PBMC. Nosso estudo também observou que os indivíduos com PET/MAH tiveram carga proviral mais elevada que a dos indivíduos assintomáticos. A utilização da PCR em tempo real na rotina de monitoramento clínico dos indivíduos infectados permitirá um papel relevante na identificação do vírus e na determinação simultânea da carga proviral, contribuindo para direcionar um tratamento adequado

Avaliação da técnica de PCR em tempo real no diagnóstico da infecção pelo HTLV-I / Evaluation of the technique of real time PCR in the diagnosis of the infection for the HTLV-I

Os vírus linfotrópicos de células T humanas do tipo I (HTLV-I) e do tipo II (HTLV-II) são retrovírus humanos que causam destruição e/ou transformação nos linfócitos T. A transmissão ocorre através de relações sexuais, transfusões sanguíneas e produtos hemoderivados, agulhas e seringas contaminadas, da mãe infectada para seu filho, especialmente através do aleitamento materno. O diagnóstico da infecção pelo HTLV-I/II é feito, habitualmente, com testes sorológicos, baseados na pesquisa de anticorpos contra antígenos do vírus presentes no soro do indivíduo infectado. Como os genomas provirais do HTLV-I e HTLV-II exibem grande homologia, há uma expressiva sororeatividade cruzada. Assim, em muitos casos, a detecção de anticorpos anti-HTLV-I/II embora caracterize a infecção viral, não permite que se estabeleça a distinção entre ambos os agentes. Os testes moleculares empregados para o diagnóstico dos vírus HTLV-I/II, baseiam-se na pesquisa de seqüências genômicas provirais permitindo, com isso, o diagnóstico da infecção pelo antes do aparecimento de qualquer sinal ou sintoma. A carga proviral de HTLV em indivíduos infectados pode ser determinada através da utilização da PCR em tempo real, uma técnica mais rápida e com menor risco de contaminação que a PCR simples ou nested PCR. Para isso, 63 amostras, sendo 33 amostras de indivíduos com sorologia reagente para HTLV e 30 amostras de doadores de sangue da Fundação HEMOPE foram analisadas para identificação do tipo viral (I ou II) e determinação da carga proviral. A sensibilidade da PCR qualitativa, para identificação do tipo viral, em relação à sorologia foi de 87,5 por cento (IC 95 por cento: 70,1-95,9 por cento) e a especificidade foi de 100 por cento (IC 95 por cento: 85,9-100,0 por cento). Já a sensibilidade e especificidade da PCR em tempo real foram de 100 porcento (IC 95 por cento: 86,7-100,0 por cento) e 96,67 por cento (IC 95 por cento: 80,9-99,8 por cento), respectivamente. A carga proviral dos indivíduos reagentes na sorologia variou entre 13 cópias/ 106 células PBMC e 343820 cópias/106 células PBMC. Nosso estudo também observou que os indivíduos com PET/MAH tiveram carga proviral mais elevada que a dos indivíduos assintomáticos. A utilização da PCR em tempo real na rotina de monitoramento clínico dos indivíduos infectados permitirá um papel relevante na identificação do vírus e na determinação simultânea da carga proviral, contribuindo para direcionar um tratamento adequado(AU)