Comparative analysis of SARS-CoV-2 variants Alpha (B.1.1.7), Gamma (P.1), Zeta (P.2) and Delta (B.1.617.2) in Vero-E6 cells: ultrastructural characterization of cytopathology and replication kinetics.

This study compares the effects of virus-cell interactions among SARS-CoV-2 variants of concern (VOCs) isolated in Brazil in 2021, hypothesizing a correlation between cellular alterations and mortality and between viral load and transmissibility. For this purpose, reference isolates of Alpha, Gamma, Zeta, and Delta variants were inoculated into monolayers of Vero-E6 cells. Viral RNA was quantified in cell supernatants by RT‒PCR, and infected cells were analyzed by Transmission Electron Microscopy (TEM) for qualitative and quantitative evaluation of cellular changes 24, 48, and 72 hours postinfection (hpi). Ultrastructural analyses showed that all variants of SARS-CoV-2 altered the structure and function of mitochondria, nucleus, and rough endoplasmic reticulum of cells. Monolayers infected with the Delta variant showed the highest number of modified cells and the greatest statistically significant differences compared to those of other variants. Viral particles were observed in the cytosol and the cell membrane in 100 % of the cells at 48 hpi. Alpha showed the highest mean particle diameter (79 nm), and Gamma and Delta were the smallest (75 nm). Alpha and Gamma had the highest particle frequency per field at 48 hpi, while the same was observed for Zeta and Delta at 72 hpi and 24 hpi, respectively. The cycle threshold of viral RNA varied among the target protein, VOC, and time of infection. The findings presented here demonstrate that all four VOCs evaluated caused ultrastructural changes in Vero-E6 cells, which were more prominent when infection occured with the Delta variant.

Comparative analysis of SARS-CoV-2 variants Alpha (B.1.1.7), Gamma (P.1), Zeta (P.2) and Delta (B.1.617.2) in Vero-E6 cells: ultrastructural characterization of cytopathology and replication kinetics

Abstract This study compares the effects of virus-cell interactions among SARS-CoV-2 variants of concern (VOCs) isolated in Brazil in 2021, hypothesizing a correlation between cellular alterations and mortality and between viral load and transmissibility. For this purpose, reference isolates of Alpha, Gamma, Zeta, and Delta variants were inoculated into monolayers of Vero-E6 cells. Viral RNA was quantified in cell supernatants by RT‒PCR, and infected cells were analyzed by Transmission Electron Microscopy (TEM) for qualitative and quantitative evaluation of cellular changes 24, 48, and 72 hours postinfection (hpi). Ultrastructural analyses showed that all variants of SARS-CoV-2 altered the structure and function of mitochondria, nucleus, and rough endoplasmic reticulum of cells. Monolayers infected with the Delta variant showed the highest number of modified cells and the greatest statistically significant differences compared to those of other variants. Viral particles were observed in the cytosol and the cell membrane in 100 % of the cells at 48 hpi. Alpha showed the highest mean particle diameter (79 nm), and Gamma and Delta were the smallest (75 nm). Alpha and Gamma had the highest particle frequency per field at 48 hpi, while the same was observed for Zeta and Delta at 72 hpi and 24 hpi, respectively. The cycle threshold of viral RNA varied among the target protein, VOC, and time of infection. The findings presented here demonstrate that all four VOCs evaluated caused ultrastructural changes in Vero-E6 cells, which were more prominent when infection occured with the Delta variant.

Modelos animais para infecção experimental pelo vírus Zika: uma revisão sistemática / Animal models for experimental Zika virus infection: a systematic review

Objetivo: Investigar na literatura modelos animais utilizados para pesquisa com o vírus Zika em que haja a possibilidade de quantificação de carga viral e análises histopatológicas. Métodos: Trata-se de uma revisão sistemática redigida de acordo com as diretrizes do método PRISMA (2020). Os autores realizaram a busca inicial de artigos nas plataformas PubMed, Embase, Google Acadêmico, LILACS e Scielo. Resultados: Foram encontrados inicialmente 735 artigos, dos quais 27 foram incluídos após avaliação pelos critérios de inclusão e exclusão. Camundongos e primatas não-humanos foram as espécies mais utilizadas (88,89% dos estudos). A cepa viral mais frequente foi a PRVABC59 (Porto Rico, 2015) e, em 77,78% dos estudos, o vírus foi inoculado por via subcutânea. Entre os sinais clínicos mais reportados estão a conjuntivite/secreção ocular, paralisia dos membros inferiores, letargia e postura arqueada. As análises histopatológicas foram feitas principalmente em cérebro e presença de infiltrado inflamatório e degeneração celular foram as alterações mais comuns. Considerações finais: Todos os modelos animais analisados apresentaram manifestações clínicas relevantes da infecção pelo vírus Zika. No entanto, a maior parte dos estudos investiga danos cerebrais, não caracterizando os danos histopatológicos em outros órgãos. Além disso, considerando a ampla biodiversidade de espécies, novos modelos animais podem ser investigados.

Caracterização físico-química de três xenoenxertos utilizados na implantodontia / Physicochemical characterization of three xenografts used in implant dentistry

Os biomateriais de origem xenógena, utilizados como substitutos ósseos, têm sido alvo de grande interesse clínico, devido às suas propriedades de biocompatibilidade e osteocondução. As propriedades físico-químicas dos biomateriais exercem uma grande influência sobre sua interação com as células e subsequentemente desempenham um papel importante na resposta biológica in vivo dos materiais. As características físicas envolvem características microestruturais de forma e tamanho das partículas, porosidade, densidade e área de superfície. A caracterização em termos da química envolve a determinação da composição química e a distribuição dos elementos no biomaterial. Sendo assim, o objetivo deste trabalho foi avaliar comparativamente as propriedades físico-químicas de três xenoenxertos de origem bovina comercialmente disponíveis no mercado nacional para tratamento de perdas ósseas na Odontologia. A Microscopia Eletrônica de Varredura (MEV) evidenciou discrepâncias no tamanho das partículas dos biomateriais estudados quando relacionados com os dados fornecidos pelo fabricante. Os difratogramas obtidos pela Difração de Raios X (DRX), apontaram dois biomateriais mais amorfos, Bio-Oss® e Lumina-Bone Porous®, e um mais cristalino Extra Graft XG13®, corroborando com a análise Termogravimétrica que evidenciou significativa perda de massa nos dois biomateriais amorfos. O biomaterial Extra Graft XG13® não apresentou porosidade detectável pelo método de análise Área superficial específica e porosidade (Brunauer, Emmett and Teller BET). Os materiais Bio-Oss® e Lumina Bone®, mostraram presença significativa do grupo hidroxila na análise do infravermelho, confirmando a presença de água no biomaterial. Os biomateriais estudados apresentaram grandes discrepâncias quanto a cristalinidade, porosidade e área superficial entre si, essas características impactam na resposta biológica após a implantação e, por isso, devem ser avaliadas de acordo com a indicação clínica.