Análise da resposta inflamatória em fígado e baço de cães naturalmente infectados por Leishmania infantum

RESUMO

A Leishmaniose Visceral (LV) é uma doença complexa e os sinais clínicos no cão se apresentam de forma muito semelhante aos que ocorrem em humanos. Entre os órgãos afetados pela LV o fígado e o baço aparentam ser afetados em diferentes tempos e com respostas imune e evolução clínica diferenciada. A via de sinalização da MAP4K4 está relacionada a mau prognóstico em diversas patologias além de ser responsável pela ativação, migração, proliferação e apoptose celular. Além disso, MAP4K4 está envolvida na produção de TNFα e dano tecidual. O presente trabalho tem como objetivo avaliar o escore clínico de cães naturalmente infectados com Leishmania infantum, a carga parasitária dos animais e a organização do baço correlacionando esses dados com o perfil inflamatório em fígado e baço de cães por meio da expressão gênica e proteica de MAP4K4 e TNFα e expressão gênica de IFNγ, IL-10, CXCL-8 e CCL-2, além de analisar a presença ou não de dano tecidual nesses tecidos por meio da observação de alterações histológicas e deposição de laminina e fibronectina em baço e fígado e das enzimas hepáticas séricas. Após a separação dos grupos entre as diferentes organizações do baço e a carga parasitária dos animais e pelo escore clínico, não identificamos diferenças entre os diversos marcadores quando separados pela carga parasitária tanto em baço quanto em fígado. MAP4K4 e TNFα encontraram-se intimamente associadas a reações granulomatosas e a macrófagos hepáticos. Dano tecidual foi observado em baço e fígado através do aumento da deposição de fibronectina em animais com alto escore clínico. A expressão gênica de CXCL-8 se manteve relativamente constante em todos os grupos analisados e CCL-2 encontrou-se aumentada nos animais com baço desorganizado e alta carga (DAC) e em animais com médio escore clínico. Não foram observadas alterações, entre os grupos analisados, nas expressões de IFNγ e IL-10 em baço e fígado dos animais. Observamos que a expressão gênica de TNFα estava aumentada em animais DAC, no fígado, quando comparados a animais com baço organizado e baixa carga (OBC) e no baço de animais que apresentaram médio escore clínico quando com parados a animais com baixo e alto escore. Além disso, MAP4K4 teve sua expressão aumentada no fígado de animais com baixo escore clínico quando comparados a animais de alto escore, esse aumento também foi observado no baço de animais OBC e DAC quando comparados a animais com baço desorganizado e baixa carga (DBC). O aumento da expressão gênica de MAP4K4 nos estágios iniciais da doença e a sua relação com áreas de reação granulomatosa sugerem que esta via de sinalização pode estar relacionada com a exacerbação inespecífica da resposta imune e da injúria tecidual, porém sem impactar na carga parasitária