Variation in the saccharide lectin binding pattern from different isolates of Tritrichomonas foetus.

Tritrichomonas foetus (T. foetus) is the causal agent of bovine tritrichomonosis (BT), a venereal disease that causes significant economic losses in the bovine livestock industry. The structural organization of T. foetus presents a cell membrane, an undulating membrane which extends along the parasite, three anterior flagella and a recurrent posterior flagellum. The interaction between the superficial glycoconjugates of the parasite and the host cell is one of the most relevant pathogenic mechanisms. In the present study, we analyzed the saccharide pattern through lectincytochemistry of the cell membrane, undulating membrane, cytoplasm and flagella of 28 isolates of T. foetus. Lectins that labeled most of the isolates were WGA, Con-A, RCA-I, LCA, GS-II and PHA-E showing the presence of D-mannose, D-glucose, N-acetylglucosamine and sialic acid. On the other hand, no labeling was observed in any of the structures with VVA, STA, LEA, Jacalin, GS-I, SJA, PHA-L, DSA, and weak labeling was observed with DBA, PNA, SBA and UEA I, showing therefore a low expression of N-acetylgalactosamine, L-fucose and galactose. In addition, GS II labeled in a granular pattern when lectincytochemistry was positive, whereas LCA strongly labeled the membranes and weakly the cytoplasms. The labeling variations observed among the isolates analyzed in the present work, could be related to differences in the pathogenic behavior of the isolates.

Experimentally induced intravaginal Tritrichomonas foetus infection in a mouse model

A necessidade de esclarecer a relação agente-hospedeiro na tricomoníase bovina deu motivo para o uso de modelos experimentais alternativos ao bovino. O camundongo BALB/c resultou como espécie mais adequada para a infeção vaginal com Tritrichomonas foetus, requerendo uma estrogenização prévia. Visando a necessidade de um modelo experimental sem estrogenização persistente e com ciclos estrais normais, foi avaliada a instalação e persistência da infeção vaginal no camundongo BALB/c com diferentes quantidades de T. foetus, em dois grupos experimentais. O Grupo A foi tratado com 5µg de 3-benzoato de beta estradiol, para sincronizar o estro, 48 h antes da inoculação vaginal com T. foetus, e o Grupo B foi inoculado durante o estro natural. O efeito do 3-benzoato de beta estradiol decresceu gradualmente. A totalidade dos animais ciclaram regularmente após 5-7 dias pós-tratamento. Após a primeira semana pós-infecção, todos os animais foram amostrados durante 34 semanas, para avaliar o andamento da infeção vaginal e o estádio de cío. O Grupo A apresentou 93,6% de animais infetados e o Grupo B 38%. Com diferentes dosagens de T. foetus se obteve a instalação e persistência da infecção vaginal durante 34 semanas. Embora tenham-se registrados diferentes comportamentos entre cada um dos lotes dos Grupos A e B, não houveram diferenças significativas entre as doses infectantes. O tratamento com 3-benzoato de beta estradiol teve efeito favorável na instalação da infecção (P<0,0001), porém não teve influência na persistência (P= 0,1097). Em função dos resultados obtidos, apresenta-se um modelo experimental em camundongo, adequado para aprofundar estudos sobre mecanismos de patogenicidade, resposta imune, avaliação protetora de imunógenos e o efeito terapêutico de fármacos.

Immunohistochemical detection of Tritrichomonas foetus in experimentally infected mice

A necessidade de aumentar o conhecimento da patogenia da tricomoníase genital bovina (BGT) conduziu ao uso de modelos experimentais alternativos como o camundongo. Näo obstante, é necessário elucidar a dinâmica da infecçäo nesta espécie e avaliar as diferentes fases da colonizaçäo e evoluçäo das alterações patológicas. A imunohistoquímica (IHQ) oferece vantagens sobre as técnicas histoquímicas de rotina para a observaçäo do protozoário em tecidos, detritos celulares e dentro de macrófagos. O objetivo do presente trabalho foi demonstrar pelo uso de uma técnica de IHQ a presença de Tritrichomonas foetus no sistema reprodutivo de camundongos infectados. Camundongos BALB/c fêmeas foram infectados pela via intravaginal, com uma suspensäo de T. foetus, na fase de estro, detectado com citologia exfoliativa vaginal. Depois de 10 semanas, os animais foram sacrificados; útero e vagina forma fixados e processados para histologia. Alguns cortes foram corados com HE. O restante dos cortes foi processado para IHQ. Foi usado um soro policlonal imunoadsorvido anti-T. foetus. A técnica de avidina-biotina (HistoMouse, ZymedÖ) foi empregada. Os estudos histopatológicos mostraram uma dilataçäo das glândulas uterinas, presença de macrófagos no lúmen do órgäo e parte interna das glândulas endometriais. T. foetus näo foi identificado por esse método. A IHQ permitiu identificar as mesmas lesões observadas e a presença do protozoário no endométrio, nas glândulas endometriais, no lúmen uterino e dentro de neutrófilos e macrófagos. O estudo citológico em lâminas coradas por IHQ, mostrou T. foetus aderido a células epiteliais, ou dentro de macrófagos. Esta técnica demonstra ser uma ferramenta útil para o estudo da patogenia da tricomoníase genital bovina (BGT) utilizando-se o camundongo como modelo experimental.