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1.
Methods ; 58(4): 385-91, 2012 Dec.
Artículo en Inglés | MEDLINE | ID: mdl-22922268

RESUMEN

A variety of methods exist for inducible control of DNA transcription in yeast. These include the use of native yeast promoters or regulatory elements that are responsive to small molecules such as galactose, methionine, and copper, or engineered systems that allow regulation by orthogonal small molecules such as estrogen. While chemically regulated systems are easy to use and can yield high levels of protein expression, they often provide imprecise control over protein levels. Moreover, chemically regulated systems can affect many other proteins and pathways in yeast, activating signaling pathways or physiological responses. Here, we describe several methods for light mediated control of DNA transcription in vivo in yeast. We describe methodology for using a red light and phytochrome dependent system to induce transcription of genes under GAL1 promoter control, as well as blue light/cryptochrome dependent systems to control transcription of genes under GAL1 promoter or LexA operator control. Light is dose dependent, inexpensive to apply, easily delivered, and does not interfere with cellular pathways, and thus has significant advantages over chemical systems.


Asunto(s)
Regulación Fúngica de la Expresión Génica/efectos de la radiación , Luz , Saccharomyces cerevisiae/genética , Transcripción Genética/efectos de la radiación , Proteínas de Arabidopsis/biosíntesis , Proteínas de Arabidopsis/genética , Factores de Transcripción con Motivo Hélice-Asa-Hélice Básico/biosíntesis , Factores de Transcripción con Motivo Hélice-Asa-Hélice Básico/genética , Criptocromos/biosíntesis , Criptocromos/genética , Proteínas de Unión al ADN/biosíntesis , Proteínas de Unión al ADN/genética , Galactoquinasa/genética , Genes Reporteros , Ficobilinas/farmacología , Ficobilinas/efectos de la radiación , Ficocianina/farmacología , Ficocianina/efectos de la radiación , Fitocromo B/biosíntesis , Fitocromo B/genética , Regiones Promotoras Genéticas , Unión Proteica , Mapeo de Interacción de Proteínas/métodos , Proteínas Recombinantes de Fusión/biosíntesis , Proteínas Recombinantes de Fusión/genética , Saccharomyces cerevisiae/metabolismo , Saccharomyces cerevisiae/efectos de la radiación , Proteínas de Saccharomyces cerevisiae/biosíntesis , Proteínas de Saccharomyces cerevisiae/genética , Factores de Transcripción/biosíntesis , Factores de Transcripción/genética , Técnicas del Sistema de Dos Híbridos , beta-Galactosidasa/biosíntesis , beta-Galactosidasa/genética
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