Estudo da participação de mastócitos no processo de fibrose pulmonar induzido por sílica em camundongos / Study of mast cell involvement in silica-induced pulmonary fibrosis process in mice

RESUMO

A silicose é uma doença ocupacional, caracterizada pela presença de fibrose crônica nos pulmões. Evidências apontam para a implicação de mastócitos em algumas doenças de caráter fibrótico. Assim, no presente estudo, buscamos investigar a participação de mastócitos durante o estabelecimento do quadro de silicose pulmonar em camundongos, utilizando análise tanto qualitativa como quantitativa. A ativação de mastócitos por partículas de sílica in vitro e a potencial interação entre mástócitos e fibroblastos foram igualmente avaliadas. Partículas de sílica (10 mg) foram administradas intranasalmente em camundongos Swiss-Webster e as análises realizadas nos tempos de 7, 14 e 28 dias após a indução da silicose. Parâmetros como morfologia pulmonar e número de mastócitos, assim como expressão de stem-cell factor (SCF), foram avaliados por meio de colorações específicas e imunohistoquímica, respectivamente. Para análise da ativação de mastócitos in vitro, foram utilizadas células derivadas a partir da medula óssea (BMMCs) e a liberação de Beta-hexosaminidase (Beta-hex) como parâmetro de ativação. A análise do tecido pulmonar de camundongos silicóticos revelou a presença de uma intensa resposta fibrótica e numerosos granulomas, majoritariamente localizados na região peribrônquica, com início detectado no dia 7 e máximo sendo observado no tempo de 28 dias pós-sílica. Verificamos um aumento acentuado no número de mastócitos pulmonares, tanto em 14 quanto em 28 após a sílica, com claro predomínio de células apresentando fenótipo do tipo conjuntivo. De forma interessante, vimos que este fenômeno foi precedido por aumento na expressão de SCF em comparação ao verificado no caso dos animais controles. Na condição da exposição de BMMC às partículas de sílica in vitro evidenciamos sinais claros de ativação celular, conforme atestado pelo aumento na percentagem de Beta-hex liberada. Esta resposta mostrou-se sensível ao tratamento com a toxina pertussis sugerindo, então...murino.