RESUMO
O objetivo deste estudo foi padronizar variaveis tecnicas para o armazenamento de Plasmodium falciparum e de seus componentes antigenicos. Sedimentos de parasitas foram obtidos do cultivo in vitro de P. falciparum e estocados em diferentes temperaturas por diferentes periodos de tempo. De cada variavel, foram extraidos os componentes antigenicos com detergente anfotero Zwittergent na presenca e na ausencia de inibidores de protease e submetidos ou nao a posterior dialise. Os produtos foram estocados por 15, 30 e 60 dias em diferentes temperaturas e caracterizados por SDS-PAGE. A atividade antigenica de cada extrato foi determinada por ELISA e Western blotting usando soros positivos e negativos para anticorpos IgG anti-formas eritrocitarias de P. falciparum. Os extratos antigenicos de parasitas estocados ate 10 dias a -20 graus Celsius ou por 2 meses a -70 graus Celsius e tratados com inibidores de protease, sob as diferentes condicoes de armazenamento, apresentaram melhor definicao das bandas proteicas no SDS-PAGE e Western blot e melhores resultados no ELISA, permitindo diferenciacao segura dos soros positivos e negativos
Assuntos
Técnicas In Vitro , Plasmodium falciparum/imunologia , Padrões de Referência , Testes Sorológicos/métodos , Apresentação de Antígeno , Antígenos de Protozoários/imunologia , Western Blotting , Preparações Derivadas , Ensaio de Imunoadsorção Enzimática , Fatores de TempoRESUMO
Mais de 500.000 casos novos de malaria foram notificados no Brasil, em 1992. P. falciparum and P. vivax sao as especies responsaveis por 99,3 por cento dos casos. O diagnostico precoce e indispensavel para inicio do tratamento adequado. Neste trabalho, apresentamos or resultados do metodo tradicional para a deteccao de plasmodios, gota espessa, e os resultados de metodos alternativos estudados: imunofluorescencia indireta com anticorpo policlonal anti-P. falciparum e QBC-metodo, em grupos populacionais bem definidos....