Adherencia y potenciales eventos adversos prevenidos durante la administración de medicamentos endovenosos empleando bombas de infusión inteligentes en cuatro unidades de cuidados intensivos en Colombia / Adherence and potential adverse events prevented during the administration of intravenous medications using Smart infusion pump in four intensive care units in Colombia

Resumen Introducción: Las bombas de infusión inteligentes, constituyen una herramienta útil para la administración segura de medicamentos endovenosos dado que permiten prevenir potenciales eventos adversos. Objetivo: Evaluar la adherencia y los potenciales eventos adversos prevenidos, durante la administración de medicamentos endovenosos empleando bombas de infusión inteligentes. Metodología: Estudio observacional, realizado en cuatro unidades de cuidados intensivos usando datos del software Hospira MedNetTM. Un análisis descriptivo fue llevado a cabo junto con un análisis bivariado empleando una prueba U de Mann-Whitney, una prueba de Kruskal-Wallis y un test de Bonferroni para evaluar la adherencia y los potenciales eventos adversos prevenidos por año y servicio. Resultados: La adherencia fue del 74,0%, se presentaron 78.299 alertas de seguridad y se previnieron 4,54% (n=16.288) potenciales eventos adversos. Se encontraron diferencias entre el primer y segundo año en la adherencia [Mediana: 69,15 (Q1:64,2-Q3:75,5) Vs Mediana: 84,2(Q1:72,15-Q3:89,05), p<0.001], adherencia a la seguridad [Mediana: 87,1% (Q1:83,05-Q3:91,2) Vs Mediana: 94,05 (Q1:89,95-Q3:96,2), p<0.001] y las ediciones de alertas de limite relativo [Mediana:17,0 (Q1:8,5-Q3:24,5) Vs Mediana: 12,0 (Q1:7,0-Q3:17,5), p=0.013]. La solución salina, la norepinefrina, el lactato de ringer, la piperacilina-tazobactam, la nitroglicerina y la heparina presentaron el mayor número de alertas de seguridad. Conclusión: Se encontró una buena adherencia (uso de la farmacoteca) y adherencia a la seguridad (indicador de uso de la bomba), con una reducción de los potenciales eventos adversos; así el uso de bombas inteligentes podría contribuir en la prevención de potenciales errores durante la administración de medicamentos endovenosos en la unidad de cuidados intensivos.

Abstract Introduction: Smart infusion pumps have become a useful tool for the safe administration of intravenous medications, since they allow the prevention of potential adverse events. Objetive: To assess adherence and potential adverse events prevented during intravenous medication administration using smart infusion pumps. Methods: Observational study, conducted in four intensive care units using data from Hospira MedNetTM software. A descriptive analysis was carried out together with a bivariate analysis using a Mann-Whitney U test, a KruskalWallis test and a Bonferroni test to assess adherence and potential adverse events prevented by year and service. Results: Adherence was 74.0%, 78,299 safety alerts were presented and 4.54% (n = 16,288) potential adverse events were prevented. Differences were found between the first and second year in adherence [Median: 69.15 (Q1: 64.2-Q3:75.5) versus Median: 84.2 (Q1: 72.15-Q3: 89.05), p<0.001]. Likewise safety adherence [Median: 87.1% (Q1: 83.05-Q3: 91.2) versus Median: 94.05 (Q1: 89.95-Q3: 96.2), p<0.001] and the relative limit alert editions [Median: 17.0 (Q1: 8.5-Q3: 24.5) versus Median: 12.0 (Q1: 7.0-Q3: 17.5), p=0.013]. The saline solution, norepinephrine, ringer's lactate, piperacillin-tazobactam, nitroglycerin and heparin presented the highest number of safety alerts. Conclusions: Adequate adherence (use of the drug library) and safety adherence (indicator of pump use) were found, with a reduction in potential adverse events; thus, the use of smart pumps could contribute to the prevention of potential errors during the administration of intravenous medications in the intensive care unit.

Desarrollo de un método de transcripción inversa seguida de reacción en cadena de la polimerasa para la detección del virus de la fiebre amarilla / Development of a reverse transcription polymerase chain reaction method for yellow fever virus detection

Introduction. Yellow fever is considered a re-emerging disease and is endemic in tropical regions of Africa and South America. At present, there are no standardized or commercialized kits available for yellow fever virus detection. Therefore, diagnosis must be made by time-consuming routine techniques, and sometimes, the virus or its proteins are not detected. Furthermore, co-circulation with other flaviviruses, including dengue virus, increases the difficulty of diagnosis. Objective. To develop a specific reverse transcriptase-polymerase chain reaction (RT-PCR) and nested PCR-based assay to improve the detection and diagnosis of yellow fever virus using both serum and fresh tissue samples. Materials and methods. RT-PCR primers were designed to amplify a short fragment of all yellow fever virus genotypes reported. A second set of primers was used in a nested PCR to increase sensitivity. Thirty-three clinical samples were tested with the standardized reaction. Results. The expected amplicon was obtained in 25 out of 33 samples analyzed using this approach, and 2 more samples tested positive after a subsequent nested PCR approach. Conclusion. This improved technique not only ensures the specific detection of a wide range of yellow fever virus genotypes but also may increase the sensitivity of detection by introducing a second round of amplification, allowing a rapid differential diagnosis between dengue and yellow fever infection, which is required for effective surveillance and opportune epidemiologic measures.

Introducción. La fiebre amarilla se considera una enfermedad reemergente y endémica en regiones tropicales de África y Suramérica. Actualmente, no existen estuches estandarizados o comerciales disponibles para la detección del virus de la fiebre amarilla y, por lo tanto, el diagnóstico debe hacerse mediante técnicas de rutina que consumen mucho tiempo y algunas veces no garantizan la detección del virus o de sus proteínas. Además, la cocirculación con otros flavivirus, incluyendo el del dengue, hacen el diagnóstico más complicado. Objetivo. Desarrollar un ensayo específico de amplificación basado en transcripción inversa seguida de reacción en cadena de la polimerasa, con el fin de mejorar la detección y el diagnóstico de la fiebre amarilla, tanto a partir de suero como de tejido fresco. Materiales y métodos. Se diseñaron iniciadores específicos para amplificar un fragmento conservado del virus de la fiebre amarilla. Un segundo par de iniciadores se usó en una reacción de amplificación anidada para incrementar la sensibilidad. Se probaron 33 muestras clínicas con la técnica estandarizada. Resultados. El amplímero esperado se obtuvo en 25 de las 33 muestras analizadas usando este método y 2 más resultaron positivas después de la reacción anidada. Conclusión. Esta técnica mejorada garantiza la detección de todos los genotipos virales de fiebre amarilla y puede incrementar la sensibilidad del ensayo introduciendo una segunda etapa de amplificación, lo cual permite el diagnóstico diferencial con infección por dengue y otros flavivirus, lo cual es de gran importancia para la vigilancia y la toma de medidas epidemiológicas oportunas.

Importancia de los análisis serológicos, moleculares y virológicosen la vigilancia de la fiebre amarilla en Colombia, 2006-2008 / Serological, molecular and virological analyses associated with yellow fever surveillance in Colombia

Introducción. La fiebre amarilla es una fiebre hemorrágica viral inmunoprevenible que continúa causando importante morbilidad y mortalidad en regiones tropicales y subtropicales. En Colombia hay aproximadamente cinco millones de personas en riesgo de adquirir la infección. Objetivo. Describir la importancia de los análisis serológicos, moleculares y virológicos en la vigilancia de la fiebre amarilla en Colombia, con base en los resultados obtenidos de muestras recibidas en el Laboratorio de Arbovirus del Grupo de Virología del Instituto Nacional de Salud, entre 2006 y 2008, y recalcar la relevancia de una oportuna y adecuada recolección de muestras para la confirmación de casos. Materiales y métodos. Se procesaron 2.096 muestras de suero y tejidos utilizando las pruebas ELISA para IgM contra fiebre amarilla, aislamiento viral-inmunofluorescencia indirecta y transcriptasa inversa-reacción en cadena de la polimerasa. Las muestras positivas se correlacionaron con los hallazgos clínicos y epidemiológicos para su interpretación y confirmación.Resultados. El 82% de los casos confirmados por histopatología en este período también se confirmaron en nuestro laboratorio por técnicas serológicas y moleculares; estos casos provenían de zonas selváticas y del piedemonte de la Cordillera Oriental.Conclusión. Se observa la necesidad de seguir manteniendo y fortaleciendo los procesos de vigilancia en las regiones de mayor circulación del virus, para la captación oportuna de casos. Se recalca la importancia del diagnóstico por medio de las técnicas descritas, las cuales se pueden realizar en muestras de pacientes vivos, contrario a las pruebas histopatológicas que requieren muestras de casos fatales.

Introduction. Yellow fever is an immunopreventable viral hemorrhagic fever that causes high morbidity and mortality in tropical and sub-tropical regions. In Colombia, approximately 5 million persons are at risk of becoming infected with yellow fever virus.Objective. The serological, molecular and virological analyses on the yellow fever surveillance samples were summarized in order to indicate the importance of appropriate and timely sampling in the process of case confirmation. Materials and methods. The survey was based on samples received at the Arbovirus Laboratory, Virology Group, Instituto Nacional de Salud, Bogotá, during years 2006 to 2008. A total of 2,096 serum and tissue samples were tested for IgM antibodies against yellow fever by capture enzyme-linked immunosorbent assay, viral isolation-indirect fluorescence antibody technique, and reverse transcriptase-polymerase chain reaction. Positive samples were correlated with the clinical and epidemiological findings for their interpretation and confirmation.Results. Of the 15 yellow fever cases confirmed in Colombia during 2006-2008 by histopathological techniques, 82% were confirmed at the Arbovirus Laboratory using serologic and molecular techniques. The positive cases were distributed in the rainforest region and in the foothills of the eastern chain of the Andes mountains. Conclusion. The case distribution and prognosis illustrated the necessity of maintaining and strengthening the surveillance processes in those regions where the yellow fever virus is circulating. The cases must be recruited and diagnosed sufficiently early in order to use the above techniques in samples from live patients, in contrast to the histopathological procedures that require samples from fatal cases.

Estandarización de un método de concentración y detección de virus entéricos en aguas de consumo / Standardization of a method for concentration and detection of enteric viruses from drinking water

Introducción. Los virus entéricos se han visto implicados en brotes de enfermedad diarreica aguda, enfermedades transmitidas por alimentos, hepatitis A y meningitis aséptica, en los que el vehículo de transmisión del agente ha sido el agua.Objetivo. Estandarizar un método de concentración para la detección de virus entéricos en aguas de consumo.Materiales y métodos. Se concentraron 20 litros de agua a un volumen de 6 ml mediante filtración y ultrafiltración tangencial. Como controles positivos se prepararon soluciones de 20 litros a concentraciones virales de 1, 10, 50 y 100 TCID50 (Tissue Culture Infectious Dose 50%) de Poliovirus Sabin de tipo 1. Las partículas virales fueron recuperadas por cultivo en células sensibles a la infección e identificadas por amplificación del genoma viral mediante reacción en cadena de la polimerasa, siguiendo los estándares internacionales de los Centers for Disease Control and Prevention (CDC) de Atlanta. Resultados. Todos los controles positivos causaron efecto citopático en células de rabdomiosarcoma y L20B y fueron detectados por RT- PCR (Real Time- PCR) convencional, directamente de las muestras. Los controles negativos no mostraron efecto citopático ni amplificación viral por RT-PCR.Conclusiones. La ultrafiltración tangencial mostró ser un método rápido y eficaz al recuperar virus desde una TCID50, además de ser reproducible y sencillo. Tiene la ventaja de permitir la detección de su capacidad de contagiosidad viral por el cultivo celular, y la identificación por RT-PCR.

Introduction. Enteric viruses have been implicated in acute diarrheal disease, food-borne disease, hepatitis A and meningitis outbreaks, in which water was the vehicle of transmission.Objective. A concentration method was standardized for the detection of enteric viruses in drinking water. Materials and methods. Twenty liters of water were concentrated to 6 ml by filtration and tangential ultrafiltration. Viral solutions of 20 L each were prepared at 1, 10, 50 and 100 TCID50 of Sabin poliovirus type 1 as positive controls. Viral particles were recovered by tissue culture and detected by conventional polymerase chain reaction (PCR), according to the international standards recommended by the Enterovirus Laboratory at the Centers for Disease Control and Prevention, Atlanta, GA. Results. All positive controls showed cytopathic effect on L20B and RD cells and were amplified by conventional PCR directly from samples. Negative controls did not show any amplification or viral cytopathic effect. Conclusions. Tangential ultrafiltration for concentrating viruses proved to be a fast, efficient recovery and reproducible. It has the advantage of allowing the detection (at the 1 TCID50 level) and identification of viruses by RT-PCR and the demonstration of viral infectivity by tissue culture.

Brote de rabia humana transmitida por gato en el municipio de Santander de Quilichao, Colombia, 2008 / An outbreak of human rabies transmitted by a cat in the town of Santander de Quilichao, Colombia, 2008

Objetivos En marzo de 2008 ocurrió en el municipio de Santander de Quilichao- Cauca, Colombia, un brote de rabia de origen silvestre con 2 víctimas humanas. El presente artículo apunta a describir las técnicas diagnósticas de laboratorio, las acciones de investigación de campo y control de foco empleadas, y su significado epidemiológico e implicaciones en salud pública. Métodos La rabia se diagnosticó por inmunofluorescencia directa, prueba biológica en ratón, histopatología e inmunohistoquímica, y se tipificó utilizando anticuerpos monoclonales. La investigación de campo se enfocó en la búsqueda de contactos humanos y animales, identificación de casos sospechosos y búsqueda institucional de accidentes rábicos. El control de foco consistió en aplicación de tratamiento post exposición a la población expuesta, vacunación canina y felina, recolección y eliminación de animales callejeros y educación a la comunidad. Resultados Dos casos de rabia en humanos fueron diagnosticados y uno en gato por nexo epidemiológico. La variante antigénica 3 fue aislada de los casos humanos. Se vacunaron en total 11 369 caninos, 3 325 felinos y 217 humanos. Conclusiones Se confirma la amenaza para los humanos que representa la rabia en el ecosistema silvestre. El brote tuvo origen en vampiro y el transmisor a los humanos fue un gato confirmando a esta especie doméstica como vínculo entre la rabia de origen silvestre y el ecosistema urbano, por ende su importancia en el enfoque de las acciones de prevención y control de la rabia. Se resalta la necesidad de implementar y mantener acciones para el control de la rabia silvestre que permitan minimizar su impacto en humanos.

Objectives A sylvatic rabies outbreak during March 2008 caused two human deaths in the town of Santander de Quilichao in Cauca, Colombia. This article describes the diagnostic laboratory techniques used, the field investigation and focus control used, as well as this outbreak's epidemiological significance and implications for public health. Methods Rabies was diagnosed by direct immunofluorescence, biological tests involving inoculating mice, histopathology and immunohistochemistry and then typed by using monoclonal antibodies. Field investigation focused on searching for human and animal contacts, identifying suspicious cases and conducting an institutional search for rabid accidents. Focus control consisted of post-exposure treatment of the exposed population, vaccinating dogs and cats, collecting and eliminating stray animals and educating the community. Results Two human rabies cases were confirmed in the laboratory and another was inferred in a cat by epidemiological nexus. Antigenic variant 3 was isolated from the human cases. 11,369 dogs, 3,325 cats and 217 humans were vaccinated. Conclusions This study confirmed that rabies in the wild represents a threat for humans. The outbreak described here originated in vampire bats and was transmitted to humans by a cat, pointing out the nexus between wild rabies and the urban ecosystem which cats represent, thereby becoming a target for rabies' control and prevention activities. This study underlines the urgency of implementing and maintaining rabies control and prevention activities in the wild to minimise its impact on humans.

Mortalidad asociada con las temporadas de mayor circulación de los virus de la influenza en Bogotá, Colombia, 1997-2005 / Mortality associated with peak seasons of influenza virus circulation in Bogotá, Colombia, 1997-2005

OBJETIVO: Estimar el exceso de mortalidad potencialmente atribuible a los virus de la influenza A y B y al virus sincitial respiratorio humano (VSRH) en las temporadas de mayor circulación de los virus de la influenza en Bogotá, Colombia entre 1997 y 2005. MÉTODOS: Se relacionaron las tasas mensuales de mortalidad general, por neumonía en menores de 5 años y por neumonía y afecciones cardiovasculares en mayores de 60 años, en Bogotá, Colombia, con las temporadas de mayor circulación de los virus de la influenza en esa ciudad. Los datos de mortalidad se obtuvieron del Departamento Nacional de Estadísticas de Colombia; las temporadas de mayor circulación de los virus se definieron como los meses contiguos en los que el número de aislamientos era igual o superior a la mitad del total de los aislamientos del año. Se calcularon las razones de tasas de incidencia (RTI) y sus intervalos de confianza de 95 por ciento (IC95 por ciento). RESULTADOS: El virus de la influenza A mostró un patrón de circulación estacional, pero no el de la influenza B y el VSRH. La mayor circulación de los virus de la influenza se asoció con un incremento promedio anual de 5 por ciento en la mortalidad general durante el período estudiado (RTI = 1,05; IC95 por ciento: 1,046 a 1,064). En las temporadas de mayor circulación de los virus de la influenza, la mortalidad combinada por neumonía e influenza en todas las edades fue mayor en 11 por ciento que en el resto del período (RTI = 1,11; IC95 por ciento: 1,051 a 1,178). CONCLUSIONES: En las temporadas de mayor circulación de los virus de la influenza en Colombia puede aumentar la mortalidad, en particular por neumonía y afecciones cardiovasculares en mayores de 60 años. Deben emprenderse acciones de prevención específicas para prevenir la influenza, especialmente en estos dos grupos de edad.

OBJECTIVE: To estimate potential excess mortality attributable to influenza viruses A and B and human respiratory syncytial virus (HRSV) during peak seasons of influenza virus circulation in Colombia from 1997 to 2005. METHODS: A comparison of monthly, general mortality rates from pneumonia in children under 5 years of age and from pneumonia and cardiovascular disease in those more than 60 years of age in Bogota, Colombia, were compared to the city's peak seasons of influenza virus circulation. Mortality data were obtained from the National Bureau of Statistics of Colombia; peak seasons of virus circulation were defined as contiguous months in which the number of isolates was equal to or greater than half the total number of isolates for the year. Incidence rate ratios (IRR) and their 95 percent confidence intervals (95 percentCI) were determined. RESULTS: Influenza A demonstrated a pattern of seasonal circulation, but influenza B and HRSV did not. The increased circulation of influenza virus was associated with an average annual increase of 5 percent in overall mortality during the study period (IRR = 1.05; 95 percentCI: 1.046-1.064). During seasons of increased circulation of influenza viruses, the combined mortality from pneumonia and influenza for all ages was 11 percent higher than it was at other times (IRR = 1.11; 95 percentCI: 1.051-1.178). CONCLUSIONS: During peak seasons of influenza virus circulation in Colombia, there can be increased mortality, particularly from pneumonia and cardiovascular disease among those more than 60 years of age. Preventive actions specific to protecting against influenza should be taken, especially in these two age groups.

Brote de rabia urbana transmitida por perros en el distrito de Santa Marta, Colombia, 2006-2008 / Outbreak of urban rabies transmitted by dogs in Santa Marta, northern Colombia

Introducción. En el distrito de Santa Marta ocurrió un brote de rabia urbana entre abril de 2006 y enero de 2008, con cuatro casos fatales en humanos y 28 en perros. Objetivos. Describir el brote, las técnicas de diagnóstico de laboratorio y las acciones de control de foco empleadas. Medir el impacto de la vacunación antirrábica canina en términos de seroconversión de anticuerpos neutralizantes. Discutir el significado epidemiológico y las implicaciones en salud pública. Materiales y métodos. Los casos se diagnosticaron por inmunofluorescencia directa, prueba biológica en ratón e inmunohistoquímica. La tipificación viral se hizo por inmunofluorescencia indirecta. Las acciones de control consistieron en un censo canino, vacunación y tratamientos antirrábicos a la población expuesta, vacunación canina y felina, y educación comunitaria. La seroconversión fue investigada por medio de la prueba ELISA de captura. Resultados. La variante antigénica 1 se caracterizó en todos los casos. Se observó seropositividad en 77% de los perros vacunados y protección serológica contra la rabia, en 47%. No se observaron diferencias de la respuesta humoral entre sexos de los perros, pero sí existieron diferencias de los porcentajes de perros protegidos entre las comunas del distrito. Conclusiones. Este brote de rabia ha sido el de mayor magnitud en una ciudad colombiana, según los datos oficiales. Fue causado por perros, lo cual reitera la amenaza que aún representa la rabia urbana para la salud pública, a pesar de la existencia de vacunas eficientes. El control del brote se logró 20 meses después del primer caso en perros y 14 meses después de haberse iniciado la primera vacunación masiva en animales. Es necesario implementar y mantener acciones para el control de la rabia urbana y evitar su impacto en los humanos.

Introduction. An urban rabies outbreak occurred in the District of Santa Marta between April 2006 and January 2008, which resulted in the deaths of 4 humans and 28 dogs. Objectives. Three objectives were entertained—first, the diagnostic laboratory techniques were described as well as the rabies control actions taken; second, the impact of anti-rabies dog vaccination was assessed in terms of neutralizing antibody seroconversion; and third, the epidemiological significance and public health implications of the outbreak were examined. Materials and methods. Rabies diagnosis was achieved by direct immunofluorescence, inoculation of mice and immunohistochemistry. Typing of the virus was achieved by indirect immunofluorescence. Control activities included a dog population census, vaccination and treatments for persons exposed to rabies, mass vaccination of dogs and cats, and initiation of a community education program. Seroconversion was investigated by capture ELISA. Results. Antigenic variant 1 was detected in all cases. Of vaccinated dogs, 77% were seropositive, and 47% were seroprotected against rabies. No differences were found in the humoral response between dog gender; however significant differences in dog seroprotection were discovered between localized comunities in Santa Marta. Conclusions. The 2006-2008 urban rabies outbreak was the largest reported in a city in Colombia. It was caused by rabid dogs, and demonstrated that these animals are still a threat for human health despite the existence of efficient rabies vaccines. The control of the outbreak was achieved 20 months after the first rabies case in dogs, and 14 months after the initiation of the first mass vaccination of animals. The necessity of implementation and maintenance of rabies control strategies is underlined for minimizing human risk.

Seroprevalencia de infección por virus de la hepatitis B y por virus de la inmunodeficiencia humana en una población de pacientes con múltiples transfusiones en cuatro hospitales, Colombia, Sur América / Seroprevalence of hepatitis B virus and human immunodeficiency virus infection in a population of multiply-transfused patients in Colombia

Introducción. Aunque la transfusión de componentes sanguíneos es una terapia ampliamente utilizada, representa un riesgo de transmisión de agentes infecciosos. Objetivo. Como parte de la iniciativa sobre sangre segura promovida por la Organización Panamericana de la Salud, se realizó un estudio para estimar la seroprevalencia de infección por virus de la inmunodeficiencia humana y virus de la hepatitis B en pacientes con múltiples transfusiones en Colombia. Materiales y métodos. Entre febrero y septiembre de 2003, se llevó a cabo un estudio transversal de 500 pacientes con múltiples transfusiones, seleccionados en cuatro hospitales de las ciudades de Bogotá y Medellín. Las muestras de suero obtenidas se analizaron por inmunoensayo con estuches comerciales. Resultados. La frecuencia de seropositividad para el virus de la inmunodeficiencia humana fue de 1,8%, (IC95% 0,5-3,1). La frecuencia de seropositividad para el virus de la hepatitis B fue de 18,6% (IC95% 15,1-22,1). Los principales factores de riesgo fueron: recibir más de 48 unidades de sangre o componentes, tener diagnóstico de hemofilia, recibir transfusiones por un período mayor de un año, recibir sangre total, tener coinfección por virus de la hepatitis C y haber sido transfundido antes de 1993. Conclusiones. Este es el primer estudio epidemiológico realizado en Colombia con un número significativo de pacientes con múltiples transfusiones. El hallazgo más relevante es la elevada prevalencia de infección por virus de la hepatitis B y virus de la inmunodeficiencia humana observado en la población de hemofílicos, comparado con los otros cuatro grupos de pacientes con múltiples transfusiones.

Introduction. Although the transfusion of blood products is a common therapy, it carries risk of transmission of infections, especially hepatitus B virus (HBV) and human immunodeficiency virus (HIV). Objective. As part of the blood safety initiative, the Pan American Health Organization supported studies to estimate the prevalence of human immunodeficiency virus and hepatitis B virus infection in Colombia. Materials and methods. Between February and September 2003, a cross sectional study examined 500 multiply-transfused patients at four hospital centers in the cities of Bogotá and Medellín. The serum samples were analyzed by enzyme immunoassay (EIA) using commercial kits. Results. The seroprevalence of HIV infection was 1.8% (CI 95% 0.5-3.1). The seroprevalence of HBV infection was 18.6% (CI 95% 15.1-22.1). Six risk factors were associated with HIV and HBV infection: (1) receiving more than 48 units of blood or blood components, (2) diagnosis of hemophilia, (3) receiving transfusions for more than one year, (4) receiving whole blood, (5) co-infection with hepatitis C virus and (6) receiving transfusions before 1993. Conclusions. This is the first epidemiological study with a significant sample size performed in multiply-transfused patients in Colombia. The principal finding was the high prevalence of HBV and HIV infection in patients with diagnosis of hemophilia compared with the other five groups of multiply-transfused patients.

Detección por reacción en cadena de la polimerasa de transcriptasa inversa del virus de la fiebre amarilla en monos silvestres: una herramienta sensible para la vigilancia epidemiológica / Detection of yellow fever virus by reverse transcriptase polymerase chain reaction in wild monkeys: a sensitive tool for epidemiologic surveillance

Introducción. La fiebre amarilla es una enfermedad zoonótica mantenida en la naturaleza por primates no humanos; su vigilancia por técnicas sensibles de laboratorio es necesaria para hacer evidente la actividad viral en territorio selvático. Objetivo. Detectar el virus de la fiebre amarilla en muestras de tejido hepático de primates no humanos, mediante la técnica de reacción en cadena de la polimerasa de transcriptasa inversa (RT-PCR) con iniciadores diagnósticos específicos. Materiales y métodos. Se procesaron muestras de tejido hepático de cinco monos del genero Alouatta spp. encontrados muertos en territorio selvático de los departamentos de Cesar y Magdalena entre diciembre de 2003 y junio de 2004. Las muestras fueron tratadas con una solución de lisis para aislar el ARN viral que, posteriormente, fue utilizado en una RT-PCR, utilizando iniciadores específicos para fiebre amarilla; paralelamente, se identificaron proteínas virales mediante inmunohistoquímica sobre cortes de tejido hepático incluidos en parafina. Resultados. Se obtuvieron productos de amplificación del tamaño esperado, (424 pb) en cuatro de las muestras analizadas; estas muestras mostraron, además, una reacción inmunohistoquímica positiva, lo que confirma la presencia del virus. Conclusión. El hallazgo del virus de la fiebre amarilla en monos silvestres representa una evidencia de su actividad enzoótica en nuestro territorio, que incrementa el riesgo de transmisión a humanos y de urbanización por procesos de migración de la población. La detección por técnicas moleculares rápidas y específicas del virus en monos silvestres representa una herramienta de vigilancia epidemiológica que permite activar de manera precoz los sistemas de control necesarios para impedir brotes y epidemias.

Introduction. Yellow fever is a zoonotic infection maintained in nature by non-human primates. Appropriate surveillance with sensitive laboratory techniques is necessary to evidence viral activity in the tropical forest habitats of these primates. Objective. Yellow fever virus was detected in hepatic tissue samples from non-human primates by reverse transcriptase polymerase chain reaction (RT-PCR) technique using specific primers for diagnosis. Materials and methods. Hepatic tissue samples were processed from five monkeys belonging genus Alouatta spp found dead in sylvatic areas of Cesar and Magdalena Provinces, Colombia, between December 2003 and June 2004. Samples were treated with lysis buffer prior to the isolation of viral RNA, which was then subjected to reverse transcriptase polymerase chain reaction (RT-PCR) using yellow fever-specific primers. Simultaneously, viral proteins were identified by immunohistochemistry on parafin-embedded hepatic tissue. Results. The PCR method amplified fragments of the expected size (424 bp) in four of the tested samples. In addition, these samples showed a positive reaction by immunohistochemistry, supporting the evidence that the virus was present. Conclusion. The detection of yellow fever virus in wild monkeys was clear evidence of enzootic activity in northern Colombia. Increased probability of yellow fever transmission among human populations is indicated due to urbanization processes as a consequence of forced migration and displacement of the human populations. Molecular tests for rapid and specific detection of yellow fever in tissue samples of non-human primates is an important tool for epidemiologic surveillance. Rapid virus identification will permit the timely activation of control systems for prevention of further cases and epidemic situations.

Reducción de la transmisión madre hijo del VIH en Colombia: dos años de experiencia nacional, 2003-2005 / Reduction of VIH mother-to-child transmission in Colombia, two years of experience, 2003-2005

Introducción. Desde el 2003, en Colombia se desarrolla el Proyecto Nacional de Reducción de la Transmisión Madre Hijo de VIH, cuyo objetivo es prevenir la transmisión vertical de VIH mediante la incorporación de la prueba voluntaria de VIH durante el control prenatal, el tratamiento y la profilaxis antirretroviral en la gestante infectada y el niño expuesto, el parto por cesárea y la sustitución de la leche materna. Objetivo. Describir los resultados de la implementación de la estrategia de prevención de la transmisión madre hijo 2003-2005. Materiales y métodos. Se hizo el estudio descriptivo de la cobertura alcanzada, la probabilidad de transmisión vertical y los factores asociados y prevalencias registradas en cada departamento. Se exploró la probabilidad de transmisión según tratamiento y se identificaron las diferencias por regiones. Resultados. El proyecto se implementó en 757 municipios (68 por ciento), en los cuales se realizó la prueba de VIH a 200.853 gestantes, y se detectaron 377 infectadas (0,19 por ciento en la región Caribe, en Quindío y en Santander. Se completó el seguimiento a 285 mujeres y sus hijos, y se registraron 12 casos en niños. La probabilidad de transmisión con el suministro oportuno del protocolo (n=170) fue de 1,78 por ciento(IC95 por ciento: 0,37 a 5,13 por ciento). Los factores relacionados con la transmisión fueron: carga viral inicial mayor de 10.000/mm3, ausencia de control prenatal y captación tardía en el embarazo. No se encontraron diferencias estadísticas entre los esquemas antirretrovirales utilizados. La región Caribe tuvo menor cobertura del control prenatal py mayor captación tardía. Conclusiones. La reducción de la transmisión madre hijo de VIH es una intervención preventiva eficaz que favorece el fortalecimiento de los servicios de control prenatal. El sostenimiento de la estrategia con cobertura nacional debe ser una meta de los gobiernos nacional y regionales y de las entidades aseguradoras

Determinación de la permeabilidad viral de los condones de membrana de poliolefina al bacteriófago FX174 / Permeability to FX174 bacteriophages in polyolephin membrane condoms

En las membranas utilizadas para la fabricación de los condones existe la posibilidad de encontrar pequeños agujeros, lo cual pone en duda su efectividad como barrera para agentes infecciosos como los virus; por lo anterior, se estandarizó una técnica fundamentada en lacapacidad que tienen los virus bacteriófagos para atravesar membranas e infectar una determinada especie de bacterias, consistente en formar placas de lisis en una capa de crecimiento de la bacteria hospedera, para así evaluar la capacidad de barrera física de sesenta condones de membrana de poliolefina frente a la difusión del bacteriófago FX174(ATCC13706-B1) de 27 nm de diámetro, comparándolos con veinte condones de membrana de látex. Se simularon condiciones fisiológicas de presión, pH, tensión superficial, longitud y tiempo de exposición y título viral. Para el proceso se diseñó un sistema de presurización con el cual se inyectó aire comprimido a diez condones en forma simultánea. Se encontró que cuatro de sesenta condones de poliolefinas, y uno de veinte condones de látex fueron permeables al virus, evidenciándose que más de 93 por ciento de los condones evaluados mostraron capacidad de retener el virus. La diferencia de permeabilidad entre los dos tipos de membranas evaluadas no fue estadísticamente significativa ( p=0,7897)

A new continuous cell line from the mosquito Psorophora confinnis (Diptera: Culicidae) and its susceptibility to infections with some arboviruses

A new cell line, PC-0199-BR, was established from embryonated eggs of the mosquito Psorophora confinnis. To date (September 2000) it has had 62 continuous passages. This is the first report of a cell line of mosquitoes belonging to the genus Psorophora. Cell growth initially was achieved in the MM/VP12 medium, supplemented with 20 percent fetal bovine serum; however, the subcultures were later adapted to Grace's medium with 10 percent fetal bovine serum. Cell morphology in the primary cultures was heterogeneous; but later in the established cell line, the predominant cell type was epithelioid. Cultured cells were predominantly diploid (2n=6); however, chromosome abnormalities were observed in a small proportion of the cells in later passages. C and G band patterns were also determined in the karyotype. The cell line isozyme profiles coincided with pupae and adult samples of the species taken from the same colony. A preliminary arbovirus susceptibility study for the cell line was undertaken. No evidence was observed of contamination of the cell line with bacteria, fungi or mycoplasma

Establishment and characterization of a new continuous cell line from Lutzomyia longipalpis (Diptera: Psychodidae) and its susceptibility to infections with arboviruses and Leishmania chagasi

Embryonic tissue explants of the sand fly Lutzomyia longipalpis (Lutz & Neiva 1912) the main vector of Leishmania chagasi (Cunha and Chagas), were used to obtain a continuous cell line (Lulo). The tissues were seeded in MM/VP12 medium and these were incubated at 28ºC. The first subculture was obtained 45 days after explanting and 96 passages have been made to date. Lulo is composed of epithelioid cells, showed a 0.04 generations/hour exponential growth rate and population doubling time at 24.7 h. The cell line isoenzymatic profiles were determined by using PGI, PGM, MPI and 6-PGDH systems, coinciding with patterns obtained from the same species and colony's pupae and adults. The species karyotype characteristics were recognized (2n = 8), in which pair 1 is subtelocentric and pairs 2, 3 and 4 are metacentric. Lulo was free from bacterial, fungal, mycoplasmic and viral infection. Susceptibility to five arbovirus was determined, the same as Lulo interaction with Leishmania promastigotes.

Sarampión

EL presente es un artículo sobre el sarampión, enfermedad viral en camino de extinción en las Américas. Se hace una revisión histórica a nivel mundial y se destaca su importancia a la llegada de los conquistadores a territorio latinoamericano. Se expresan los hechos históricos de las complicaciones. El artículo describe los mecanismos de la patogénesis de la enfermedad a partir de la entrada del virus al hombre, haciendo énfasis en la respuesta inmune por parte del húesped. Las anotaciones sobre la epidemiología de la infección sarampionosa traen importantes datos que hacen posible dilucidar el actual problema de la enfermedad. Se hace una breve descripción de las manifestaciones clínicas en los casos no complicados y una extensa revisión de los métodos de laboratorio para confirmar tanto el enfermedad como para determinar el estado inmune de una persona. Además, Se hace una breve descripción de las clínicas en los casos no complicados y una extensa revisión de los métodos de laboratorio para confirmar tanto la enfermedad como para determinar el estado inmune de una persona. Además, se hace referencia a la modificación de una técnica por parte de uno de los autores y se presenta un breve resumen de las vacunas existentes con la modalidad de su aplicación.

Establishment and characterization of a cell line from the mosquito Anophles albimanus (Diptera: Culicidae)

A new cell line designated LSB-AA695BB, was established from embryos of the mosquito Anopheles albimanus. The primary culture was initiated in April, 1995, and the first passage was made 48 days later. Serial subcultures of the cells have been carried through 90 passages from April 1995 to February 1996. The cells were grown at 28ºC in MK/VP12 medium, supplement with 20 per cent fetal bovine serum; the pH tolerance ranged between 6.8 to 7.0. The cells have also been adapted to MM/Vp12 medium under the same pH, temperature and serum concentration. The majority of the cells were a fibroblast-type. Isoenzyme characterization showed a pattern similar to that of An. albimanus pupae and adults but distinct from Ae. taeniorhynchus and Ae. albopictus (C6/36) mosquito cell lines. The culture was shown to be free of mycoplasma, bacteria and fungi. Microsporidia contamination of transovarial transmission was controlled with 6.0 µg/ml of albendazole.

Evaluación de tres técnicas citogenéticas diferentes en los estudios morfométricos del cariotipo de Aedes taeniorhynchus (Diptera: culicidae) / Three different cytogenetic technique evaluation in the morphometrics studies of Aedes taeniorhynchus (Diptera: Culicidae) karyotype

Se efectuaron estudios morfométricos del cariotipo de Aedes taeniorhynchus, mosquito de interés médico-veterinario, por ser vector del virus de la encefalitis equina venezolana, tipo epidemo-epizoótico. En las preparaciones cromosómicas fueron utilizadas tres técnicas citogenéticas diferentes: squash, secado al aire y cultivos celulares. Estas se compararon entre sí para evaluar, en las metafase obtenidas, la longitud y morfología de los cromosomas. El número diploide de la especie fue de seis en todas la preparaciones cariológicas al utilizar cualquiera de los tres procedimientos: sin embargo, con la técnica de squash, los cromosomas mitóticos de cerebro fueron más cortos, discontinuos y con menor grado aparente de compactación de la cromatina; al utilizar la técnica de secado al aire, se obtuvieron mejores extendidos citológicos, cromosomas más separados y ligeramente de mayor longitud; en tanto que los resultados de mejor resolución, por la estructura, separación de homólogos y longitudes cromosómicas, se lograron con cultivos celulares

Initiation of primary cell cultures from embryos of the mosquitoes Anopheles albimanus and Aedes taeniorhynchus (Diptera: Culicidae)

Primary cell cultures were obtained from eggs of Anopheles albimanus and Aedes taeniorhynchus mosquitoes, vectors of human malaria and of Venezuelan equine encephalitis virus, respectively. The cellular growth of the An. albimanus cells began four weeks after explanting the embryonic tissues in MK/VP12 medium, supplemented with 15 por cento fetal bovine serum. The culture showed heterogeneous cellular morphology. With regard to the Ae. taeniorhynchus culture, growth occurred three weeks after initiating the culture in MM/VP12 medium. The majority of cells were small and round. Karyotypes were examined in the latter species.