Evaluation of the immunomodulatory effect of Bougainvillea xbuttiana (Var. Orange) on the cytokine production induced by Botrhops jararaca venom in macrophages / Evaluación del efecto inmunomodulador de Bougainvillea xbuttiana (var. naranja) sobre la producción de citoquinas de macrófagos inducida pelo veneno de Bothrops jararaca

To study the effect of 50% ethanol extract of Bougainvillea xbuttiana on the enzymatic activity, cell via bility and cytokine production provoked by the venom of Bothrops jararaca in macro - phages. Three assays were used to study the effects of B. xbuttiana extract on the damage pro - duced by B. jararaca : Enzymatic activity was detected by measuring the proteoly tic and phos - pholipase A2; macrophages cytotoxicity was determined by the MTT method; levels of cytokine were evaluated using ELISA and a biological assay. After treatment with 300 µg/mL B. xbuttiana extract for 30 min, the proteolytic and phospholipase A2 activities of the venom were reduced to 95 and 61%, respectively. In macrophages cultures treated with B. xbuttiana extract combined with venom, the production of TNF - α, IL - 6 and IFN - γ was reduced, whereas IL - 10 was potenti - ated. Our results support the potential effect of the B. xbuttiana extract as a complementary therapy against the toxicity caused by the venom of B . jararaca snakes

Estudiar el efecto del extracto etanólico al 50% de Bougainvillea xbuttiana sobre la actividad enzimática viabilidad celular y producci ón de citoquinas provocada por el veneno de Bothrops jararaca en macrófagos Se utilizaron tres ensayos para estudiar los efectos del extracto de B. xbuttiana sobre el daño producido por B. jararaca : Se detectó actividad enzimática mediante la medición del proteolítico y fosfolipasa A2; la citotoxicidad de los macrófagos se determinó por el método MTT; Los niveles de citoquinas se evaluaron utilizando ELISA y un ensayo biológico. Después del tratamiento con 300 µg/mL de extracto de B. xbuttiana durante 30 mi n, las actividades proteolíticas y de fosfolipasa A2 del veneno se redujeron a 95 y 61%, respectivamente. En cultivos de macrófagos tratados con extracto de B. xbuttiana combinado con veneno, la producción de TNF - α, IL - 6 e IFN - γ se redujeron, mientras que IL - 10 se potenció. Nuestros resultados apoyan el efecto potencial del extracto de B. xbuttiana como terapia complementaria frente a la toxicidad provocada por el veneno de B. jararaca .

Insuficiencia cardíaca secundaria a mordedura de serpiente. La visión del intensivista: Reporte de caso / Heart failure secondary to a snake bite. The intensivist's vision: Case Report

RESUMEN Antecedentes: El accidente ofídico es una enfermedad desatendida que afecta a los países tropicales. América Latina es la segunda región después de África, con mayor número de casos a nivel mundial. Su curso clínico incluye lesiones locales hasta afectaciones sistémicas como lesiones renales, hematológicas y neurológicas. Las complicaciones cardiacas son raras, especialmente en pacientes que no tienen factores de riesgo cardiovascular. Hay reportes de infarto agudo de miocardio, pero existe poca información sobre la insuficiencia cardíaca debida a Bothrops spp. Reporte de caso: Presentamos el caso de un hombre de 25 años sin factores de riesgo cardiovascular que fue admitido en la unidad de cuidados intensivos y desarrolló insuficiencia cardíaca con choque cardiogénico y fallo multiorgánico secundario a una mordedura de serpiente. Conclusiones: Aunque el curso clínico característico de un accidente ofídico bothrópico y sus manifestaciones sistémicas están principalmente relacionadas con anomalías de la coagulación, hay complicaciones cardiovasculares dentro de su presentación clínica que, aunque raras, si no se detectan prontamente y no se manejan adecuadamente, están asociadas con alta morbilidad y mortalidad.

ABSTRACT Background: Ophidic accident is a neglected disease that affects tropical countries. Latin America is the second region after Africa, with the most cases worldwide. Local lesions accompany its clinical course up to systemic affectations such as renal, hematological, and neurological lesions. Cardiac complications are rare, especially in patients who do not have cardiovascular risk factors. There are reports of acute myocardial infarction, but there is little information about heart failure due to Bothrops spp. Case report: We present the case of a 25-year-old man without cardiovascular risk factors who was admitted to the intensive care unit and developed heart failure with cardiogenic shock and multi-organ failure secondary to a snake bite. Conclusions: Although the characteristic clinical course of a bothropic ophidian accident and its systemic manifestations are mainly related to coagulation abnormalities, there are cardiovascular complications within its clinical presentation that, although rare, if not detected promptly and not adequately managed, are associated with high morbidity and mortality.

Identification of purinergic system components in the venom of Bothrops mattogrossensis and the inhibitory effect of specioside extracted from Tabebuia aurea

Snake bites are a severe problem in the countryside of Brazil and are usually attributed to snakes of the genera Bothrops, Crotalus, and Lachesis. Snake venom can release ectoenzymes and nucleotidases that modulate the purinergic system. In addition to serum therapy against snake poisoning, medicinal plants with anti-infammatory activities, such as Tabebuia aurea, is empirically applied in accidents that occur in difcult-to-access areas. This study aimed was to verify the presence and activity of nucleotidases in the crude venom of Bothrops mattogrossensis (BmtV) in vitro and characterize the modulation of purinergic components, myeloid diferentiation, and infammatory/oxidative stress markers by BmtV in vivo and in vitro. Moreover, our study assessed the inhibitory activities of specioside, an iridoid isolated from Tabebuia aurea, against the efects of BmtV. Proteomic analysis of venom content and nucleotidase activity confrm the presence of ectonucleotidase-like enzymes in BmtV. In in vivo experiments, BmtV altered purinergic component expression (P2X7 receptor, CD39 and CD73), increased neutrophil numbers in peripheral blood, and elevated oxidative stress/infammatory parameters such as lipid peroxidation and myeloperoxidase activity. BmtV also decreased viability and increased spreading index and phagocytic activity on macrophages. Specioside inhibited nucleotidase activity, restored neutrophil numbers, and mediate the oxidative/infammatory efects produced by BmtV. We highlight the efects produced by BmtV in purinergic system components, myeloid diferentiation, and infammatory/oxidative stress parameters, while specioside reduced the main BmtV-dependent efects.

Geographic variation in the probability of being born with and retaining contrasting tail tip colour (tail luring) in the common lancehead Bothrops jararaca

In snakes that are known to be ambush predators, tail luring, in which the movement of a snake’s tail resembles that of a worm or insect larva and is used to attract prey, has emerged as a complementary hunting strategy. In certain species, some individuals may present a conspicuously bright colour at the tail tip, which eventually disappears with age. Some authors argue that the bright colour enhances the resemblance of the snake’s tail with a potential food item, increasing the success of capture. Here, we tested the influence of geographic variation, sex, and environmental factors on the probability that Common Lanceheads Bothrops jararaca (Wied-Neuwied, 1824) from southeastern Brazil were born with this contrasting tail tip and whether snakes retain this trait throughout adulthood. None of the predictors affected the probability of births with a contrasting tail tip. However, a higher proportion of individuals from the coastal populations retained this trait into adulthood. The absence of difference in the probability of being born with this trait indicates that there are other factors influencing tail tip colour, such as phylogenetic correlates, rather than intrinsic or environmental factors. A higher proportion of ectothermic prey in the diet of coastal populations may explain why this population retains tail luring throughout adulthood.

Ontogenetic and sexual differences in the venom of Bothrops moojeni: insights from a litter and its mother / Diferenças ontogenéticas e sexuais no veneno de Bothrops moojeni: percepções de uma ninhada e de sua mãe

Variability in snake venom composition is well-documented and crucial for understanding snake ecology and predicting snakebites. In this study, we characterize the venom composition and biological activities of newborn female and male Bothrops moojeni and their mother. Our results reveal significant differences between the venom of newborn females and males, demonstrating a broad and diverse range of proteins. The venoms of newborn females showed higher serine protease effects, increased hemorrhagic activity, and greater lethality compared to the venom of newborn males. However, no differences were observed in phospholipase A2 and coagulant activity. The differences in protein composition and toxic activities between maternal and neonatal venom, as well as between the venoms of newborn females and males, contribute to understanding the diverse outcomes of snakebites. These results underscore the importance of considering sex and ontogeny in understanding venom composition in snakes.

A variabilidade na composição dos venenos de serpentes é bem documentada e crucial para a compreensão da ecologia das serpentes ou do prognóstico dos envenenamentos ofídicos. Nesse estudo, caracterizamos a composição e a atividade biológica do veneno de fêmeas e machos recém-nascidos e sua mãe. Nossos resultados revelaram diferenças significativas entre o veneno de fêmeas e machos recém-nascidos, demonstrando uma ampla e diversificada gama de proteínas. Os venenos de fêmeas recém-nascidas apresentaram mais efeitos de serina protease, aumento da atividade hemorrágica e maior letalidade em comparação ao veneno dos machos recém-nascidos. No entanto, nenhuma diferença foi observada na fosfolipase A2 e na atividade coagulante. As diferenças na composição proteica e nas atividades tóxicas entre o veneno materno e neonatal, bem como entre os venenos de fêmeas e machos recém-nascidos contribuem para a compreensão dos diversos resultados dos acidentes ofídicos. Esses resultados ressaltam a importância de considerar o sexo e a ontogenia na compreensão da composição do veneno desses animais.

Snake venom Metalloproteases na família Viperidae: revisão narrativa com ênfase no Gênero Bothrops

With distribution across almost the entire globe, the Viperidae family can be described as one of the most sophisticated groups of venomous animals when it comes to the inoculation of their toxins, due to the presence of highly efficient hollow fangs in both predation or defense scenarios. Unfortunately, due to agricultural expansion and the destruction of their natural habitats, encounters between vipers and humans, especially in rural contexts, are a severe reality in many communities, currently being classified by the World Health Organization as a Neglected Tropical Disease. Enhancing the problem, the toxins composing the venoms of vipers are notoriously known for their debilitating activity, sometimes leading to permanent damage to limbs or even amputations, causing substantial losses not only to the incapacitated victim but also to the economically dependent family unit. This potential of the venom is the result of the synergy of a myriad of toxins that, together, generate the clinical manifestation of envenoming. Within vipers, the presence of proteolytic enzymes is abundant, strongly associated with critical pathological manifestations such as necrosis and hemorrhage. Crucial among these proteases, Snake Venom Metalloproteases (SVMPs), zinc-associated metalloproteases, represent a robust portion of the venom of many vipers and are widely recognized for causing hemorrhage due to their action on the basement membrane of blood vessels, as well as their ability to generate coagulopathies. These toxins are important not only for their specific actions but also in amplifying the damage caused by other toxin families present in the venom, reinforcing the need to elucidate their mechanisms not only for the improvement of therapeutic techniques but also for their intrinsic value in the natural history of these animals.

Com distribuição por quase todo o globo, a família Viperidae pode ser descrita como um dos grupos de animais peçonhentos com a mais sofisticada especialização quando se trata da inoculação de suas toxinas, graças à presença de presas ocas altamente eficientes em situações de predação ou defesa. Infelizmente, devido à expansão agrícola e à destruição dos habitats naturais destes animais, o encontro de víboras com humanos, principalmente em contextos rurais, é uma realidade severa em muitas comunidades, sendo atualmente considerado pela Organização Mundial da Saúde como uma Doença Tropical Negligenciada. Potencializando o problema, as toxinas que compõem as peçonhas de viperídeos são notoriamente conhecidas por sua propriedade debilitante, por vezes acarretando em danos permanentes a membros ou mesmo amputações, causando perdas substanciais não somente à vítima incapacitada para o trabalho, mas ao núcleo familiar economicamente dependente. Tal potencial presente na peçonha pode ser entendido graças à sinergia de uma miríade de toxinas que, em conjunto, geram o quadro clínico do envenenamento. Dentro dos viperídeos, é abundante a presença de enzimas proteolíticas, fortemente associadas a manifestações patológicas críticas como necrose e hemorragia. Crucial entre as proteases, as Snake Venom Metalloproteases (SVMP), metaloproteases associadas a uma molécula de zinco, representam uma porção robusta da peçonha de muitas víboras e são amplamente reconhecidas por causarem hemorragia devido à sua ação na membrana basal de vasos sanguíneos, bem como à capacidade em gerar coagulopatias. Tais toxinas são importantes não somente por sua ação especializada, mas também em amplificar os danos causados por outras famílias de toxinas presentes na peçonha, reforçando a necessidade da elucidação de seus mecanismos não somente para a melhoria de técnicas terapêuticas, mas também por seu valor intrínseco na história natural destes animais.

Imunomodulação por frações de veneno de Bothrops alternatus em células mononucleares de sangue periférico

Os adjuvantes são utilizados para melhorar a imunogenicidade de antígenos de uma vacina, de forma a auxiliar a retenção dos mesmos no organismo e/ou melhorar sua rota de entrega. Atualmente, os adjuvantes com uso predominante e com licença de uso são os sais de alumínio. Os venenos de serpentes são fontes ricas de proteínas e moléculas com potenciais tóxicos, mas também farmacológicos. A Bothrops alternatus, popularmente conhecida como Urutu-Cruzeiro, é uma serpente peçonhenta da família Viperidae que está distribuída em países da América do Sul e no Sul e Sudeste do território brasileiro. A ação inflamatória do veneno botrópico é causada por conjuntos de frações com especificidades diversas e substâncias heterogêneas. Essas frações induzem a liberação de substâncias complexas do processo inflamatório. O objetivo do presente estudo foi avaliar o efeito imunomodulador de frações de veneno de B. alternatus em culturas de células mononucleares do sangue periférico (PBMC) humano. Estudando as citocinas liberadas por essas células e isolando as frações que tiverem melhor função pró-inflamatória poderá ser possível avançar em estudos de possíveis novos adjuvantes. Foram realizados: Fracionamento do veneno por cromatografia de exclusão molecular; Dosagem protéica do veneno por método de BCA; Eletroforese em gel de poliacrilamida; Cultura de PBMC estimulada com as frações; Análise de viabilidade celular por ensaio de MTT; Dosagens de citocinas e quimiocinas por ensaio de CBA (Cytometric Bead Array). O fracionamento resultou em 10 frações, cujos perfis foram avaliados em gel de poliacrilamida 12,5%, corados com prata. Foram realizadas culturas de PBMC, que foram estimuladas com as frações de veneno em concentrações de 5 e 10 µg/mL. Com exceção da fração 3, as demais frações não apresentaram efeito citotóxico, avaliado pelo método de MTT. As frações 8, 9 e 10 induziram aumento da produção de TNF, IL-10, IL-6, IL-1β e IL-8 em relação aos controles negativos. Ao avançar com os estudos, talvez seja possível purificar tais frações em busca de uma molécula que possa ser utilizada como um possível novo adjuvante.

Envenenamento por Bothrops jararacussu: aspectos anatomopatológicos em músculo esquelético

Snakebites are an important Public Health issue, so much so that they are classified as Neglected Tropical Diseases (NTDs) in category A, by the World Health Organization (WHO). The biggest victims are young people, mainly rural workers, who often, due to temporary or even permanent disability, end up affecting not only their family, but their entire community. Annually in Brazil, 90% of reported cases are caused by the Bothrops genus. Bothrops jararacussu is probably one of the most fearsome and imposing of this genus. Its bite is painful, and the main local effect is myonecrosis, which can result in deficient muscle regeneration. Its venom is mainly composed of phospholipases A2, which is why it has an important myotoxic effect. These phospholipases are myotoxic components that directly destabilize the plasma membrane of muscle cells, causing the influx of calcium ions and so hypercontraction and the early appearance of cells with delta lesions. Understanding the pathogenesis of poisoning is of fundamental importance for studies of better therapies.

O ofidismo é uma questão importante de Saúde Pública, tanto que está classificado como Doenças Tropicais Negligenciadas (DTN) na categoria A, pela Organização Mundial da Saúde (OMS). As maiores vítimas são jovens, principalmente trabalhadores rurais, que muitas vezes pela incapacidade temporária ou até permanente, acabam afetando não só sua família, mas toda a sua comunidade. Anualmente no Brasil, 90% dos casos notificados são causados pelo gênero Bothrops. A Bothrops jararacussu é provavelmente uma das mais temíveis e imponentes deste gênero. Sua picada é dolorosa e como principal efeito local temos a mionecrose, que pode ter como sequela uma regeneração muscular deficiente. Seu veneno é composto principalmente por fosfolipases A2, o motivo de ter um efeito miotóxico importante. Essas fosfolipases são componentes miotóxicos que desestabilizam diretamente a membrana plasmática das células musculares, causando o influxo de íons cálcio e consequentemente uma hipercontração e o aparecimento precoce de células com lesões delta. A compreensão da patogênese dos envenenamentos é de fundamental importância para estudos de melhores terapias.

Caracterização da letalidade dos venenos de serpentes Bothrops jararaca e Crotalus durissus terrificus, por meio de ensaio em ovos embrionados de galinha

Em 2017, a Organização Mundial da Saúde voltou a considerar o ofidismo como uma doença tropical negligenciada de maior prioridade. As serpentes do gênero Bothrops têm destaque por serem responsáveis por mais de 90% dos acidentes ocorridos no Brasil. Já o gênero Crotalus apresenta um percentual de 7,7%, com letalidade maior nos acidentes crotálicos (1,87%) (Fundação Nacional de Saúde, 1988). O ensaio em ovos embrionados de galinha (OEG), representa um modelo in vivo, alternativo ao teste convencional em camundongos para teste de letalidade, sendo um método bastante eficaz e versátil para estudos pré-clínicos, podendo também atuar de forma complementar aos testes in vitro. Sendo assim, o presente estudo teve como objetivo analisar, por meio de ensaio em OEG, a determinação da letalidade induzida pelos venenos, obtidos do laboratório de Herpetologia do Instituto Butantan de Bothrops jararaca e Crotalus durissus terrificus. Foi feita a avaliação da aplicabilidade de doses desafio desses venenos para calcular a dose letal 50% (DL50). Nesta pesquisa, foram utilizados 300 ovos fertilizados de galinhas da linhagem Novogen White, SPF, em embriões de 6 e 7 dias de desenvolvimento. Os OEG foram incubados a 37oC e 62% de umidade relativa até o momento de inoculação. Nos OEG, foram inoculados na cavidade alantoide, os venenos de B. jararaca (VBj) as concentrações de VBj: 84,2 μg a 2,63125 μg/ovo e C. durissus terrificus (VCdt) as concentrações de VCdt: 5,74 μg a 0,179375 μg/ovo, tendo como grupos controles o crescimento de ovos sem qualquer inoculação (GC) e controles inoculados com salina (GS) em paralelo. Os embriões foram analisados por meio de ovoscopia manual, após os tempos de incubação, nos intervalos de 24 horas e 48 horas, para avaliação da função vascular. Foi realizada a inspeção macroscópica das lesões dos embriões mortos e registro fotográfico. Os resultados obtidos de dose letal 50% (DL50) em OEG no teste de VCdt foram de DL50=0,8035 μg/ovo nos embriões de 6 dias e DL50=0,09113 μg/ovo nos embriões de 7 dias de desenvolvimento. Já o teste para VBj os valores estimados de DL50 foram de DL50=21,91 μg/ovos nos embriões de 6 dias e DL50=24,37 μg /ovo em embriões de 7 dias de vida embrionária. Os valores de DL50 obtidos em OEG ao serem comparados com os valores de DL50 em camundongos, demostraram ter boa correspondência entres as metodologias. A partir do uso dessa técnica, verificou-se que os OEG podem ser utilizados como alternativo ao método convencional em camundongos.

Atividade diária, uso do ambiente e comportamento reprodutivo de Bothrops sazimai, espécie criticamente ameaçada, em cativeiro

The genus Bothrops, popularly know as the jararacas group, currently has 32 species in Brazil. They are found both at the sea level and at altitudes close to 3000m, and some species unhabitat continental islands. One of these species is Bothrops sazimai, described in 2016, a snake endemic to Ilha dos Franceses which, due to anthropogenic pressure in its natural environment, is considered a critically endangered species. Therefore, maintaning this speciesw in captivity can help to understand its behavior, biology and environmental use. In this work, through monitoring over 15 days, it was possible to characterize the daily activity, environmental use and reproductive behavior of two individuals of B. sazimai, and conclude that the species presentes nocturnal activity and semi-arboreal habits, despite using the lower stratum more frerquently. This work also presentes aspects of reproductive behavior in captivity, showing that the courtship behavior of B. sazimai is similar to the behavior of other snakes of the genus Bothrops, which basically involves a phase of pursuit, alignment and introduction of the hemipenis. To date, the information available on B. sazimai is limited to the work describing the species, therefore, the information obtained through this work is unprecedented.

O gênero Bothrops, conhecido popularmente como grupo das jararacas apresenta atualmente, no Brasil, 32 espécies. São encontradas tanto ao nível do mar, quanto em altitudes próximas a 3000m, e algumas espécies habitam ilhas continentais. Uma dessas espécies é a Bothrops sazimai, descrita em 2016, serpente endêmica da Ilha dos Franceses que, devido à pressão antropogênica em seu ambiente natural, é considerada uma espécie criticamente ameaçada. Dessa forma, a manutenção dessa espécie em cativeiro pode auxiliar no conhecimento do comportamento, biologia e uso do ambiente. Neste trabalho, através do monitoramento ao longo de 15 dias, foi possível caracterizar a atividade diária, uso do ambiente e comportamento reprodutivo de dois indivíduos de B. sazimai, e concluir que a espécie apresenta atividade noturna e hábitos semi arborícolas, apesar de usar o estrato inferior com mais frequência. Este trabalho também apresenta aspectos do comportamento reprodutivo em cativeiro, mostrando que o comportamento de corte de B. sazimai é semelhante ao comportamento de outras serpentes do gênero Bothrops, que envolve basicamente a fase de perseguição, alinhamento e introdução do hemipenis. Até o momento, as informações disponíveis sobre B. sazimai limitam-se ao trabalho de descrição da espécie, sendo assim, as informações obtidas por este trabalho são inéditas.

Hepatopatias em serpentes do gênero Bothrops mantidas sob cuidados humanos

A procura de animais não-convencionais como pets nos dias atuais vem aumentando pelo mundo inteiro, com as serpentes sendo a ordem animal mais procurada entre os répteis. Visto a crescente demanda por estes animais, as doenças, tratamento e métodos diagnósticos devem ser muito bem estudados e empregados, em especial nas afecções que acometem o fígado e vesícula biliar devido às suas diversas funções e importância. Portanto, este trabalho tem como objetivo realizar um levantamento sobre as principais afecções hepáticas descritas por exame histopatológico de serpentes do gênero Bothrops mantidas sob cuidados humanos. Para isto, foram analisados prontuários clínicos de serpentes do gênero Bothrops que vieram a óbito no período de 2021 a 2023, destas utilizou-se o laudo histopatológico de 21 serpentes contendo diagnóstico de alterações hepáticas, associado aos achados de necrópsia. Os principais resultados evidenciaram que 14 dos animais apresentaram algum tipo de hepatite, entre estas sendo mais recorrente a hepatite granulomatosa bacteriana. Outros resultados significativos foram a hepatopatia deposicional e o sarcoma de tecidos moles no parênquima hepático de um animal, um achado aparentemente incomum visto a escassez de relatos em literatura deste tipo neoplásico neste gênero. Logo, concluímos que hepatopatias são achados comuns em serpentes do gênero Bothrops e salientamos a necessidade de mais estudos sobre o tema em associação com outros exames diagnósticos.

Understanding local reactions induced by Bothrops jararaca venom: the role of inflammatory mediators in Leukocyte–Endothelium interactions

In recent years, extensive research has delved into the pathophysiology of local reactions triggered by Bothrops snake venoms. Even though antivenom works well at reducing death and systemic effects, it is still not very effective in treating local reactions because it cannot counteract damage that has already been triggered. This limitation might be attributed to certain molecules that amplify the venom-induced innate response. While evidence suggests endogenous mediators at the venom site play a role in this envenomation, in Brazil, the concurrent use of anti-inflammatory agents or other drugs alongside antivenom remains uncommon. This study evaluated the pharmacological mediation of alterations in leukocyte–endothelium interactions following the experimental envenomation of mice with Bothrops jararaca venom, the main culprit of snake-related accidents in Southeast Brazil. We treated envenomed mice with inhibitors of different pharmacological pathways and observed the cremaster muscle microcirculation with intravital microscopy. We found that eicosanoids related to cyclooxygenase pathways and nitric oxide significantly contributed to B. jararaca venom-induced alterations in leukocyte–endothelium interactions. Conversely, lipoxygenase-mediated eicosanoids, histamine, and serotonin had minimal participation. Notably, dexamethasone and antivenom treatment diminished B. jararaca venom–induced alterations in leukocyte–endothelium interactions. The limited efficacy of the antivenom in managing Bothrops venom-induced local reactions emphasizes the critical need for supplementary treatments to enhance therapeutic outcomes.

Molecular aspects involved in the mechanisms of Bothrops jararaca venom-induced Hyperalgesia: participation of NK1 Receptor and glial cells

Accidents caused by Bothrops jararaca (Bj) snakes result in several local and systemic manifestations, with pain being a fundamental characteristic. The inflammatory process responsible for hyperalgesia induced by Bj venom (Bjv) has been studied; however, the specific roles played by the peripheral and central nervous systems in this phenomenon remain unclear. To clarify this, we induced hyperalgesia in rats using Bjv and collected tissues from dorsal root ganglia (DRGs) and spinal cord (SC) at 2 and 4 h post-induction. Samples were labeled for Iba-1 (macrophage and microglia), GFAP (satellite cells and astrocytes), EGR1 (neurons), and NK1 receptors. Additionally, we investigated the impact of minocycline, an inhibitor of microglia, and GR82334 antagonist on Bjv-induced hyperalgesia. Our findings reveal an increase in Iba1 in DRG at 2 h and EGR1 at 4 h. In the SC, markers for microglia, astrocytes, neurons, and NK1 receptors exhibited increased expression after 2 h, with EGR1 continuing to rise at 4 h. Minocycline and GR82334 inhibited venom-induced hyperalgesia, highlighting the crucial roles of microglia and NK1 receptors in this phenomenon. Our results suggest that the hyperalgesic effects of Bjv involve the participation of microglial and astrocytic cells, in addition to the activation of NK1 receptors.

Food preference for native and invasive prey in the naive lancehead pitviper

The presence of invasive species in the environment can be highly detrimental. The success of these species depends on their interaction with native ones. The prey–predator relationship between invasive and native species can result in biodiversity loss or the introduction of new food items for local predators. Due to its tropical and extensive nature, Brazil is vulnerable to the colonization of invasive species. Snakes are a group of animals that can act as both predators and prey for invasive species. The pitviper Bothrops jararaca is an abundant and widely distributed native species on the Brazilian coast. Based on this, we conducted a study on the feeding preferences of naive B. jararaca juveniles regarding invasive and native prey. We found that this species exhibits a greater preference for native anurans compared to Rana catesbeiana, an invasive amphibian associated with significant environmental impacts. Additionally, the gecko Hemidactylus mabouia, a prey that triggered intense predatory responses from the pitviper, reveals that this species, even with a short period of coexistence with B. jararaca, has established an intense prey–predator relationship. The negative correlation between prey size and feeding interest, guided solely by olfactory cues, adds a layer of complexity to understanding the feeding choices of B. jararaca, providing valuable insights for conservation and environmental management strategies.

Venom composition of neglected Bothropoid snakes from the Amazon Rainforest: ecological and toxinological implications

Snake venoms have evolved in several families of Caenophidae, and their toxins have been assumed to be biochemical weapons with a role as a trophic adaptation. However, it remains unclear how venom contributes to the success of venomous species for adaptation to different environments. Here we compared the venoms from Bothrocophias hyoprora, Bothrops taeniatus, Bothrops bilineatus smaragdinus, Bothrops brazili, and Bothrops atrox collected in the Amazon Rainforest, aiming to understand the ecological and toxinological consequences of venom composition. Transcriptomic and proteomic analyses indicated that the venoms presented the same toxin groups characteristic from bothropoids, but with distinct isoforms with variable qualitative and quantitative abundances, contributing to distinct enzymatic and toxic effects. Despite the particularities of each venom, commercial Bothrops antivenom recognized the venom components and neutralized the lethality of all species. No clear features could be observed between venoms from arboreal and terrestrial habitats, nor in the dispersion of the species throughout the Amazon habitats, supporting the notion that venom composition may not shape the ecological or toxinological characteristics of these snake species and that other factors influence their foraging or dispersal in different ecological niches.

Evaluación del efecto inmunomodulador de Bougainvillea xbuttiana (var. naranja) sobre la producción de citoquinas de macrófagos inducida pelo veneno de Bothrops jararaca

To study the effect of 50% ethanol extract of Bougainvillea xbuttianaon the enzymatic activity, cell viability and cytokine production provoked by the venom of Bothrops jararacain macro-phages. Three assays were used to study the effects of B. xbuttianaextract on the damage pro-duced by B. jararaca: Enzymatic activity was detected by measuring the proteolytic and phos-pholipase A2; macrophages cytotoxicity was determined by the MTT method; levels of cytokine were evaluated using ELISA and a biological assay. After treatment with 300 μg/mL B. xbuttianaextract for 30 min, the proteolytic and phospholipase A2activities of the venom were reduced to 95 and 61%, respectively. In macrophages cultures treated with B. xbuttianaextract combined with venom, the production of TNF-α, IL-6 and IFN-γ was reduced, whereas IL-10 was potenti-ated. Our results support the potential effect of the B. xbuttianaextract as a complementary therapy against the toxicity caused by the venom of B. jararacasnakes.

A novel metalloproteinase-derived cryptide from Bothrops cotiara venom inhibits angiotensin-converting enzyme activity

Snake venoms are primarily composed of proteins and peptides, which selectively interact with specific molecular targets, disrupting prey homeostasis. Identifying toxins and the mechanisms involved in envenoming can lead to the discovery of new drugs based on natural peptide scaffolds. In this study, we used mass spectrometry-based peptidomics to sequence 197 peptides in the venom of Bothrops cotiara, including a novel 7-residue peptide derived from a snake venom metalloproteinase. This peptide, named Bc-7a, features a pyroglutamic acid at the N-terminal and a PFR motif at the C-terminal, homologous to bradykinin. Using FRET (fluorescence resonance energy transfer) substrate assays, we demonstrated that Bc-7a strongly inhibits the two domains of angiotensin converting enzyme (Ki < 1 μM). Our findings contribute to the repertoire of biologically active peptides from snake venoms capable of inhibiting angiotensin-converting enzyme (ACE), beyond current known structural motifs and precursors. In summary, we report a novel snake venom peptide with ACE inhibitory activity, suggesting its potential contribution to the hypotensive effect observed in envenomation.

Activation of M1 muscarinic acetylcholine receptors by proline-rich oligopeptide 7a (

Background: The bioactive peptides derived from snake venoms of the Viperidae family species have been promising as therapeutic candidates for neuroprotection due to their ability to prevent neuronal cell loss, injury, and death. Therefore, this study aimed to evaluate the cytoprotective effects of a synthetic proline-rich oligopeptide 7a (PRO-7a; <EDGPIPP) from Bothrops jararaca snake, on oxidative stress-induced toxicity in neuronal PC12 cells and astrocyte-like C6 cells. Methods: Both cells were pre-treated for four hours with different concentrations of PRO-7a, submitted to H2O2-induced damage for 20 h, and then the oxidative stress markers were analyzed. Also, two independent neuroprotective mechanisms were investigated: a) L-arginine metabolite generation via argininosuccinate synthetase (AsS) activity regulation to produce agmatine or polyamines with neuroprotective properties; b) M1 mAChR receptor subtype activation pathway to reduce oxidative stress and neuron injury. Results: PRO-7a was not cytoprotective in C6 cells, but potentiated the H2O2-induced damage to cell integrity at a concentration lower than 0.38 μM. However, PRO-7a at 1.56 µM, on the other hand, modified H2O2-induced toxicity in PC12 cells by restoring cell integrity, mitochondrial metabolism, ROS generation, and arginase indirect activity. The α-Methyl-DL-aspartic acid (MDLA) and L-NΩ-Nitroarginine methyl ester (L-Name), specific inhibitors of AsS and nitric oxide synthase (NOS), which catalyzes the synthesis of polyamines and NO from L-arginine, did not suppress PRO-7a-mediated cytoprotection against oxidative stress. It suggested that its mechanism is independent of the production of L-arginine metabolites with neuroprotective properties by increased AsS activity. On the other hand, the neuroprotective effect of PRO-7a was blocked in the presence of dicyclomine hydrochloride (DCH), an M1 mAChR antagonist. Conclusions: For the first time, this work provides evidence that PRO-7a-induced neuroprotection seems to be mediated through M1 mAChR activation in PC12 cells, which reduces oxidative stress independently of AsS activity and L-arginine bioavailability.(AU)

Conhecimentos sobre o manejo de vítimas do acidente botrópico no serviço de emergência / Knowledge about botropic accident victim management in emergency service / Conocimiento sobre el manejo de víctimas de accidentes botópicos en emergencia

Objetivo: identificar o conhecimento da equipe de enfermagem, no manejo do paciente vítima de acidente botrópico no serviço de emergência. Métodos: estudo descritivo, exploratório e com abordagem qualitativa. Desenvolvido em 2019, com profissionais da equipe de enfermagem do setor de emergência adulto de um Hospital Universitário. Utilizou-se entrevistas semiestruturadas, transcritas e analisadas por meio de estatística descritiva simples e análise de conteúdo. Resultados: participaram do estudo 34 profissionais da equipe de enfermagem, sendo 82% do sexo feminino, com média de idade de 37 anos. A análise de conteúdo revelou três categorias: conhecimento sobre acidentes por animais peçonhentos, trajetória acadêmica e profissional no contexto de animais peçonhentos e manejo da equipe de enfermagem do paciente vítima de acidente botrópico. Conclusão: os resultados demonstram o conhecimento e condutas da equipe de enfermagem frente ao acidente botrópico e evidenciam a necessidade de sensibilizar a equipe de enfermagem quanto ao reconhecimento do acidente ofídico, especialmente com relação às características apresentadas pelo animal peçonhento e as manifestações clínicas apresentadas pelo paciente. (AU)

Objective: to identify the knowledge of the nursing staff in dealing with bothropic accident victims in the emergency service. Methods: descriptive, exploratory study with a qualitative approach. Developed in 2019, with professionals from the nursing staff of the adult emergency sector of a University Hospital. A semi-structured interview was used, transcribed and analyzed using simple descriptive statistics and content analysis. Results: 34 professionals from the nursing team participated in the study, being 82% female, with an average age of 37 years. The content analysis revealed three categories: knowledge about accidents caused by poisonous animals, academic and professional trajectory in the context of poisonous animals and management of the nursing team to the patient victim of bothropic accidents. Conclusão: the results demonstrate the knowledge and behaviors of the nursing staff in face of bothropic accidents and highlight the need to sensitize the nursing staff regarding the recognition of the snakebite accident, especially regarding the characteristics presented by the venomous animal and the clinical manifestations presented by the patient. (AU)

Objetivo: identificar los conocimientos del equipo de enfermería en el manejo del paciente víctima de accidente botópico en el servicio de urgencias. Métodos: estudio descriptivo, exploratorio con abordaje cualitativo. Desarrollado en 2019, con profesionales del personal de enfermería del servicio de urgencias de adultos de un Hospital Universitario. Se utilizó una entrevista semiestructurada, transcrita y analizada mediante estadística descriptiva simple y análisis de contenido. Resultados: participaron en el estudio 34 profesionales del equipo de enfermería, de los cuales el 82% eran mujeres, con una edad promedio de 37 años. El análisis de contenido reveló tres categorías: conocimiento sobre accidentes causados por animales venenosos, trayectoria académica y profesional en el contexto de animales venenosos, y manejo del equipo de enfermería al paciente víctima de accidentes bottrópicos. Conclusión: los resultados demuestran el conocimiento y conducta del equipo de enfermería ante el accidente bottrópico y muestran la necesidad de sensibilizar al personal de enfermería sobre el reconocimiento del accidente de la serpiente, especialmente en lo que respecta a las características que presenta el animal venenoso y las manifestaciones clínicas que presenta el paciente. (AU)