Expression of matrix metalloproteinases in patients with bipolar disorder

Objective: High cardiovascular mortality rates have been reported in patients with bipolar disorder (BD). Studies indicate that matrix metalloproteinases (MMPs) are implicated in cardiovascular diseases. We evaluated the expression pattern of MMP-2 and MMP-9 in blood from patients with BD during acute mania and after euthymia, in comparison with healthy controls. Methods: Twenty patients and 20 controls were recruited and matched for sex and age. MMP messenger RNA (mRNA) levels were measured using real-time quantitative polymerase chain reaction (PCR). Body mass index (BMI) was calculated for all subjects. Results: There were no significant differences in MMP-2 and MMP-9 mRNA expression between patients and controls. mRNA levels were not significantly different during mania and euthymia. However, MMP-2 mRNA levels were negatively associated with BMI in BD patients and positively associated with BMI in controls. There was no difference in the pattern of MMP-9 expression between patients and controls. Conclusions: Our results suggest a different pattern of association between MMP-2 and BMI in BD patients as compared with controls. Despite some study limitations, we believe that the role of MMPs in BD should be further investigated to elucidate its relationship with cardiovascular risk. .

Genes responsible for vaginal extracellular matrix metabolism are modulated by women's reproductive cycle and menopause

Objectives To analyze the expression of genes involved in extracellular matrix (ECM) biogenesis and remodeling in vaginal tissue of women with clinically normal pelvic floor support (defined as controls) according to the phase of menstrual cycle and postmenopausal women with and without pelvic organ prolapse (POP). Materials and Methods This study examined the expression of matrix metalloproteinases (MMPs), their tissue inhibitors (TIMPs), and the Lysyl oxidase (LOX) family genes in the anterior vaginal wall of Caucasian women by real-time RT-PCR. Initially, mRNA expression was assessed in premenopausal controls in the secretory (group 1, n = 10) vs. proliferative (group 2, n = 8) phase of menstrual cycle. In addition, we compared premenopausal controls in the proliferative phase (group 2) vs. postmenopausal controls (group 3, n = 5). Finally, we analyzed postmenopausal controls (group 3) vs. postmenopausal women with advanced POP (group 4, n = 13). Results According to the phase of menstrual cycle, MMP1 was significantly reduced (p = 0.003), whereas the expression of TIMP1 and LOXL4 was significantly up-regulated during proliferative phase (both p < 0.01) when compared to the secretory phase in premenopausal control women. Regarding menopausal status/ageing, all MMPs were down-regulated, while TIMP3, TIMP4 and LOXL2 were significantly up-regulated in postmenopausal control women when compared to premenopausal controls (p = 0.005, p = 0.01 and p < 0.001, correspondingly). TIMP4 and LOXL2 mRNA levels were significantly decreased in postmenopausal POP patients compared to asymptomatic postmenopausal controls (p < 0.01 for both). Conclusions Our results indicate that ovarian cycle and age-related changes influence the expression of genes encoding proteins responsible for ECM metabolism in human vagina. Moreover, POP is associated with alteration in vaginal ECM components after menopause. .

Osteopontin expression and its possible functions in the aortic disorders and coronary artery disease / A expressão da osteopontina e as suas funções possíveis nas desordens aórticas e doença arterial coronariana

BACKGROUND: Osteopontin (OPN) has been verified to be closely associated with oncogenesis and remodeling processes. But this cytokine was rarely assessed in the presence of aortopathies, especially acute aortic dissection. The aim of the present study was to evaluate the expressions of OPN by way of molecular biological approaches so as to offer a better understanding of the possible mechanisms of the aortopathies. METHODS: Consecutive patients with type A acute aortic dissection (20 patients), aortic aneurysm (nine patients) or coronary artery disease (21 patients) referred to this hospital for surgical operations were enrolled into this study. Blood samples of the surgical patients after systematic heparinization, and control fast morning blood samples drawn from 21 young healthy volunteers who had no evidence of any healthy problems were investigated for enzyme linked immunosorbent assay (ELISA). The surgical specimens of the aortic tissues collected from the surgical patients during the operations were obtained for quantitative realtime reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR) for OPN mRNA, western blot assay for OPN protein, and for immunohistochemical staining of OPN. Ascending aortic tissues from the autopsies of the healthy individuals dying of accident were obtained as controls of immunohistochemistry. RESULTS: By quantitative RT-PCR, the expressions of OPN mRNA were all upregulated in all three surgical groups. The quantitative results did not reveal any intergroup differences. Western blot assay revealed that OPN was positive with similar intensities of expressions in all three surgical groups. Quantitative western blot analyses of OPN expressions did not show any significance between groups. The OPN expressions by ELISA in the aortic tissue were 3.09311 ± 1.65737, 3.40414 ± 1.15095, and 1.68243 ± 0.31119 pg/mg protein in the aortic dissection, aortic aneurysm, and coronary artery disease groups, respectively. The OPN level of the patients with coronary artery disease was much lower than those with aortic dissection (P = 0.033) or with aortic aneurysm (P = 0.019). By unparametric tests, there were significant differences in the aortic OPN contents among aortic dissection, aortic aneurysm and coronary artery disease groups (P < 0.01). A significant direct correlation was present between plasma OPN concentration and the time interval from the onset to surgery of aortic dissection (Y = 0.1420X + 2.4838, r² = 0.5623, r = 0.750, P = 0.032). By immunohistochemistry, OPN was expressed in the aortic cells: in the intima, it was weaker in all three surgical groups in comparison with the healthy control; in the media, it was weak in the aortic dissection, intense positive in aortic aneurysm, focal positive in the coronary artery disease, but evenly positive in the healthy control groups; and in the adventitia, it was positive in the aortic dissection, coronary artery disease and healthy control groups, but weak positive in the aortic aneurysm group. CONCLUSION: These data may provide evidences that OPN may play a role in the pathogenesis of aortopathies including aortic dissection, aortic aneurysm, and coronary artery disease. OPN might be of potential perspective as a clinically diagnostic tool in the evaluations of the complex remodeling process incorporating vascular injury and repair.

OBJETIVOS: A osteopontina (OPN) está estreitamente associada com os processos de oncogênese e remodelação. Entretanto, essa citocina era raramente avaliada na presença de aortopatias, especialmente na dissecção aórtica aguda. O objetivo do presente estudo foi avaliar a expressão de OPN por meio de abordagens moleculares biológicas, de modo a oferecer uma melhor compreensão dos possíveis mecanismos das aortopatias. MÉTODOS: Pacientes consecutivos com um tipo de dissecção aguda da aorta (20 pacientes), aneurisma da aorta (nove pacientes) ou doença arterial coronária (21 pacientes) foram incluídos neste estudo. As amostras de sangue depois da heparinização sistemática e de 21 voluntários jovens e saudáveis não apontaram nenhuma evidência de qualquer problema ao serem investigados por ensaio imunoenzimático (ELISA). Os espécimes cirúrgicos dos tecidos aórtica coletados dos pacientes durante as operações foram obtidos para a reação de transcrição reversa quantitativa em tempo real em cadeia da polimerase (RT-PCR) para OPN mRNA, técnica de Western blot para a proteína OPN, e imunohistoquímica de OPN. Amostras da aorta de indivíduos saudáveis que morreram de acidente foram obtidos para controle imunohistoquímico. RESULTADOS: Com uso do RT-PCR quantitativo, as expressões de OPN mRNA foram suprarreguladas em todos os três grupos cirúrgicos. Os resultados quantitativos não revelaram quaisquer diferenças intergrupais. Western blot revelou que OPN foi positiva com intensidade semelhante de expressões em todos os três grupos. As análises quantitativas Western blot de expressões OPN não apresentaram significâncias entre os grupos. As expressões OPN medidas pelo teste ELISA no tecido aórtico foram 3,09311 ± 1,65737, 3,40414 ± 1,15095 e 1,68243 ± 0,31119 pg/mg de proteína na dissecção de aorta, aneurisma da aorta, e grupos de doença arterial coronariana, respectivamente. O nível de OPN dos pacientes com doença arterial coronariana foi muito menor do que aqueles com dissecção aórtica (P = 0,033) ou com aneurisma da aorta (P = 0,019). Testes não-paramétricos apontaram diferenças significativas nos teores de aorta OPN entre dissecção aórtica, aneurisma da aorta e grupos com doença arterial coronariana (P <0,01). Uma correlação direta significativa estava presente entre a concentração plasmática OPN e o intervalo de tempo entre o início da cirurgia de dissecção de aorta (Y = 2,4838 + 0,1420X, r² = 0,5623, r = 0,750, P = 0,032). Pela imunohistoquímica, a OPN foi expressa em células aórticas: na íntima, foi fraca em todos os três grupos cirúrgicos em comparação ao grupo saudável; na média, era fraca na dissecção aórtica, positiva intensa no aneurisma de aorta, focal positivo na doença arterial coronariana, mas igualmente positiva no grupo controle; e na adventícia, positiva para a dissecção da aorta, doença arterial coronariana e grupos de controle saudáveis, mas fraca positiva no grupo de aneurisma da aorta. CONCLUSÃO: Estes dados fornecem evidências de que a OPN pode desempenhar um papel na patogênese da aortopatias, incluindo dissecção aórtica, aneurisma da aorta R e doença arterial coronariana. OPN tem perspectiva potencial como ferramenta de diagnóstico clínico nas avaliações do processo de remodelação complexa, incluindo lesão vascular e de reparação.

Inhibition of carrageenan-induced expression of tissue and plasma prekallikreins mRNA by low level laser therapy in a rat paw edema model / Inibição da expressão de RNA mensageiro de pré-calicreínas tecidual e plasmática pela laserterapia em modelo de edema de pata induzido pela carragenina em ratos

BACKGROND: Low level laser therapy (LLLT) has been used clinically in order to treat inflammation, where tissue and plasma prekallikrein have crucial importance. Plasma prekallikrein (PPK) is synthesized by the hepatocytes and secreted into the bloodstream, where it participates in the surface-dependent activation of blood coagulation, fibrinolysis, kinin generation and inflammation. Tissue prekallikrein is associated with important disease states (including cancer, inflammation, and neurodegeneration) and has been utilized or proposed as clinically important biomarker or therapeutic target of interest. OBJECTIVE: To evaluate if LLLT modulates tissue and plasma prekallikreins mRNA expression in the carrageenan-induced rat paw edema. METHODS: Experimental groups were assigned as followed: A1 (Control-saline), A2 (Carrageenan-only), A3 (laser 660nm only) and A4 (Carrageenan + laser 660nm). Edema was measured by a plethysmometer. Subplantar tissue was collected for the quantification of prekallikreins mRNA by Real time-Polymerase Chain Reaction. RESULTS: A significantly decrease in the edema was observed after laser irradiation. Expression of prekallikreins increased after carrageenan injection. Tissue and plasma prekallikrein mRNA expression significantly decreased after LLLT's 660nm wavelength. CONCLUSION: These results suggest that expression of tissue and plasma prekallikreins is modulated by LLLT, which can be used in clinical practice due to its anti-inflammatory effects.

CONTEXTUALIZAÇÃO: A laserterapia de baixa potência tem sido usada para o tratamento de processos inflamatórios diversos em que a calicreína tecidual e a plasmática possuem participação ativa. A pré-calicreína plasmática (PPK) é sintetizada pelos hepatócitos e secretada na corrente sanguínea, onde participa da ativação da coagulação, fibrinólise, geração de cininas e inflamação. A pré-calicreína tecidual está associada com importantes doenças (incluindo câncer, inflamação e neurodegeneração) e tem sido utilizada ou sugerida clinicamente como importante biomarcador ou alvo terapêutico. OBJETIVO: Avaliar se a laserterapia altera a expressão gênica da pré-calicreína tecidual e da plasmática no modelo de inflamação aguda induzida pela carragenina. MÉTODOS: Quarenta ratos foram separados em quatro grupos experimentais: A1 (controle), A2 (carragenina, apenas), A3 (laser 660nm, apenas) e A4 (Carragenina + laser 660nm). O edema foi medido por um pletismômetro. Tecido subplantar foi coletado para a quantificação de RNA mensageiro (RNAm) de pré-calicreínas tecidual e plasmática por PCR em tempo real. RESULTADOS: Observou-se uma diminuição significativa no volume de edema após irradiação com laser 660nm. A expressão de RNAm de pré-calicreínas tecidual e plasmática aumentou após a inoculação de carragenina, entretanto a expressão gênica das pré-calicreínas diminuiu significantemente após laserterapia de baixa potência de 660nm. CONCLUSÃO: Os resultados sugerem que a expressão de RNAm das pré-calicreínas tecidual e plasmática é modulada pela laserterapia de baixa potência, podendo ser alvo terapêutico para tratamento de processos inflamatórios.

Effect of glutamine on the mRNA level of key enzymes of malate-aspartate shuttle in the rat intestine subjected to ischemia reperfusion / Efeito da glutamina sobre o nível de RNA Mensageiro das enzimas-chave do ciclo malato-aspartato no intestino de ratos submetidos à isquemia e reperfusão

PURPOSE: To determine the effects of oral L-glutamine (L-Gln) and the dipeptide l-alanyl-glutamine (L-Ala-Gln) upon the activity of the malate-aspartate shuttle in the rat distal small intestine following ischemia and reperfusion. METHODS: Seventy-two Wistar rats (350-400g), were randomized in 2 groups (n = 36): group S (Sham) and Group T (Treatment) and divided into 12 subgroups (n = 6): A-A6, and B1-B6. The subgroups A1-A3 were subjected to sham procedures at 30 and 60 minutes. Thirty minutes before the study, rats were treated with calcium caseinate, 0.5g/Kg (subgroups A1, A4, B1, B4), L-Gln, 0.5g / kg (subgroups A2, A5, B2 and B5) or L-Ala-Gln, 0.75g/Kg (subgroups A3, A6, B3, B6), administered by gavage. Ischemia was achieved by clamping the mesenteric vessels, delimiting a segment of bowel 5 cm long and 5 cm apart from the ileocecal valve. Samples were collected 30 and 60 minutes after start of the study for real-time PCR assay of malate dehydrogenases (MDH1-2) and aspartate-aminotransferases (GOT1-2) enzymes. RESULTS: Tissue MDH and GOT mRNA expression in intestinal samples from rats preconditioned with either L-Gln or L-Ala-Gln showed no significant differences both during ischemia and early reperfusion. CONCLUSION: Activation of the malate-aspartate shuttle system appears not to be the mechanism of glutamine-mediated elevation of glucose oxidation in rat intestine during ischemia/reperfusion injury.

OBJETIVO: Determinar os efeitos da administração oral de L-glutamina (L-Gln) e do dipeptídeo L-alanil-glutamina (L-Ala-Gln) sobre a atividade do ciclo malato-aspartato no intestino delgado distal de ratos após isquemia/reperfusão. MÉTODOS: Setenta e dois ratos Wistar (350-400g) foram randomizados em 2 grupos (n = 36): T grupo S (Sham) e grupo (Tratamento) e distribuídos em 12 subgrupos (n = 6): A-A6, e B1-B6. Os subgrupos A1-A3 foram submetidos a procedimentos "sham" aos 30 e 60 minutos. Trinta minutos antes do estudo, os ratos foram tratados com caseinato de cálcio, 0,5 g/kg (subgrupos A1, A4, B1 e B4), L-Gln, 0,5 g/kg (subgrupos A2, A5, B2 e B5) ou L-Ala -Gln, 0,75g/kg (subgrupos A3, A6, B3, B6), administrado por gavagem. A isquemia foi obtida por pinçamento dos vasos mesentéricos, delimitando um segmento do intestino cinco centímetros de comprimento e 5 cm da válvula ileocecal. Amostras foram coletadas aos 30-60 minutos para ensaio de PCR em tempo real das enzimas malato desidrogenases (MDH1-2), aspartato-aminotransferase (GOT1-2). RESULTADOS: A expressão de MDH e GOT mRNA nas amostras provenientes do intestino delgado de ratos pré-condicionados com L-Gln ou L-Ala-Gln não apresentou diferenças significativas, tanto durante a isquemia como na fase inicial de reperfusão. CONCLUSÃO: Ativação do ciclo malato-aspartato não parece ser o mecanismo de elevação glutamina-mediada da oxidação da glicose no intestino de ratos durante a isquemia / reperfusão.

In vivo fluctuation of Tax, Foxp3, CTLA-4, and GITR mRNA expression in CD4+CD25+ T cells of patients with human T-lymphotropic virus type 1-associated myelopathy

HTLV-1 Tax expression exerts an inhibitory effect on the Foxp3 transcription factor in CD4+CD25+ T-regulatory cells (Treg). For a better understanding of the role of Tax mRNA in the gene expression of cellular markers we measured Tax, Foxp3, CTLA-4, GITR, TGF-β, and IL-10 mRNA in Treg cells of 50 patients with human T-lymphotropic virus type 1 (HTLV-1)-associated myelopathy/tropical spastic paraparesis (HAM/TSP; 27 women and 23 men; mean age: 56.7 years). The control group consisted of 23 non-infected subjects (12 women and 11 men) with a mean age of 51.3 years. Real-time PCR was used to measure mRNA of Tax proteins and several cellular markers of Treg function. Determinations revealed a high level of Tax mRNA in HAM/TSP (124.35 copies/100 CD4+CD25+ T cells). Foxp3, GITR, and CTLA-4 mRNA levels were lower in HAM/TSP patients (mean ± SD, 22.07 ± 0.78, 9.63 ± 0.36, and 4.54 ± 0.39, respectively) than in non-infected controls (47.15 ± 12.94, 22.14 ± 1.91, and 21.07 ± 2.31). Both groups had similar levels of TGF-β and IL-10. An inverse relationship was found between Tax levels and Foxp3, CTLA-4, and GITR levels. Conversely, there was a direct correlation between levels of Foxp3, GITR, and CTLA-4. Disease severity and evolution time did not correlate with Tax or Foxp3 levels. The present results suggest that Tax and Foxp3 mRNA vary with the same degree of disease severity in HAM/TSP patients. Tax fluctuations may affect CTLA-4 and GITR expression via the Foxp3 pathway, causing virus-induced dysfunction of CD4+CD25+ T cells in HAM/TSP patients.

A comparative analysis of the suitability of different peripheral blood samples for reverse transcriptase polymerase chain reaction / Análise comparativa da adequação de diferentes amostras de sangue periférico em ensaios de reação em cadeia da polimerase via transcriptase reversa

Venipuncture is one of the easiest clinical procedures to obtain viable blood samples to evaluate gene expression using mRNA analysis. However, the use of this sample type in reverse transcriptase polymerase chain reaction tests (RT-PCR) without prior treatment is controversial. We therefore propose to compare the suitability of different peripheral blood samples (whole blood without treatment, whole blood with hemolysis, peripheral blood mononuclear cells and frozen whole blood) for RT-PCR analysis. The results showed that, despite the blood sample being peripheral, it is possible to extract a fair amount of RNA and perform target gene amplification. Thus, peripheral blood without prior treatment could be used to investigate the gene expression using Real Time PCR.

A punção venosa representa um dos procedimentos clínicos mais simples na obtenção de amostras de sangue periférico e avaliação da expressão gênica através da análise do RNA mensageiro. Contudo, a utilização desta amostra, sem um tratamento prévio, em ensaios de Transcrição Reversa (RT-PCR) é controverso. Desta forma, propomos comparar a adequação de diferentes amostras de sangue periférico (sangue total sem tratamento, sangue total após hemólise, células mononucleares do sangue periférico e sangue total congelado) em ensaios de Transcrição Reversa Os resultados mostraram que independente da amostra de sangue periférico é possível extrair RNA em quantidade adequada e realizar a amplificação do gene alvo. Desta forma, o sangue periférico sem tratamento prévio pode ser utilizado em abordagens que envolvam a avaliação da expressão gênica por reação em cadeia da polimerase (PCR) em tempo real.

Treatment of hemorrhagic shock with hypertonic saline solution modulates the inflammatory response to live bacteria in lungs

Shock and resuscitation render patients more susceptible to acute lung injury due to an exacerbated immune response to subsequent inflammatory stimuli. To study the role of innate immunity in this situation, we investigated acute lung injury in an experimental model of ischemia-reperfusion (I-R) followed by an early challenge with live bacteria. Conscious rats (N = 8 in each group) were submitted to controlled hemorrhage and resuscitated with isotonic saline (SS, 0.9 percent NaCl) or hypertonic saline (HS, 7.5 percent NaCl) solution, followed by intratracheal or intraperitoneal inoculation of Escherichia coli. After infection, toll-like receptor (TLR) 2 and 4 mRNA expression was monitored by RT-PCR in infected tissues. Plasma levels of tumor necrosis factor α and interleukins 6 and 10 were determined by ELISA. All animals showed similar hemodynamic variables, with mean arterial pressure decreasing to nearly 40 mmHg after bleeding. HS or SS used as resuscitation fluid yielded equal hemodynamic results. Intratracheal E. coli inoculation per se induced a marked neutrophil infiltration in septa and inside the alveoli, while intraperitoneal inoculation-associated neutrophils and edema were restricted to the interseptal space. Previous I-R enhanced lung neutrophil infiltration upon bacterial challenge when SS was used as reperfusion fluid, whereas neutrophil influx was unchanged in HS-treated animals. No difference in TLR expression or cytokine secretion was detected between groups receiving HS or SS. We conclude that HS is effective in reducing the early inflammatory response to infection after I-R, and that this phenomenon is achieved by modulation of factors other than expression of innate immunity components.

Recurrence of papillary thyroid cancer suspected by high anti-thyroglobulin antibody levels and detection of peripheral blood thyroglobulin mRNA / Recorrência de carcinoma papilífero de tireóide suspeitada devido a presença de títulos elevados de anticorpo antitireoglobulina e detecção de mRNA de tireoglobulina em sangue periférico

The amplification of thyroglobulin (TG) mRNA in peripheral blood of patients with thyroid cancer has been studied for almost one decade, but its real contribution for diagnosis of cancer relapse has not yet been established. In the present paper we report the case of a patient with papillary thyroid cancer with undetectable stimulated serum thyrogobulin levels after thyroid ablation. Follow-up showed the presence of high titers of anti-thyroglobulin antibodies and the presence of TG mRNA in a peripheral blood sample, while cervical ultrasound and thorax and cervical computerized tomography were negative. Reinvestigation confirmed lymph node metastases. Anti-TG antibodies progressively decreased after surgery for metastatic lymph nodes resection followed by radioiodine therapy. Although our recent findings show that patients with positive TG mRNA do not have increased risk of cancer recurrence after 24 months of follow-up, the presence of TG mRNA along with high anti-TG antibodies were important indicators that determined further extensive investigation of tumour relapse in this patient, since positron emission tomography scan was not available at our Institution. A methodological standardization that can distinguish specific from non-specific TG mRNA amplification might be of great interest for the follow-up of differentiated thyroid cancer, especially in patients with high levels of anti-TG antibodies.

A amplificação de mRNA de tireoglobulina (TG) no sangue periférico de pacientes com câncer de tireóide tem sido estudada por quase uma década, mas a sua real contribuição para o diagnóstico do câncer ainda não foi estabelecida. No presente trabalho, relatamos o caso de uma paciente com carcinoma papilífero de tireóide com níveis séricos de TG indetectáveis após ablação com radioiodo. No seguimento apresentou títulos elevados de anticorpos anti-TG e a presença de mRNA TG em uma amostra de sangue periférico, enquanto a ultra-sonografia e as tomografias computorizadas de tórax e cervical foram negativas. Os níveis de anticorpos anti-TG diminuíram progressivamente após ressecção cirúrgica dos linfonodos seguida de terapia com radioiodo. Embora nossos achados recentes mostrem que pacientes com mRNA TG não apresentam risco aumentado de recorrência do câncer após 24 meses de seguimento, a presença de mRNA TG associada a altos títulos de anticorpos anti-TG foram importantes indicadores que determinaram o prosseguimento da investigação para recorrência tumoral nesta paciente, uma vez que não dispunhamos, na ocasião, e PET-Scan em nossa instituição. Uma padronização metodológica que permita distinguir entre amplificação de mRNA TG específica e inespecífica poderá ser de grande interesse no seguimento do carcinoma diferenciado da tireóide, especialmente naqueles com títulos elevados de anticorpos anti-TG.

Amplificação de mRNA de tireoglobulina no sangue de pacientes com carcinoma diferenciado da tireóide: qual o seu verdadeiro significado? / Thyroglobulin mRNA amplification in peripheral blood of patients with differentiated thyroid carcinoma: what does it really mean?

Apesar do excelente prognóstico, aproximadamente 20-40 por cento dos pacientes com carcinoma diferenciado da tireóide (CDT) evoluem com recidiva tumoral e o prognóstico está relacionado principalmente à detecção precoce da doença. Desta forma, o acompanhamento permanente dos pacientes com exames sensíveis é fundamental. A tireoglobulina (Tg) sérica já demonstrou importância como marcador de recidiva. Entretanto, sua dosagem apresenta ainda algumas dificuldades, como a interferência com anticorpo anti-Tg, e a sensibilidade dependente do nível de TSH. A amplificação de mRNA tumor-específico extraído a partir de células neoplásicas na corrente sangüínea apresentou resultados iniciais promissores. No entanto, após quase uma década de estudo da detecção do mRNA de Tg no sangue, ainda não foi estabelecida sua real contribuição no acompanhamento dos pacientes com CDT. Após análise crítica dos estudos publicados, verifica-se a enorme diversidade de protocolos empregados e resultados conflitantes. Desta forma, até o momento, a amplificação de mRNAs tireóide-específicos não é superior à dosagem de Tg sérica existente. A possibilidade de transcrição ilegítima e splicing alternativo são fatores que podem interferir com a especificidade do método.

La proteina asociada a SLAM (SAP) regula la expresion de IFN-gamma en lepra / The SLAM-associated protein (SAP) regulates IFN-gamma expression in leprosy

La inmunidad protectora contra Mycobacterium leprae requiere IFN-gamma. Los pacientes con lepra tuberculoide producen localmente citoquinas Th1, mientras que los pacientes lepromatosos producen citoquinas Th2. La molécula linfocitaria activadora de señales (SLAM) y la proteína aociada a SLAM (SAP) participan en la diferenciación celular que conduce a producción de patrones específicos de citoquinas. A fin de investigar la vía SLAM/SAP en la infección por M. leprae, determinamos expresión de ARN mensajero (ARNm) de SAP, IFN-gamma y SLAM en pacientes con lepra. Obeservamos que la expresión de SLAM correlacionó en forma directa con la expresión de IFN-gamma, mientras que la expresión de SAP interferiría con las respuetas de citoquinas Th1 mientras que SLAM contribuiría con la respuesta Th1 en lepra, señalando a la vía SLAM/SAP como potencial blanco modulador de citoquinas en enfermedades con respuestas Th2 disfuncionales.

Detección de mRNA de antígeno prostático específico en sangre periférica de pacientes con cáncer de próstata / Detection of mRNA of prostatic specific antigen in peripheran blood of patients with prostate cancer

El cáncer de próstata (CaP) es una neoplasia de alta incidencia en la población adulta masculina. Con el objeto de mejorar los actuales métodos de estadificación y monitoreo de estos tumores, se ha aplicado la técnica Transcripción Reversa y Reacción en Cadena de la Polimerasa (RT-PCR) para antígeno prostático específico (PSA) en pacientes con dicha patología. Este ensayo detecta la presencia de RNA mensajero de PSA (mRNA PSA) proveniente de células prostáticas en sangre periférica, brindando un método no invasivo y simple, que ayudaría a diferenciar pacientes con CaP localizado, de aquellos con CaP diseminado, aun en estadios tempranos de metástasis. Se estudiaron 27 pacientes con CaP, a los cuales se realizó en sangre entera RT-PCR para mRNA PSA dosándose además en suero la proteína PSA. De los 27 pacientes estudiados, catorce evidenciaron presencia de mRNA PSA. Los resultados indican que esta técnica es específica para el estudio de pacientes con CaP. Se ha observado que la probabilidad de RT-PCR positiva se incrementa con el tamaño del tumor. Un resultado positivo podría predecir metástasis a largo plazo y sería de utilidad pronóstica respecto al éxito quirúrgico en las prostatectomías radicales

Hepatic phenylalanine-hydroxylase and tyrosine-aminotransferase mRNA levels in rats adapted to diets with different concentrations of protein

Se estudió el efecto de la concentración de la proteína de la dieta sobre concentraciones de ARNm de la tirosina aminotransferasa (TAT) y la fenilalanina hidroxilasa (PAH) hepáticas en ratas adaptadas a consumir dietas con 18 ó 50 por ciento de caseína en un horario restringido de 7 horas (9 a 16 h) durante 5 días. Las concentraciones de ARNm de TAT de ratas adaptadas a una dieta de 18 por ciento de caseína y alimentadas en forma aguda con dietas que contenían 6, 18 ó 50 por ciento de caseína, fueron 0.15, 0.84 y 5.08 veces más altas a las 6 horas en comparación con las concentraciones de ARNm antes de la administración de la dieta. Las concentraciones de ARNm de TAT después de 17 horas de ayuno en las ratas alimentadas con 6, 18 ó 50 por ciento de caseína fueron respectivamente -0.45, 1.76 y 9.11 veces mayores en comparación con el valor basal. Las concentraciones ARNm de PAH mostraron un patrón similar; en las ratas adaptadas a 18 por ciento de caseína se observó un aumento de -.68, 1.63 y 2.5 veces en las concentraciones de ARNm de PAH en las ratas alimentadas en forma aguda con 6, 18 y 50 por ciento de casína respectivmanete y un aumento de -0.86, 2.32 y 9.33 veces después de 17 horas de ayuno. La concentraciones de ARNm de TAT y PAH en ratas adaptadas a consumir 50 por ciento de caseína y luego alimentadas con 6 ó 50 por ciento de caseína mostraron un pico máximo a las 6 horas de ayuno. Estos resultados sugieren que las concentraciones crecientes de proteína en la dieta son capaces de producir aumentos en la concentración de los ARNm de las dos enzimas, posiblemente para eliminar el exceso de aminoácidos consumidos, ya que la concentración de los ARNm dependió más del contenido de proteína de la dieta de adaptación