Human parasitism by the exotic tick Dermacentor variabilis (Parasitiformes: Ixodida) in Brazil: report of an imported case / Parasitismo humano pelo carrapato exótico Dermacentor variabilis (Parasitiformes: Ixodida) no Brasil: relato de um caso importado

Abstract In June 2012, a tick was found parasitizing a man in the city of São Paulo, who had recently returned from a visit to Pennsylvania, in the northeast of the United States. The tick was removed and sent to the São Paulo State Department of Health, where it was identified as a male of the species Dermacentor variabilis (Say, 1821), according to the literature and taxonomic keys. The tick was subjected to a PCR test to search for rickettsiae, but the result was negative. The fact that a human entered Brazilian territory unaware that he was parasitized by a hard tick not belonging to the national tick fauna is significant because of the possibility that an exotic species could be introduced and take hold in this country. Another major risk to public health is that this arthropod could be infected with the bacterium Rickettsia rickettsii, as this ectoparasite is the main vector of Spotted Fever on the East Coast of North America.

Resumo Em junho de 2012, foi enviado ao serviço da Secretaria de Estado da Saúde de São Paulo um carrapato que foi encontrado em parasitismo sobre um homem adulto na cidade de São Paulo, que havia chegado recentemente de uma viagem de turismo aos Estados Unidos, onde visitou o estado da Pensilvânia, situado na região Nordeste Americana. O carrapato foi identificado como um macho da espécie Dermacentor variabilis, (Say, 1821), de acordo com a literatura e chaves taxonômicas, sendo submetido ao teste da PCR para pesquisa de riquétsias, porém o resultado foi negativo. O fato de um ser humano ter cruzado a fronteira do Brasil, parasitado, sem o seu prévio conhecimento, por um carrapato duro, não pertencente à ixodofauna nacional, é de grande importância pela chance de introdução e estabelecimento no território brasileiro de uma espécie exótica. Outro grande risco para a saúde pública é que esse artrópode poderia estar infectado com a bactéria Rickettsia rickettsii, pois esse ectoparasito é o principal vetor da Febre Maculosa na costa Leste Norte Americana.

Detección de " Candidatus Rickettsia andeanae" en Rhipicephalus sanguineus sensu stricto (Acari: Ixodidae) en Rapa Nui-Isla de Pascua / Detection of " Candidatus Rickettsia andeanae" in Rhipicephalus sanguineus sensu stricto (Acari: Ixodidae) from Rapa Nui-Easter Island

INTRODUCCIÓN: Las rickettsiosis son enfermedades emergentes transmitidas por vectores artrópodos cuyos agentes etiológicos corresponden a bacterias patógenas del género Rickettsia y Orientia . Bacterias de este género han sido descritas en el norte y sur de Chile. OBJETIVO: Determinar presencia de Rickettsia spp. en garrapatas colectadas a partir de perros domésticos en Rapa Nui-Isla de Pascua, Región de Valparaíso. MÉTODOS: Fueron muestreados 20 perros callejeros durante octubre del año 2018. Se colectaron ocho garrapatas adultas desde siete animales (prevalencia: 35%); luego de su identificación taxonómica fueron sometidas a amplificación y secuenciación del gen ADNm 16S para garrapata y gltA (citrato sintetasa) para Rickettsia . RESULTADOS: Todos los ejemplares de garrapatas adultas correspondieron genéticamente a Rhipicephalus sanguineus sensu stricto lo cual fue confirmado mediante un análisis filogenético. En dos garrapatas (25%) se encontraron secuencias idénticas de gltA compatibles con " Candidatus Rickettsia andeanae", que formaron un clado monofilético con aislados obtenidos en Brasil, Chile y Perú. CONCLUSIÓN: Se documenta la presencia de " Ca. R. andeanae" s. s. en Rapa Nui-Isla de Pascua, asociado por primera vez a garrapatas del complejo R. sanguineus en Chile.

BACKGROUND: Rickettsioses are vector-borne emerging diseases caused by pathogenic bacteria of the genera Rickettsia and Orientia . Bacteria of these genera have been described in northern and southern Chile, respectively. AIM: To determine the presence of Rickettsia spp. in ticks collected from domestic dog in Rapa Nui-Easter Island, Valparaíso Region. METHODS: 20 stray dogs were sampled during October 2018. Overall, eight adult ticks were collected from seven animals (prevalence: 35%); after morphological identification, were submitted to DNA extraction and amplification and sequencing of the tick mitochondrial 16S DNA gene. The screening for Rickettsia was performed targeting the gltA (citrate synthetase) gene. RESULTS: A phylogenetic analysis confirmed the identity of the ticks as Rhipicephalus sanguineus sensu stricto. In two ticks (25%), we retrieved identical sequences of gltA compatible with " Candidatus Rickettsia andeanae", which formed a monophyletic group with conspecific isolates obtained in Brazil, Chile and Peru. CONCLUSION: This study proves the presence of " Ca . R. andeanae" in R. sanguineus s. s. at Rapa Nui-Easter Island, which also corresponds to the first report of this Rickettsia spp. in R. sanguineus complex for Chile.

Capybara (Hydrochoerus hydrochaeris) exposure to Rickettsia in the Federal District of Brazil, a non-endemic area for Brazilian spotted fever / Exposição de capivaras (Hydrochoerus hydrochaeris) à Rickettsia no Distrito Federal, área não endêmica para febre maculosa brasileira

Abstract In this study, whole blood samples and ticks were collected from 57 capybaras in recreational areas in the Federal District, Brazil, aiming to investigate the presence of Rickettsia spp. using polymerase chain reaction (PCR) and indirect immunofluorescence (IFAT) assays. None of the capybara blood samples yielded rickettsial DNA by PCR. Among 55 capybara serum samples tested by IFAT, 53 (96.3%) reacted to Rickettsia spp. Among these, 21 (39.6%) identified the R. bellii antigen as the probable antigen involved in a homologous reaction (PAIHR), whereas 2 (3.8%) identified the R. parkeri antigen. Ticks collected from capybaras were identified as 173 Amblyomma sculptum and 410 A. dubitatum, in addition to nine Amblyomma spp. larvae. A sample of 231 ticks was subjected to DNA extraction and PCR for Rickettsia species. None of 122 A. sculptum yielded rickettsial DNA. Molecular evidence of R. bellii was found in 25/108 (23.1%) and of Rickettsia sp. strain Cooperi (R. parkeri-like agent) in 2/108 (1.9%) of the A. dubitatum samples. These results suggest a greater exposure to R. bellii in these capybara populations, in addition to a more significant number of A. dubitatum, which might characterize the Federal District region as not endemic for Brazilian spotted fever.

Resumo O presente trabalho realizou a coleta de amostras de sangue total e carrapatos de 57 capivaras da região, com o intuito de pesquisar bactérias do gênero Rickettsia spp., a partir de métodos de diagnóstico molecular (PCR) e sorológicos (RIFI). Nenhuma amostra de sangue das capivaras foi positiva na PCR. Dentre as 55 amostras de soro testadas por RIFI, 53 (96,3%) apresentaram soro-reação para Rickettsia spp. Dessas 53 amostras, 21 (39,6%) demonstraram o antígeno de R. bellii como provável antígeno envolvido em reação homóloga (PAERH); e duas (3,8%) demonstraram o antígeno de R. parkeri. Foram amostrados 173 carrapatos identificados como Amblyomma sculptum e 410 como Amblyomma dubitatum, além de nove larvas (Amblyomma spp.). Entre os carrapatos, 231 foram submetidos à extração de DNA e PCR para pesquisa de Rickettsia. Foram encontradas evidências moleculares de R. bellii em 25/108 (23,1%) e Rickettsia sp. "strain" Cooperi em 2/108 (1,9%) das amostras de A. dubitatum testadas. Os resultados sugerem uma maior exposição à R. bellii nas populações de capivaras da região, além de uma maior quantidade de carrapatos identificados como A. dubitatum. Isso pode estar relacionado ao que configura a região do Distrito Federal como não endêmica para a febre maculosa brasileira.

Spotted fever group rickettsial infection in dogs and their ticks from domestic-wildlife interface areas in southeastern Brazil / Infecção por rickettsias do Grupo da Febre Maculosa em cães e carrapatos de áreas de interface doméstico-silvestre no sudeste Brasileiro

Abstract Rickettsia rickettsii is the causative agent of Brazilian spotted fever (BSF), for which humans and dogs are both susceptible. Dogs are sentinels in serological surveys, however, canine disease is rarely reported. Therefore, we aimed to evaluate natural infection by spotted fever group (SFG) Rickettsia spp. in dogs and ticks collected from domiciles close to forest fragments, featuring domestic-wildlife interface areas. Samples from 115 dogs and 135 ixodids were assessed by polymerase chain reactions (PCR) targeting the gltA gene for Rickettsia spp. and the ompA gene for the SFG rickettsial species. One dog (0.87%; 1/115) was positive for R. rickettsii. This dog presented nonspecific laboratory and clinical abnormalities (thrombocytopenia, hyperproteinemia, lymph node enlargement, emaciation, anorexia, and lethargy). Rickettsia parkeri was identified in 2.96% (4/135) of the ticks (Amblyomma sculptum, A. aureolatum, and Rhipicephalus sanguineus). This study confirmed the presence of SFG bacteria in non-endemic and preserved locations, where domestic and wild populations interact. We reinforce the fact that the dog is susceptible to natural R. rickettsii infection. Although this is a rare finding, preventive measures should be taken against BSF in the studied areas. Finally, R. parkeri infection is possibly being demonstrated in A. sculptum for the first time.

Resumo Rickettsia rickettsii é o agente causador da Febre Maculosa Brasileira (FMB), doença na qual humanos e cães são susceptíveis. Os cães são sentinelas nos inquéritos sorológicos, contudo, a doença canina é raramente descrita. Assim sendo, objetivou-se avaliar a infecção natural por Rickettsia spp. do Grupo da Febre Maculosa (GFM) em cães e carrapatos obtidos de domicílios próximos a fragmentos de mata, caracterizando áreas de interface doméstico-silvestre. Amostras de 115 cães e 135 ixodídeos foram avaliadas pela reação em cadeia da polimerase (PCR) tendo como alvo o gene gltA de Rickettsia spp. e o gene ompA das espécies do GFM. Um cão (0,87%; 1/115) foi positivo para R. rickettsii. Este animal apresentou alterações clínicas e laboratoriais inespecíficas (trombocitopenia, hiperproteinemia, linfonodos edemaciados, emagrecimento, anorexia e letargia). Rickettsia parkeri foi identificada em 2,96% (4/135) dos carrapatos (Amblyomma sculptum, A. aureolatum e Rhipicephalus sanguineus). Este estudo confirmou a presença de bactérias do GFM em locais preservados e não endêmicos, onde populações domésticas e silvestres interagem. Reforçamos o fato do cão ser susceptível à infecção natural por R. rickettsii. Embora este seja um achado raro, medidas preventivas devem ser tomadas contra a FMB nas áreas estudadas. Em última análise, a infecção por R. parkeri possivelmente está sendo demonstrada pela primeira vez em A. sculptum.

Implications of domestic dogs in the epidemiology of Rickettsia parkeri strain Atlantic rainforest and Rangelia vitalii in Southeastern Brazil / Implicações dos cães domésticos na epidemiologia da Rickettsia parkeri cepa Mata Atlântica e da Rangelia vitalii no Sudeste do Brasil

Abstract This study aimed to evaluate the occurrence of diseases transmitted by Amblyomma ovale in 61 dogs monitored for three years through collections of ticks and blood, interviews, telemetry and camera traps in three areas of Serra do Mar State Park, Brazil. Blood samples were used to investigate infection by Rangelia vitalii by real-time TaqMan PCR and Rickettsia parkeri by IIFA. The collected ticks were submitted to conventional PCR to investigate the presence of R. parkeri . These data were compared with the monitoring results and interviews with the owners. Dogs considered as companion presented a risk of infection by R. parkeri strain Mata Atlantica 5.4 times higher than those not considered as companion (p = 0.009). Dogs that had at least one A. ovale collected during the campaigns had a 10 times higher risk of infection by R. parkeri strain Mata Atlantica than those who did not (p = 0.009). One dog positive for R. vitalii by real-time TaqMan PCR was parasitized by A. ovale frequently during monitoring. Sequenced ompaA - positive DNA samples had 100% identity of R. parkeri strain Mata Atlantica clone As106. From the findings, it is urgent to control domestic dogs around rainforests to reduce zoonoses transmission.

Resumo A ocorrência de doenças transmitidas por Amblyomma ovale em 61 cães monitorados por três anos através de coletas de carrapatos, sangue, entrevistas, telemetria e armadilhas fotográficas foi avaliada em três áreas do Parque Estadual da Serra do Mar - SP. Amostras de sangue foram utilizadas para investigação de Rangelia vitalii através de PCR TaqMan em tempo real e Rickettsia parkeri através da RIFI. Carrapatos coletados foram submetidos à PCR convencional para investigação de R. parkeri . Estes dados foram comparados considerando os resultados do monitoramento e entrevistas. Cães de companhia apresentaram risco de infecção pela R. parkeri cepa Mata Atlântica 5,4 vezes maior que os não considerados como de companhia (p = 0,009). Cães que tiveram pelo menos um A. ovale coletado apresentaram risco de infecção por R. parkeri cepa Mata Atlântica 10 vezes maior do que aqueles que não tiveram (p = 0,009). Um cão positivo para R. vitalii através de PCR TaqMan em tempo real foi parasitado por A. ovale durante o monitoramento. Amostras positivas para o gene ompaA possuíam 100% de identidade do clone As106 de R. parkeri cepa de Mata Atlântica. Assim, é urgente o controle de cães na Mata Atlântica para redução dos riscos de zoonoses.

Detection of tick-borne rickettsial pathogens in naturally infected dogs and dog-associated ticks in Medellin, Colombia / Detecção de patógenos rickettsiais transmitidos por carrapatos em cães naturalmente infectados e carrapatos associados a cães em Medellin, Colômbia

Abstract Tick-borne rickettsial pathogens (TBRP) are important causes of infections in both dogs and humans. Dogs play an important role as a biological host for several tick species and can serve as sentinels for rickettsial infections. Our aim was to determine the presence of TBRP in dogs and in dog-associated ticks and their potential risk to human diseases in Medellin, Colombia. DNA for E. canis (16S rRNA and dsb) and A. platys (groEl) was detected in 17.6% (53/300) and 2.6% (8/300) of dogs, respectively. Antibodies against Ehrlichia spp. 82 (27.3%) and Anaplasma spp. 8 (2.6%) were detected in dogs. Antibody reactivity against both agents were found in 16 dogs (5.3%). Eight dogs showed antibody for Rickettsia spp. with titers that suggest 3 of them had a probable exposure to R. parkeri. Rhipicephalus sanguineus s.l. (178/193) was the main tick in dogs, followed by R. microplus (15/193). The minimum infection rates (MIR) in R. sanguineus were 11.8% for E. canis and 3.4% for A. platys. E. canis and A. platys are the main TBRP infecting dogs and ticks and R. sanguineus s.l. is likely involved in the transmission of both agents. Interestingly, we found serological evidence of exposure in dogs for spotted fever group rickettsiae.

Resumo As riquétsias transmitidas por carrapatos (RTC) são causas importantes de infecção em cães e humanos. Os cães exercem um papel essencial como hospedeiros biológicos para diversas espécies de carrapatos, assim como podem ser úteis como sentinelas de infecções por riquétsias. O intuito deste estudo foi determinar a presença de RTC em cães, assim como em seus carrapatos, para determinar o risco potencial de doença humana em Medellín, Colômbia. DNA de Ehrlichia canis (16S rRNA e dsb) e Anaplasma platys (groEl) foi detectado em 17,6% (53/300) e 2,6% (8/300) dos cães, respectivamente. Anticorpos contra Ehrlichia spp. (82; 27,3%) e Anaplasma spp. (8; 2,6%) foram detectados nos cães. Reatividade de anticorpos contra ambos patógenos (Ehrlichia e Anaplasma) foi detectada em 16 cães (5,3%). Oito animais apresentaram anticorpos contra Rickettsia spp., e 3 deles sugerem uma provável exposição a Rickettsia parkeri. Rhipicephalus sanguineus s.l. (178/193) foi a principal espécie de carrapatos, seguida de R. microplus (15/193). A taxa de infecção mínima em R. sanguineus foi 11,8% para E. canis e 3,4% para A. platys. E. canis e A. platys são as principais RTC que infectam cãese R. sanguineus s.l. provavelmente está envolvido na transmissão de ambos os agentes. É evidente, porém, a exposição sorológica dos cães a riquétsias do grupo da febre maculosa.

Molecular detection of Cercopithifilaria bainae and other tick-borne pathogens in Rhipicephalus sanguineus s.l. isolated from dogs in Midwest Brazil / Detecção molecular de Cercopithifilaria bainae e outros patógenos transmitidos por carrapatos em Rhipicephalus sanguineus s.l. isolados de cães no Centro-Oeste do Brasil

Abstract The aim of the present study was to detect Cercopithifilaria bainae and other tick-borne pathogens and to perform molecular characterization of the tick Rhipicephalus sanguineus s.l. collected from dogs. Ticks (n = 432, including 8 larvae, 59 nymphs, and 365 adults) were sampled from domiciled dogs (n = 73) living in Campo Grande, Mato Grosso do Sul (Midwest Brazil). All ticks were morphologically identified as R. sanguineus. Genomic DNA was extracted in pools (three to five ticks per animal) and was used for definition of R. sanguineus haplotypes (based on 16S rRNA analysis) and pathogen identification (Cercopithifilaria sp., Ehrlichia canis, Anaplasma platys, Hepatozoon canis, Babesia vogeli and Rickettsia spp.). Rhipicephal us sanguineus specimens were identified as haplotypes A and B. DNA of Cercopithifilaria bainae (43.83%; 32/73), Ehrlichia canis (24.65%; 18/73), Anaplasma platys (19.17%; 14/73), and Hepatozoon canis (5.47%; 4/73) was detected. The identity of pathogens was confirmed by DNA sequence analysis. The present study confirms the presence of haplotypes A and B of R. sanguineus in the state of Mato Grosso do Sul and its importance as a vector of several pathogens of veterinary concern. Finally, this is the first report to identify C. bainae in ticks in the Midwestern region of Brazil.

Resumo O objetivo do presente estudo foi detectar Cercopithifilaria bainae e outros patógenos transmitidos por carrapatos e realizar a caracterização molecular do carrapato Rhipicephalus sanguineus s.l. coletado em cães. Carrapatos (n = 432, incluindo 8 larvas, 59 ninfas e 365 adultos) foram amostrados de cães domiciliados (n = 73) residentes no município de Campo Grande, Mato Grosso do Sul (centro-oeste do Brasil). Todos os carrapatos foram identificados morfologicamente como R. sanguineus. O DNA genômico foi extraído em pools (três a cinco carrapatos por animal), seguido pela definição de haplótipos (com base no gene 16S rRNA) e pela investigação de patógenos (Cercopithifilaria sp., Ehrlichia canis, Anaplasma platys, Hepatozoon canis, Babesia vogeli e Rickettsia spp.). Os espécimes coletados foram identificados como haplótipos A e B de R. sanguineus. Foram detectados DNA de Cercopithifilaria bainae (43,83%; 32/73), Ehrlichia canis (24,65%; 18/73), Anaplasma platys (19,17%; 14/73) e Hepatozoon canis (5,47%; 4/73). A identidade dos patógenos foi confirmada por análise de sequência de DNA. O presente estudo confirma a circulação dos haplótipos A e B de R. sanguineus no estado de Mato Grosso do Sul e sua importância como vetor de vários patógenos de interesse veterinário. Finalmente, este é o primeiro relato de C. bainae em carrapatos na região centro-oeste do Brasil.

Molecular detection of Rickettsia genus in chigger mites (Trombidiformes: Trombiculidae) collected on small mammals in southeastern brazilian / Detecção molecular do gênero Rickettsia em ácaros trombiculídeos (Trombidiformes: Trombiculidae) coletados em pequenos mamíferos do sudeste brasileiro

Abstract Chiggers are ectoparasites of vertebrates and may cause trombiculiasis or transmit pathogens to their hosts. Specimens collected from rodents and marsupials were morphologically identified as Herpetacarus hertigi, Eutrombicula tinami, Kymocta sp., Quadraseta brasiliensis, Quadraseta falconensis, Quadraseta flochi, Quadraseta mackenziei, Quadraseta pazca, Quadraseta trapezoides, Quadraseta sp., Serratacarus sp., and Trombewingia bakeri. These mites were submitted individually to molecular analyses for the detection of bacteria of the genus Coxiella, Hepatozoon and Rickettsia. Samples were positive to Rickettsia only. Obtained sequences for the gltA (350 pb) and ompA (488 pb) genes were identical to "Candidatus Rickettsia colombianensi", a species previously detected in ticks. In addition, molecular identification of mites based on 18S rDNA sequences are provided for H. hertigi, Kymocta sp., Q. brasiliensis, Q. pazca, Q. trapezoides, Quadraseta sp., and T. bakeri for the first time. This is the first report of the detection of a Rickettsia sp. in chigger mites collected on rodents in Brazil.

Resumo Os trombiculídeos são ectoparasitas de vertebrados e podem causar trombiculíase ou transmitir patógenos ao hospedeiro. Exemplares coletados em roedores e marsupiais foram identificados morfologicamente como Herpetacarus hertigi, Eutrombicula tinami, Kymocta sp., Quadraseta brasiliensis, Quadraseta falconensis, Quadraseta flochi, Quadraseta mackenziei, Quadraseta pazca, Quadraseta trapezoides, Quadraseta sp., Serratacarus sp. e Trombewingia bakeri. Estes ácaros foram submetidos individualmente à análise molecular para detecção de bactérias dos gêneros Coxiella, Hepatozoon e Rickettsia. Amostras foram positivas somente para Rickettsia. Sequências obtidas para os genes gltA (350 pb) e ompA (488 pb) foram idênticas à "Candidatus Rickettsia colombianensi", uma espécie anteriormente detectada em carrapatos. Além disso, foram fornecidas sequências de DNA 18S para identificação molecular de H. hertigi, Kymocta sp., Q. brasiliensis, Q. pazca, Q. trapezoides, Quadraseta sp. e T. bakeri. Este é o primeiro registro da detecção de Rickettsia em ácaros trombiculídeos coletados em roedores do Brasil.

Molecular detection of Bartonella, Ehrlichia and Mycoplasma in feral dogs of El Pedregal de San Angel Ecological Reserve in Mexico City / Detecção molecular de Bartonella, Ehrlichia e Mycoplasma em cães selvagens da Reserva Ecológica El Pedregal de San Angel, na Cidade do México

Abstract Free-ranging and feral dogs represent a group of unattended companion animals. They impact wild animal populations by predating native species, displacing predators and introducing exotic pathogens. The aim of this work was to describe the molecular occurrence of Rickettsia, Ehrlichia, Anaplasma, Mycoplasma and Bartonella in feral dogs. The study was carried out in the last relict of a protected area in Mexico City. Blood clots samples from 19 dogs were obtained and analyzed for detection of specific fragments of the 16S-rRNA gene for Anaplasma, Ehrlichia and Mycoplasma and citrate synthase (gltA) for Bartonella and Rickettsia. Our results showed that DNA from three bacteria species (Bartonella vinsonii subsp. berkhoffii, Ehrlichia canis and Mycoplasma haemocanis) was present with frequencies ranging from 5.3 to 15.8%. This is the first record of B. vinsonii subsp. berkhoffii and M. haemocanis in dogs from México, and also the first finding of Ehrlichia canis in Mexico City. It is important to perform surveillance of feral dog populations in order to identify the impact of these pathogens on wild animal populations and Public Health in order to establish prevention and protection programs.

Resumo Cães errantes e selvagens representam um grupo de animais de companhia livres. Eles impactam as populações de animais selvagens pela predação de espécies nativas, deslocando predadores e introduzindo patógenos exóticos. O objetivo deste trabalho foi descrever a ocorrência molecular de Rickettsia, Ehrlichia, Anaplasma, Mycoplasma e Bartonella em cães selvagens. O estudo foi realizado no último ecossistema de uma área protegida na Cidade do México. Amostras de coágulos sanguíneos de 19 cães foram obtidas e analisadas para detecção de fragmentos específicos do gene 16S-rRNA para Anaplasma, Ehrlichia e Mycoplasma e citrato sintase (gltA) para Bartonella e Rickettsia. Nossos resultados mostraram que o DNA de três espécies de bactérias (Bartonella vinsonii subsp. berkhoffii, Ehrlichia canis e Mycoplasma haemocanis) estava presente com frequências variando de 5,3 a 15,8%. Este é o primeiro registro de B. vinsonii subsp. berkhoffii e M. haemocanis em cães do México, e também a primeira descrição de Ehrlichia canis na Cidade do México. É importante realizar a vigilância das populações de cães selvagens para identificar o impacto desses patógenos nas populações de animais silvestres e na Saúde Pública, a fim de estabelecer programas de prevenção e proteção.

Hemoparasites in ticks of wild birds of Serra dos Órgãos National Park, state of Rio de Janeiro, Brazil / Hemoparasitos em carrapatos de aves silvestres do Parque Nacional da Serra dos Órgãos, estado do Rio de Janeiro, Brasil

Abstract The aim of this study is to detect the presence of tick-borne agents of genera Rickettsia, Borrelia, Babesia, Ehrlichia and Anaplasma in ticks collected from native wild birds in the state of Rio de Janeiro. Birds were captured and observed carefully to find the ectoparasites. DNA detection of hemoparasites was performed by means of the polymerase chain reaction (PCR). The sequences obtained were analyzed and their homologies were compared to the available isolates in the GenBank platform database. A total of 33 birds were captured from 20 different species, of which 14 were parasitized by Amblyomma longirostre (n = 22). There was absence of DNA from agents of the genera Babesia, Anaplasma and Ehrlichia in the evaluated samples. The phylogenetic analysis indicated that one sample had 100% identity with Rickettsia bellii (KJ534309), the other two samples showed 100% identity with Rickettsia sp. Aranha strain and strain AL (EU274654 and AY360216). The positive sample for R. bellii was also demonstrated to be positive for Borrelia sp., which presented a similarity of 91% with Borrelia turcica (KF422815). This is the first description of Borrelia sp. in ticks of the genus Amblyomma in South America.

Resumo Este trabalho teve como objetivo detectar evidências moleculares da presença de agentes dos gêneros Rickettsia, Borrelia, Babesia, Anaplasma e Ehrlichia transmitidos por carrapatos coletados de aves silvestres no estado do Rio de Janeiro. Aves foram capturadas e observadas cuidadosamente a procura de ectoparasitos. A detecção de DNA de hemoparasitos foi realizada por meio da reação em cadeia da polimerase (PCR). As sequências obtidas foram analisadas e sua homologia comparada aos isolados disponíveis na base de dados da plataforma GenBank. Foram capturadas 33 aves, de 20 espécies diferentes das quais 14 estavam parasitadas por Amblyomma longirostre (n = 22). Houve ausência de DNA de agentes dos gêneros Babesia, Anaplasma e Ehrlichia nas amostras avaliadas. A análise filogenética indicou que uma amostra apresentou 100% de identidade com Rickettsia bellii (KJ534309), as outras duas amostras apresentaram 100% de identidade com Rickettsia sp. cepa Aranha e Cepa AL (EU274654 e AY360216.). A amostra positiva para R. bellii também apresentou positividade para Borrelia sp. que apresentou similaridade de 91% com Borrelia turcica (KF422815). Esta é a primeira descrição de Borrelia sp. em carrapatos do gênero Amblyomma na América do Sul.

Especies rickettsiales en casos humanos con síndrome febril agudo inespecífico en Perú / Rickettsial species in human cases with non-specific acute febrile syndrome in Peru

RESUMEN Con el objetivo de caracterizar molecularmente aislamientos rickettsiales procedentes de humanos con síndrome febril agudo inespecífico se realizó un estudio descriptivo transversal, con aislamientos propagados en cultivos celulares Vero ATCC y líneas alternativas, verificando viabilidad mediante Inmunofluoresencia Indirecta (IFI). Previa extracción del ADN, se amplificó el gen gltA mediante PCR convencional, y se analizó su secuencia. Doce aislamientos fueron amplificados, cinco con suficiente ADN para secuenciarlos, evidenciando compatibilidad con R. asembonensis en cuatro, y estrecha identidad con Coxiella burnetti en uno. Al menos tres de siete líneas celulares alternativas mostraron rendimiento significativo en sub cultivos. Se identificó R. asembonensis en cuatro aislamientos de humanos con síndrome febril agudo inespecífico, procedentes de las regiones de Ayacucho, Cajamarca y Madre de Dios en Perú, y Coxiella burnetti en uno procedente de la región Loreto.

ABSTRACT With the objective of molecularly characterizing rickettsial isolates from humans with non-specific acute febrile syndrome, a cross-sectional descriptive study was conducted, with isolates propagated in Vero ATCC cellular cultures and alternative lines, verifying the viability by means of Indirect Immunofluorescence. Prior to DNA extraction, the gltA gene was amplified by means of conventional PCR, and its sequence was analyzed. Twelve isolates were amplified, five with sufficient DNA so as to sequence them, exhibiting compatibility with R. asembonensis in four, and a close identity with Coxiella burnetti in one. At least three of seven alternative cellular lines showed significant yield in sub-cultures. R. asembonensis was identified in four isolates of humans with non-specific acute febrile syndrome, coming from the regions of Ayacucho, Cajamarca, and Madre de Dios in Peru, and Coxiella burnetti in one coming from the Loreto region.

First molecular detection of Rickettsia sp. strain Atlantic rainforest in Amblyomma ovale ticks from Espírito Santo state, Brazil / Primeira detecção molecular da Rickettsia sp. cepa Mata Atlântica em carrapatos Amblyomma ovale do estado do Espírito Santo, Brasil

Abstract Espírito Santo state (southeastern Brazil) is considered an endemic area for spotted fever group rickettsioses. In February 2017, we received in our laboratory seven unfed Amblyomma ovale adult ticks collected by a farmer from his clothes and body (not attached) during a working day in the rural area of Ibiraçu municipality, Espírito Santo state. By polymerase chain reaction (PCR) analyses, targeting gltA and ompA rickettsial genes, the DNA of Rickettsia was detected in 6/7 (85.7%) A. ovale. In all cases, DNA sequencing of PCR products revealed that consensus sequences of both genes were 100% identical to gltA and ompA corresponding sequences of Rickettsia sp. strain Atlantic rainforest retrieved from GenBank. This study reports the first molecular detection of Rickettsia sp. strain Atlantic rainforest in A. ovale ticks from Espírito Santo state. Our findings indicate a new Brazilian state in the southeast region at risk of human infection with this tick-borne emerging rickettsial agent.

Resumo O estado do Espírito Santo (Sudeste do Brasil) é considerado área endêmica para riquetsioses do Grupo Febre Maculosa. Em fevereiro de 2017, recebemos em nosso laboratório sete carrapatos adultos Amblyomma ovale não ingurgitados, coletados por um fazendeiro nas suas roupas e corpo (não fixadas) durante um dia de trabalho, em área rural do municipio de Ibiraçu, estado do Espírito Santo. Por meio de reação em cadeia da polimerase (PCR), amplificando os genes riquetsiais gltA e ompA , foi detectado ADN de Rickettsia em 6/7 (85,7%) dos A. ovale . O sequenciamento dos produtos de PCR indicou que as sequências consenso de ambos genes foram 100% idênticos às sequências correspondentes dos genes gltA e ompA da Rickettsia sp. cepa Mata Atlântica recuperadas do GenBank. Este estudo relata a primeira detecção molecular da Rickettsia sp. cepa Mata Atlântica em carrapatos A. ovale do estado do Espírito Santo. Nossos resultados apontam um novo estado brasileiro da região Sudeste com risco de infecção humana por este agente rickettsial emergente transmitido por carrapatos.

Caso autóctono de fiebre manchada por Rickettsia parkeri en Ensenada, Buenos Aires / Autochthonous case of spotted fever caused by Rickettsia parkeri in Ensenada, Buenos Aires

Se comunica un caso autóctono de fiebre manchada por Rickettsia parkeri en un adulto residente en Ensenada, Provincia de Buenos Aires ocurrido en el verano de 2016. El cuadro, secundario a una mordedura de garrapata en la pierna izquierda, se presentó como un síndrome febril agudo con deterioro del estado general, cefalea, mialgias, artralgias y exantema maculopapular. El sitio de la mordedura presentaba una úlcera con escara necrótica. El diagnóstico se confirmó por conversión serológica IgG anti-antígenos del género Rikettsia. La secuencia de un fragmento del gen gltA amplificado a partir de la lesión de piel presentó 100% identidad nucleotídica con las secuencias de cepas de R. parkeri aisladas en Argentina y en varios países de América. El paciente evolucionó favorablemente al tratamiento con doxiciclina.

We present a case of spotted fever occurred in an adult residing in Ensenada, Buenos Aires province in February 2016. The patient presented with an acute febrile syndrome associated with a skin necrotic lesion on the left leg secondary to a tick bite. The general symptoms were a maculopapular rash, headache, myalgia, and arthralgias. Seroconversion of anti-Rickettsia specific IgG antibodies confirmed recent infection. The nucleotidic and aminoacidic sequences of a gltA gen fragment matched 100% the sequences of R. parkeri strains from Argentina and other countries of America. The patient responded well to treatment with doxycycline.

Experimental infection of Rickettsia parkeri in the Rhipicephalus microplus tick

This study aimed to evaluate, by means of artificial feeding, the interaction between a pathogenic rickettsia and the hard tick R. microplus. We used partially engorged females fed on calves free of Rickettsia spp. Group 1 (G1), containing 20 ticks, was fed bovine blood only. Group 2 (G2), containing 20 ticks, was fed blood containing uninfected VERO cells, and group 3 (G3), containing 40 ticks, was fed blood containing VERO cells infected with Rickettsia parkeri. Biological parameters of the non-parasitic phase and a possible bacterial transmission to the tick eggs and to guinea pigs were evaluated. At the end of oviposition, all G3 females were PCR-positive for genes specific for the genus Rickettsia. Although no guinea pigs were infected, the experimental infection of R. microplus by R. parkeri caused a deleterious effect on the oviposition and provided the first report of transovarian transmission of rickettsia in this tick...

Perfil epidemiológico y molecular de Rickettsiosis en localidades de frontera peruana / Epidemiological and molecular profile of Rickettsiosis in peruvian border locations

RESUMEN Objetivos. Determinar circulación de rickettsias durante los años 2010 al 2011 en localidades fronterizas de cuatroregiones del Perú, y sus características clínicas epidemiológicas y moleculares. Materiales y métodos. Estudio transversal realizado en Tumbes, Tacna, Madre de Dios y Loreto. Se obtuvo datos clínicos epidemiológicos y muestras de sangre total para cultivo y para ensayo de inmunofluorescencia indirecta (IFI). Fue utilizado ADN extraído de cultivos de leucocitos y de ectoparásitos, aquellos genes específicos para rickettsias que amplificaron exitosamente fueron secuenciados y analizados. Resultados. El 33,8% de los encuestados portaba anticuerpos a rickettsias; en Loreto 21,7%, en Madre de Dios 33,0%, en Tacna 48,2% y en Tumbes 33,3%, encontrándose seropositividad en más del 40% de aislamientos confirmados por IFI. Las pruebas moleculares evidenciaron la presencia de Rickettsia felis en Ctenocephalides felis de perros y gatos de Tacna y una especie recientemente reportada para Latinoamérica: Candidatus Rickettsia asemboensis en pulgas Ctenocephalides felis de gatos y perros de Loreto y Madre de Dios. De la población estudiada, el 81,4% informó antecedentes de contacto con ectoparásitos, el 22,6% eran asintomáticos y el 27,8% habitaban viviendas sin agua ni desagüe, con piso de tierra. Conclusiones. Evidencias serológicas y moleculares confirman la circulación de rickettsias en las localidades fronterizas estudiadas, con predisponentes epidemiológicos, demostrándose presencia de dos especies: Rickettsia felis y Candidatus Rickettsia asemboensis, las que representarían una amenaza potencial para la salud de los pobladores.

ABSTRACT Objectives. To determine the circulation of Rickettsia in the years 2010 and 2011 in border locations in four regions ofPeru and their clinical epidemiological and molecular characteristics. Materials and Methods. A cross-sectional study was carried out in Tumbes, Tacna, Madre de Dios, and Loreto. Whole blood samples were obtained from participants for culture and indirect immunofluorescence (IIF) testing. The DNA taken from leukocytes and ectoparasite cultures was used, and those genes detected for Rickettsia that were successfully amplified were sequenced and analyzed. Results. A total of 33.8% of those surveyed carried Rickettsia antibodies (21.7% in Loreto, 33.0% in Madre de Dios, 48.2% in Tacna, and 33.3% in Tumbes). Seropositivity was confirmed with IIF in over 40% of isolates. Molecular tests showed the presence of Rickettsia felis in Ctenocephalides felis of dogs and cats in Tacna and a recently reported species for Latin America, Candidatus Rickettsia asemboensis, in fleas of cats and dogs in Loreto, Madre de Dios, and Tacna. Of the population studied, 81.4% reported a history of contact with ectoparasites, 22.6% were asymptomatic, and 27.8% lived in earthen-floored homes without water or drainage. Conclusions. Serological and molecular evidence confirms the circulation of Rickettsia in the border locations studied, with predisposing epidemiological factors. Tests confirm the presence of two species, Rickettsia felis and Candidatus Rickettsia asemboensis, which represent a potential threat to the health of the inhabitants.

Novel Rickettsia raoultii strain isolated and propagated from Austrian Dermacentor reticulatus ticks

Continuous culture of tick cell lines has proven a valuable asset in isolating and propagating several different vector-borne pathogens, making it possible to study these microorganisms under laboratory conditions and develop serological tests to benefit public health. We describe a method for effective, cost- and labor-efficient isolation and propagation of Rickettsia raoultii using generally available laboratory equipment and Rhipicephalus microplus cells, further demonstrating the usefulness of continuous tick cell lines. R. raoultii is one of the causative agents of tick-borne lymphadenopathy (TIBOLA) and is, together with its vector Dermacentor reticulatus, emergingin novel regions of Europe, giving rise to an increased threat to general public health...

Characterization of Genetic Variability and Population Structure of the Tick Amblyomma aureolatum (Acari: Ixodidae)

The hard tick Amblyomma aureolatum (Pallas) is a vector of the bacterium Rickettsia rickettsii , the etiologic agent of Brazilian spotted fever (BSF) in parts of Brazil. Despite its wide distribution in southeastern South America and its public health importance, there is no information about genetic variation of this species that might help to understand the epidemiology of BSF. Using data from eight microsatellite markers and ticks from six localities, we used a population genetics approach to test the hypothesis that tick populations from areas with the presence of R. rickettsii are genetically different from ticks from areas without R. rickettsii . Contrary to expectations, we found low genetic structure between studied regions. Thus, the presence of R. rickettsii in the specific area is more likely correlated with ecological and the environmental conditions or due to unknown gene coding regions of A. aureolatum genome that would be related to R. rickettsii infection resistance...

Detection of Rickettsia bellii and Rickettsia amblyommii in Amblyomma longirostre (Acari: Ixodidae) from Bahia state, Northeast Brazil

Studies investigating rickettsial infections in ticks parasitizing wild animals in the Northeast region of Brazil have been confined to the detection of Rickettsia amblyommii in immature stages of Amblyomma longirostre collected from birds in the state of Bahia, and in immatures and females of Amblyomma auriculariumcollected from the striped hog-nosed skunk (Conepatus semistriatus) and armadillos (Euphractus sexcinctus) in the state of Pernambuco. The current study extends the distribution of R. amblyommii (strain Aranha), which was detected in A. longirostre collected from the thin-spined porcupine Chaetomys subspinosus and the hairy dwarf porcupine Coendou insidiosus. In addition, we report the first detection of Rickettsia bellii in adults of A. longirostre collected from C. insidiosus in the state of Bahia.

Education to a Healthy Lifestyle Improves Symptoms and Cardiovascular Risk Factors – AsuRiesgo Study / Educação para um Estilo de Vida Saudável Melhora Sintomas e Fatores de Risco Cardiovasculares – Estudo AsuRiesgo

Background: Cardiovascular diseases are the current leading causes of death and disability globally. Objective: To assess the effects of a basic educational program for cardiovascular prevention in an unselected outpatient population. Methods: All participants received an educational program to change to a healthy lifestyle. Assessments were conducted at study enrollment and during follow-up. Symptoms, habits, ATP III parameters for metabolic syndrome, and American Heart Association’s 2020 parameters of cardiovascular health were assessed. Results: A total of 15,073 participants aged ≥ 18 years entered the study. Data analysis was conducted in 3,009 patients who completed a second assessment. An improvement in weight (from 76.6 ± 15.3 to 76.4 ± 15.3 kg, p = 0.002), dyspnea on exertion NYHA grade II (from 23.4% to 21.0%) and grade III (from 15.8% to 14.0%) and a decrease in the proportion of current active smokers (from 3.6% to 2.9%, p = 0.002) could be documented. The proportion of patients with levels of triglycerides > 150 mg/dL (from 46.3% to 42.4%, p < 0.001) and LDL cholesterol > 100 mg/dL (from 69.3% to 65.5%, p < 0.001) improved. A ≥ 20% improvement of AHA 2020 metrics at the level graded as poor was found for smoking (-21.1%), diet (-29.8%), and cholesterol level (-23.6%). A large dropout as a surrogate indicator for low patient adherence was documented throughout the first 5 visits, 80% between the first and second assessments, 55.6% between the second and third assessments, 43.6% between the third and fourth assessments, and 38% between the fourth and fifth assessments. Conclusion: A simple, basic educational program may improve symptoms and modifiable cardiovascular risk factors, but shows low patient adherence. .

Fundamentos: As doenças cardiovasculares são, atualmente, as maiores causas de óbito e incapacitação em todo o mundo. Objetivos: Avaliar os efeitos de um programa educativo básico para prevenção cardiovascular em uma população de pacientes ambulatoriais não selecionados. Métodos: Todos os participantes frequentaram um programa educativo de mudança para um estilo de vida saudável. Foram realizadas avaliações à admissão no estudo e durante o acompanhamento. Foram avaliados sintomas, hábitos, parâmetros do ATP III para síndrome metabólica e parâmetros da American Heart Association 2020 para saúde cardiovascular. Resultados: Foram incluídos no estudo 15.073 participantes com idade ≥ 18 anos. Foi feita a análise de dados dos 3.009 pacientes que completaram a segunda avaliação. Foram documentados perda de peso (de 76,6 ± 15,3 para 76,4 ± 15,3 kg, p = 0,002), melhora da dispneia aos esforços graus II-NYHA (de 23,4% para 21,0%) e III (de 15,8% para 14,0%), e redução na proporção de fumantes ativos atuais (de 3,6% para 2,9%, p = 0,002). Houve melhora na proporção de pacientes com níveis de triglicérides > 150 mg/dL (de 46,3% para 42,4%, p < 0,001) e de colesterol LDL > 100 mg/dL (de 69,3% para 65,5%, p < 0,001). Houve melhora ≥ 20% na métrica AHA 2020 no nível classificado como ruim para tabagismo (-21,1%), alimentação (-29,8%), e nível de colesterol (23,6%). Foi documentada grande evasão como indicador substituto para baixa adesão de paciente nas primeiras 5 consultas, sendo 80% entre a primeira e a segunda avaliação, 55,6% entre a segunda e a terceira, 43,6% entre a terceira e a quarta, e 38% entre a quarta e a quinta. Conclusão: Um programa educativo básico e simples pode melhorar os sintomas e fatores de risco cardiovasculares modificáveis, mas conta com pouca adesão por parte dos pacientes. .

A serological and molecular survey of Babesia vogeli, Ehrlichia canis and Rickettsia spp. among dogs in the state of Maranhão, northeastern Brazil / Detecção sorológica e molecular de Babesia vogeli, Ehrlichia canis e Rickettsia spp. em cães do Estado do Maranhão, Nordeste do Brasil

This study evaluated exposure and infection by tick-borne agents (Babesia vogeli, Ehrlichia canis and Rickettsia spp.) in 172 dogs in rural areas and 150 dogs in urban areas of the municipality of Chapadinha, state of Maranhão, northeastern Brazil, using molecular and serological methods. Overall, 16.1% of the sampled dogs (52/322) were seroreactive to B. vogeli, with endpoint titers ranging from 40 to 640. For E. canis, 14.6% of the dogs (47/322) were seroreactive, with endpoint titers from 80 to 163,840. Antibodies reactive to at least one of the five species of Rickettsia were detected in 18.9% of the dogs (61/322), with endpoint titers ranging from 64 to 4,096. High endpoint titers were observed for Rickettsia amblyommii. Three (0.9%) and nine (2.8%) canine blood samples were PCR-positive for Babesia spp. and E. canis. The ticks collected from urban dogs were all Rhipicephalus sanguineus sensu lato, whereas the rural dogs were infested by R. sanguineus s.l, Amblyomma cajennense sensu lato and Amblyomma ovale. One A. ovale tick was found to be infected by Rickettsia bellii. This study provides an epidemiological background for controlling and preventing canine tick-borne diseases in a neglected region of Brazil.

Este estudo avaliou por métodos sorológicos e moleculares a exposição e infecção por agentes transmitidos por carrapatos (Babesia vogeli, Ehrlichia canis, and Rickettsia spp.) em 172 cães de áreas rurais e 150 cães de áreas urbanas do município de Chapadinha, Estado do Maranhão, Nordeste do Brasil. No geral, 16,1% dos cães amostrados (52/322) apresentaram soros reagentes para B. vogeli, com títulos finais variando de 40 a 640. Para E. canis, 14,6% cães (47/322) apresentaram soros reagentes com títulos finais de 80 a 163,840. Anticorpos reativos para pelo menos uma das cinco espécies de Rickettsia foram detectados em 18,9% dos cães (61/322), com os títulos que variam de 64 a 4096. Foram observados altos títulos para Rickettsia amblyommii. Três amostras de sangue canino (0,9%) e 9 (2,8%) foram PCR positivas para Babesia spp e E. canis. Os carrapatos coletados de cães urbanos eram todos Rhipicephalus sanguineus sensulato, e os cães rurais estavam infestados por R. sanguineus s.l , Amblyomma cajennense sensu lato e Amblyomma ovale. Um carrapato A. ovale foi encontrado infectado por Rickettsia bellii. Este estudo fornece um conhecimento epidemiológico para o controle e prevenção de doenças transmitidas por carrapatos de cães em uma região negligenciada do Brasil.