Mutation analysis of SLC26A4 (Pendrin) gene in a Brazilian sample of hearing-impaired subjects.

BACKGROUND: Mutations in the SLC26A4 gene are associated with Pendred syndrome and autosomal recessive non-syndromic deafness (DFNB4). Both disorders have similar audiologic characteristics: bilateral hearing loss, often severe or profound, which may be associated with abnormalities of the inner ear, such as dilatation of the vestibular aqueduct or Mondini dysplasia. But, in Pendred syndrome (OMIM #274600), with autosomal recessive inheritance, besides congenital sensorineural deafness, goiter or thyroid dysfunctions are frequently present. The aim of this study was to determine whether mutations in SLC26A4 are a frequent cause of hereditary deafness in Brazilian patients. METHODS: Microsatellite haplotypes linked to SLC26A4 were investigated in 68 families presenting autosomal recessive non-syndromic deafness. In the probands of the 16 families presenting segregation consistent with linkage to SLC26A4, Sanger sequencing of the 20 coding exons was performed. In an additional sample of 15 individuals with suspected Pendred syndrome, because of the presence of hypothyroidism or cochleovestibular malformations, the SLC26A4 gene coding region was also sequenced. RESULTS: In two of the 16 families with indication of linkage to SLC26A4, the probands were found to be compound heterozygotes for probably pathogenic different mutations: three novel (c.1003 T > G (p. F335 V), c.1553G > A (p.W518X), c.2235 + 2 T > C (IVS19 + 2 T > C), and one already described, c.84C > A (p.S28R). Two of the 15 individuals with suspected Pendred syndrome because of hypothyreoidism or cochleovestibular malformations were monoallelic for likely pathogenic mutations: a splice mutation (IVS7 + 2 T > C) and the previously described c.1246A > C (p.T416P). Pathogenic copy number variations were excluded in the monoallelic cases and in those with normal results after Sanger sequencing. Additional mutations in the SLC26A4 gene or other definite molecular cause for deafness were not identified in the monoallelic patients, after exome sequencing. CONCLUSIONS: Biallelic pathogenic mutations in SLC26A4 explained ~ 3% of cases selected because of autosomal recessive deafness. Monoallelic mutations were present in ~ 13% of isolated cases of deafness with cochleovestibular malformations or suspected Pendred syndrome. These data reinforce the importance of mutation screening of SLC26A4 in Brazilian subjects and highlight the elevated frequency of monoallelic patients.

Enamel-renal syndrome in 2 patients with a mutation in FAM20 A and atypical hypertrichosis and hearing loss phenotypes.

Enamel-renal syndrome (OMIM #204690) is an uncommon disorder characterized by amelogenesis imperfecta and nephrocalcinosis and is caused by mutations in FAM20 A. We report 2 patients with enamel-renal syndrome who exhibited the typical features of this syndrome and a homozygous nonsense mutation in the FAM20 A gene (c.406 C>T), genetically confirming the diagnosis. They also exhibited 2 undescribed clinical features, hypertrichosis and hearing loss. Alterations in genes frequently associated with nonsyndromic hearing loss in the Brazilian population, including connexin 26 (GJB2), connexin 30 (GJB6) and mitochondrial 12 S rRNA (m.A1555 G mutation), were not found. These results suggest a putative function of FAM20 A in the development of the inner ear and in the formation of hair. The presence of nephrocalcinosis is a risk factor for renal impairment, and it is important to perform regular renal monitoring in order to avoid renal failure.

Alteraçöes nutricionais e do metabolismo energético na irradiaçäo abdominal: estudo experimental / Nutritional and energy metabolism changes in abdominal irradiation: experimental study

Estudaram-se os efeitos da irradiaçäo sobre o estado nutricional e o metabolismo energético do hospedeiro. Utilizaram-se 48 ratos adultos machos Wistar, mantidos em gaiolas metabólicas, e divididos em grupos controle (C) e irradiado (R). No período 1, pré-irradiaçäo, os ratos foram submetidos a calorimetria indireta no dia 4 (calorimetria 1) que forneceu as variáveis gasto energético (GE), quociente respiratório (QR), substrato total oxidado (STO) e proteínas (PO), glicides (GO) e lípides oxidadas (LO). A seguir transcorreu o período 2, de irradiaçäo, quando os ratos R receberam 300 cGy/ diários de irradiaçäo abdominal, por cinco dias, sob restriçäo em molde acrílico. Cada rato do grupo C passou a receber alimentaçäo pareada e foi submetido a irradiaçäo simulada. Calorimetrias foram realizadas durante esse período (II e III) e após o seu final (IV). No sacrifício (dia 14), dosou-se hemoglobina, hermatócrito, albumina e transferrina. A análise estatística dos resultados foi feita com significância de 0,05 e 0,01. No período 1, näo houve diferenças entre os grupos em relaçäo às variáveis analisadas. No período 2 ocorreu reduçäo da ingestäo de dieta e perda percentual de peso corpóreo nos dois grupos. Apesar da ingestäo semelhante, a reduçäo ponderal foi maior no grupo R que no C. A incorporaçäo de nitrogênio decresceu significantemente no período 2. Apenas a média de albumina sérica apresentou-se menor no grupo R. O QR reduziu-se na avaliaçäo calorimétrica III, mantendo-se mais baixo em IV no grupo R, sem retornar aos níveis iniciais. Houve reduçäo significante do GE apenas no grupo R, em III. No grupo R o STO diminuiu com a irradiaçäo. Em ambos houve reduçäo da PO e GO, que no grupo R se manteve reduzida em IV, mantendo menor PO. Nas condiçöes do presente estudo, a irradiaçäo abdominal determinaou reduçäo de ingestäo alimentar, perda ponderal corporal, hipoalbuminemia, reduçäo de incorporaçäo de nitrogênio e promoveu queda do gasto energético e do quociente respiratório, levando ainda a uma alteraçäo do perfil de consumo de substratos. Conclui-se que a irradiaçäo pode conduzir a desnutriçäo protéico-calórico, näo decorrente exclusivamente da anorexia a ela associada

Metabolismo energetico e desenvolvimento de tumor maligno experimental / Energy metabolism in experimental malignant tumor development

A causa mais frequente de mortalidade no cancer e a caquexia, cuja interpretacao mais comum e um balanco negativo entre a ingestao e o gasto calorico. Os autores utilizaram 48 ratos Wistar, adultos, machos, com peso corporeo em torno de 200 gramas. Os animais eram submetidos a periodo de adaptacao ao calorimetro durante seis dias, sendo mantidos em gaiolas metabolicas individuais, recebendo racao balanceada normal. A seguir, os animais foram aleatoriamente divididos em quatro grupos, cada qual com 12 ratos: grupo C, em que os animais eram mantidos com racao balanceada normoproteica ao longo de todo o experimento; grupo D, em que os animais recebiam dieta com baixo teor (1 por cento) proteico, durante toda a experiencia; grupo T, em que os animais eram alimentados com racao balanceada normoproteica ao longo de todo o experimento, recebendo subcutaneo do flanco o implante de celulas do tumor de Walker 256: grupo PF, em que cada animal era alimentado com racao balanceada normoproteica em quantidade diaria igual a ingerida na vespera por seu parceiro do grupo T, em esquema de alimentacao pareada (pair-feeding). A partir do 6. dia, cada animal tinha determinado seu peso corporeo e a quantidade de racao ingerida, bem como eram recolhidas fezes e urina, para determinacao do seu teor nitrogenado. ...

Efeitos da desnutriçäo protéica sobre a resposta metabólica ao trauma / Effects of protein malnutrition on the metabolic response to trauma

Com o objetivo de estudar as alteraçöes metabólicas pós-traumáticas frente, à desnutriçäo protéica, ratos alimentados com dietas de teor proteíco variado foram submetidos a um trauma osteo muscular padronizado e tiveram analisados aspectos metabólicos de balanço nitrogenado e composiçäo corpórea. Após 21 dias de alimentaçäo com dieta apropriada para cada grupo de estudo (normoprotéica e hipoprotéica), praticou-se ferida cutânea dorsal (subgrupos NJ (6) e DJ (6) e, em parte dos animais, traumatismo osteomuscular em ambas as patas traseiras (subgrupos NF(6) e DF (6). Após 14 dias da realizaçäo do trauma (35§ dia do experimento), os animais foram sacrificados e as carcaças foram preparadas para a determinaçäo dos compartimentos de composiçäo corpórea. Peso corpóreo, ingesta alimentar, excreçäo urinária e fecal de nitrogênio foram observados diariamente. Verificou-se que, nos animais alimentados com dieta normoprotéica, o trauma osteomuscular provocou reduçäo da ingestäo alimentar, do ganho de peso, do balanço nitrogenado e perda de gordura total. Nos animais com restriçäo protéica, a resposta ao trauma osteomuscular foi caracterizada por aumento na excreçäo de nitrogênio urinário e reduçäo no balanço nitrogenado, näo se verificando reduçäo na ingestäo alimentar, peso corporal e nos compartimentos de composiçäo corpórea

Modelo de calorímetro indireto experimental / An experimental indirect calorimeter model

A determinaçäo do gasto energético e do quociente respiratório é importante na análise de condiçöes patológicas como desnutriçäo, trauma, sepsis e outras. Esta determinaçäo pelos princípios da calorimetria indireta pode ser feita através das taxas de consumo de oxigênio e de produçäo de gás carbônico. Este trabalho é uma avaliaçäo de um modelo de calorímetro indireto de baixo custo, desenvolvido pelos autores. Para medida de consumo de oxigênio injeta-se um volume conhecido de oxigênio no sistema; para a produçäo de gás carbônico, usa-se soluçäo de NaOH 1,0N que retém o gás por simples titulaçäo, determina-se o volume produzido. Os resultados demonstram uma exatidäo superior a 95% na determinaçäo das taxas de produçäo de gás carbônico e de consumo de oxigênio. A determinaçäo do quociente respiratório foi avaliada por meio da combustäo de metanol (0,05ml), com resultados que indicam exatidäo superior a 95%. Experimentos com animais em condiçöes padronizadas, que tiveram o gasto energético e o quociente respiratório determinados, demonstram uma reprodutividade dos resultados ao longo do tempo e entre diferentes animais. Os experimentos comprovam a eficiência do aparelho para ser usado no estudo do metabolismo de pequenos animais de laboratório

Consequências da quimioterapia antitumoral sobre a composiçäo corpórea e o balanço nitrogenado: estudo experimental / Influence of antitumoral chemotherapy on body composition and nitrogen balance: experimental study

O tumor maligno e a quimioterapia constituem condiçöes potencialmente geradoras de desnutriçäo. Com o intuito de estudar a inter-relaçäo dessas duas situaçöes, foram utilizados ratos Wistar divididos em 5 grupos: Grupo C (12), ratos controle: grupo T (6), ratos partadores de carcinossarcoma 256 Walker; grupo TE (11), ratos em que se fez a administraçäo de 4-epidoxorrubicina (4-EPI) EV simultaneamente ao implante tumoral; grupo E (11), em que se fez apenas administraçäo de 4-EPI. Praticaram-se diariamente medidas do balanço nitrogenado por mensuraçäo do nitrogênio total ingerido e excretado; por ocasiäo do sacrifício dos animais (20§ dia do experimento) foi colhido material para determinaçäo de parâmetros de composiçäo corpórea. Realizou-se análise estatística adequada, assumindo como significativas as diferenças quando p < 0,05. Observou-se prejuizo da ingestäo alimentar no período próximo à injeçäo de 4-EPI, o qual se traduziu para perda de peso da carcaça nos grupos E e T6E, até 14 dias após a aplicaçäo do quimioterápico. A incorporaçäo nitrogenada acumulada foi menor nos grupos TE e T6E, nos períodos de 0 a 5 dias, o a 14 e 0 a 20 dias. Quanto à composiçäo corpórea verificou-se que o peso seco sem gordura e a gordura corpórea total encontram-se reduzidos nos grupos T e T6E em comparaçäo com o grupo C. No entanto, 20 dias após a aplicaçäo da 4-EPI näo se encontraram alteraçöes significativas na composiçäo corpórea, em comparaçäo com o grupo controle. Destarte, a quimioterapia aplicada em raos portadores de tumor maligno prejudica a incorporaçäo nitrogenada; outossim, apresenta repercussäo na composiçäo corpórea em termos de perda de gordura e massa sólida desengordurada pelo menos até 14 dias após a administraçäo da droga