Frequency and factors associated with Theileria equi, Babesia caballi and Trypanosoma evansi in equids from Bahia (Northeast Brazil) / Frequência e fatores associados a Theileria equi, Babesia caballi e Trypanosoma evansi em equídeos da Bahia (Nordeste do Brasil)

Abstract The aim of this study was to determine the frequency and factors associated to Babesia caballi, Theileria equi and Trypanosoma evansi in naturally infected equids from the northeast Brazil. Blood samples from 569 equids (528 horses, 8 mules, and 33 donkeys) were collected and tested for the presence of DNA of each of these protozoan parasites by PCR. Generalized linear models were used to evaluate risk factors associated with the infection. The frequency of T. equi infection was 83.5% (475/569) - 84.3% in horses, and 73.2% in donkeys and mules. The results of the final model indicated that age (senior group) and animal species (mule and donkey group) were protective factors against this pathogen. The frequency of B. caballi infection was 24.3% (138/569) - 23.5% in horses and 34.1% in donkeys and mules. Age (adult and senior group) was considered a protective factor against B. caballi infection whereas animal species (donkey and mule group) were considered a risk factor for the infection. Trypanosoma evansi infection was not detected in any of animals. Our results suggest that equids from the area studied may be infected earlier in life with the etiological agents of equine piroplasmosis and become asymptomatic carriers.

Resumo Este estudo teve como objetivos conhecer a frequência e os fatores associados à infecção por Babesia caballi, Theileria equi e Trypanosoma evansi em equinos naturalmente infectados do nordeste do Brasil. Amostras de sangue de 569 equídeos (528 equinos, 8 muares e 33 asininos) foram coletadas e testadas para a presença do DNA destes parasitos através da PCR. Modelos lineares generalizados foram utilizados na avaliação dos fatores associados às infecções. A frequência de infecção por T. equi foi de 83,5% (475/569) -84,3% (445/528) em eqüinos e 73,2% (30/41) em asininos e muares. Os resultados do modelo final indicam idade (sênior) e espécie (muar e asinina) como possíveis fatores de proteção para este patógeno. A frequência de infecção por B. caballi foi de 24,3% (138/569) - 23,5% (124/528) em eqüinos e 34,1% (14/41) em asininos e muares. As faixas etárias (adulto e sênior) foram identificadas como possíveis fatores de proteção, e a espécie (asinina e muar) como risco para ocorrência de infecção por B. caballi. Infecções por Trypanosoma evansi não foram detectadas. Estes resultados indicam que os equídeos na região estudada se infectam precocemente com agentes da piroplasmose equina tornando-se portadores assintomáticos.

Genetic variability of Leishmania infantum in naturally infected dogs in the state of Bahia, Brazil / Variabilidade genética de Leishmania infantum em cães naturalmente infectados no estado da Bahia, Brasil

Abstract In Brazil, Leishmania infantum mainly affects humans and dogs. The state of Bahia presents many dogs that are positive for this parasite. Despite the importance of epidemiology in this region, there are still very few studies that have assessed the genetic characteristics of L. infantum. The aim of this study is to investigate the genetic variability of L. infantum isolated identified in naturally infected dogs, in order to verify occurrence of subpopulation of this parasite in the different biomes existing in the state of Bahia. Thirty-two samples of L. infantum were analyzed, which were obtained isolated in dogs from the Mata Atlântica (rainforest), Caatinga (semi-arid scrub forest), and Cerrado (a vast tropical savannah eco-region) Bahia municipalities' biomes. All animals presented with clinical changes suggestive of Leishmania spp. and they exhibited positive reactions to serological tests. kDNA analysis with RFLP markers revealed the presence of genetic variability and gene flow in subpopulations of L. infantum; samples from the Mata Atlântica areas were genetically more similar to those from the areas of Caatinga and they were less likely to resemble those of the Cerrado. This data may be used to investigate the dissemination of parasite in the canine population of state of Bahia.

Resumo No Brasil a Leishmania infantum afeta principalmente o homem e os cães. O estado da Bahia apresenta elevado número de cães positivos por este parasito. Apesar da importância epidemiologia para a região, ainda há poucos estudos que avaliam as características genéticas de L. infantum. Objetivou-se com este estudo investigar a variabilidade genética de cepas de L. infantum identificadas em cães naturalmente infectados, a fim de verificar a ocorrência de sobpopulações do parasito nos diferentes biomas existentes no estado da Bahia. Foram analisadas 32 amostras de L. infantum isoladas em cães de municípios baianos distribuídos nos biomas Mata Atlântica, Caatinga e Cerrado. Todos os animais apresentavam alterações clínicas sugestivas de Leishmania spp. e reação positiva em exames sorológicos. A análise do kDNA com marcadores RFLP revelaram a presença de variabilidade genética e fluxo gênico nas subpopulações de L. infantum sendo que as amostras das áreas de Mata Atlântica foram geneticamente mais semelhantes as das áreas de Caatinga e foram mais distantes daquelas oriundas do Cerrado. Estas informações podem auxiliar em investigações de dispersão do parasito na população canino do Estado da Bahia.

Canine ehrlichiosis: prevalence and epidemiology in northeast Brazil / Erliquiose canina: prevalência e epidemiologia no nordeste do Brasil

Ehrlichiosis is a zoonotic disease that is caused by bacteria of the genus Ehrlichia. The aims of this study were to detect the presence of Ehrlichia spp. in the blood of dogs in Ituberá, Bahia, and to compare the sensitivities and specificities of blood smear, serological, and molecular examinations. Furthermore, this study identified factors associated with exposure to the agent in dogs in this locality. Blood samples were collected from 379 dogs and submitted for indirect immunofluorescent assay and polymerase chain reaction testing for the detection of Ehrlichia spp. antibodies and DNA, respectively. Additionally, a peripheral blood smear was obtained from the ear tip for parasite identification. Of the 379 animals, 12.4%, 32.7%, and 25.6% were identified as positive on the blood smear, serological, and molecular tests, respectively. The dogs positive in one of the three techniques were considered exposed (46.9%). Younger dogs and rural habitat were protective factors and presence of ticks and contact with other dogs were the risk factors associated with exposure to the agent. It was concluded that dogs of Ituberá have high positivity for Ehrlichia spp. and that the diagnostic methods used for detection are complementary.

Erliquiose é uma doença zoonótica causada por bactérias do gênero Ehrlichia. O objetivo desse estudo foi detectar a presença de Ehrlichia spp. no sangue de cães em Ituberá-BA, e comparar as sensibilidades e especificidades do esfregaço sanguíneo, e testes sorológico e molecular. Além disso, esse estudo identificou fatores associados com a exposição ao agente em cães desta localidade. Amostras de sangue foram coletadas de 379 cães e submetidas à Reação de Imunofluorescência Indireta e Reação em Cadeia de Polimerase para detecção de anticorpos e DNA de Ehrlichia spp., respectivamente. Adicionalmente, sangue periférico de ponta de orelha foi coletado para identificação do parasita. Dos 379 animais, 12,4%, 32,7% e 25,6% foram identificados como positivos no esfregaço sanguíneo, teste sorológico e molecular, respectivamente. Cães positivos em uma das três técnicas foram considerados expostos (46,9%). Cães mais novos e hábitat rural foram fatores de proteção e presença de carrapatos e contato com outros cães foram os fatores de risco associados à exposição ao agente. Foi concluído que, os cães do município de Ituberá têm alta positividade para Ehrlichia spp. e que os diferentes métodos diagnósticos utilizados para sua detecção são complementares.

Bovine babesiosis and anaplasmosis complex: diagnosis and evaluation of the risk factors from Bahia, Brazil / Complexo tristeza parasitária bovina: diagnóstico e avaliação dos fatores de risco na Bahia, Brasil

Direct diagnoses were made by using - blood smears and nested PCR (nPCR) tests on 309 blood samples from crossbred dairy cattle in the municipality of Ibicaraí, Bahia. From diagnostic blood smear slides, the observed parasitic frequencies were 31.1% for Anaplasma marginale and 20.4% for Babesia sp. From nPCR diagnoses, they were 63% for A. marginale, 34% for Babesia bigemina and 20.4% for Babesia bovis. There were significant differences (P <0.01) between the two diagnostic methods (nPCR and blood smear slides). The compliance obtained from the kappa test was 0.41 and 0.48 for A. marginale and Babesia sp., respectively. The tick samples from the six farms analyzed using nPCR were only positive for A. marginale. Evaluation of the risk factors relating to the presence of ticks and the age of the animals showed that there was a significant association (P <0.01) with the frequency of animals infected with both pathogens. Therefore, under the conditions studied, nPCR proved to be a good tool for diagnosing the agents of the bovine babesiosis and anaplasmosis complex because of its sensitivity and specificity in comparison with blood smears. The municipality of Ibicaraí is an area with endemic prevalence of bovine babesiosis and anaplasmosis confirmed by nPCR and A. marginale is the main agent of the disease.

Realizou-se o diagnóstico direto por esfregaço sanguíneo e nested PCR (nPCR) em 309 amostras de sangue de bovinos mestiços leiteiros provenientes do município de Ibicaraí, Bahia. A frequência observada no diagnóstico por lâminas de esfregaço sanguíneo foi 31,1% para Anaplasma marginale e 20,4% para Babesia sp. Enquanto que no diagnóstico por nPCR foi 63% para A. marginale, 34% para Babesia bigemina e 20,4% Babesia bovis. Verificaram-se diferenças significativas (P<0,01) na comparação entre os dois métodos de diagnósticos (nPCR e esfregaço sanguíneo). A concordância ao teste KAPPA obtida foi de 0,41 e 0,48 para A. marginale e Babesia sp., respectivamente. As amostras de carrapatos das seis propriedades analisadas por nPCR foram positivas apenas para A. marginale. Na avaliação dos fatores de risco verificou-se que a presença de carrapato e idade dos animais apresentaram associação significativa (P<0,01) com a frequência de animais infectados por ambos os patógenos analisados por nPCR. Portanto, nas condições estudadas, a nPCR revelou-se uma boa ferramenta para diagnóstico dos agentes do complexo tristeza parasitária bovina (TPB) devido a sensibilidade e especificidade, quando comparado ao esfregaço sanguíneo. O município de Ibicaraí apresenta-se como uma área endêmica para TPB com prevalência comprovada através de nPCR e, A. marginale o principal agente encontrado.

First report of Trypanosoma cruzi infection in naturally infected dogs from southern Bahia, Brazil / Primeiro relato de infecção natural por Trypanosoma cruzi em cães do sul da Bahia, Brasil

In order to verify the Trypanosoma cruzi infection in domestic domiciled dogs in a rural endemic area from the south region of the State of Bahia, Polymerase Chain Reaction (PCR) were performed using S35 and S36 primers in 272 dogs living in the district of Vila Operaria, in the municipality of Buerarema. All animals were clinically evaluated; 2.5 mL of blood were collected through venipuncture for the performance of molecular tests. None of these animals showed clinical signs of the illness and only two were identified with the DNA parasite. This result is the first report of natural infection by T. cruzi in domestic dogs in southern Bahia.

Com o objetivo de verificar a infecção por Trypanosoma cruzi em cães domésticos domiciliados em área rural e endêmica do sul da Bahia, foi realizada a Reação em Cadeia da Polimerase (PCR), utilizando-se os iniciadores S35 e S36 em 272 cães domiciliados no distrito da Vila Operária, cidade de Buerarema. Todos os animais foram avaliados clinicamente e, posteriormente, foram coletados 2,5 mL de sangue por punção venosa para realização do diagnóstico molecular. Nenhum dos animais apresentou manifestação clínica da doença e, em apenas dois foram identificados DNA do parasito. Esse resultado é o primeiro relato de infecção natural por T. cruzi em cães domésticos no sul baiano.

Risk factors and clinical disorders of canine ehrlichiosis in the South of Bahia, Brazil / Fatores de risco e alterações clínicas da erhlichiose canina no sul da Bahia, Brasil

The aim of this work was to study the clinical disorders and risk factors of canine ehrlichiosis in Ilhéus and Itabuna, Bahia, and compare different diagnostic methods. Blood samples were collected from 200 dogs. Each dog was clinically examined. A questionnaire was used to evaluate the risk factors. The blood samples were analyzed using the Dot-ELISA test; hematometry, platelet counts and searches for morulae on blood smears were performed. Nested PCR was carried out on 50 serologically positive samples and 50 negative samples. Three positive PCRs were sequenced. Thirty-six percent were serologically positivity and 5.5 percent from blood smears. The animals were anemic and thrombocytopenic. Presence of ticks and living in areas on the urban periphery were considered to be risk factors (p < 0.05). Nested PCR identified 11 positive dogs of which nine were serologically positive and two were negative. The DNA sequencing was consistent with the presence of Ehrlichia canis.

Objetivou-se com este trabalho estudar as alterações clínicas, fatores de risco da ehrlichiose canina nos municípios de Ilhéus e Itabuna, Bahia, e comparar diferentes métodos de diagnóstico. Amostras de sangue foram coletadas de 200 cães e cada animal foi examinado clinicamente. Foi preenchido um questionário para avaliar os fatores de risco. As amostras de sangue foram analisadas pelo teste Dot-ELISA e foram realizadas hematimetria, contagem de plaquetas e procura de mórulas em esfregaço de sangue. Nested-PCR foi realizada em 50 amostras positivas e 50 negativas na sorologia. Três amostras PCRs positivas foram seqüenciadas. Foi encontrado 36,0 por cento de positividade na sorologia e 5,5 por cento nos esfregaços sanguíneos. Os animais apresentavam anemia e trombocitopenia. Ter carrapatos e residir em áreas suburbanas foram considerados fatores de risco (p < 0,05). A Nested-PCR identificou 11 cães positivos, sendo 9 com sorologia positiva e 2 negativos. O sequenciamento de DNA foi compatível com a presença de Ehrlichia canis.