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J Immunol Methods ; 487: 112869, 2020 12.
Artigo em Inglês | MEDLINE | ID: mdl-32971119

RESUMO

Recombinant envelope protein-1 (E1) and E2 of Chikungunya virus (CHIKV) has been shown to elicit neutralizing antibodies and a balanced Th1/Th2 response in mice however with limited protection. Recently reported CHIK virus-like particles showed augmented immunity and protection in adult mice in comparison to E1 and E2, however exacerbated the disease in aged subjects. In order to improve the overall efficacy of protein based vaccines, novel strategies need to be adopted. The discovery of IgM Fc receptor (FcµR) and its role in humoral immune response led us to hypothesise that fusion of an antigen with Fc of IgM may enhance its immunogenicity by polymerizing it and FcµR mediated activation of B and other immune cells. We report in the current study, expression of E2 subunit of CHIKV in fusion with various IgM Fc domains/peptides in E. coli, their in-vitro refolding, characterization and immune response in C57BL/6 mice. Candidates fused with CH3-CH4 Fc fragment produced stable oligomers, whereas the one fused with peptides remained monomeric. The latter elicited a strong humoral and a balanced Th1/Th2 response in mice, whereas the polymeric candidate despite eliciting a strong humoral response, stimulated a biased Th1 response and exhibited higher virus neutralization in Vero cells.


Assuntos
Vírus Chikungunya/imunologia , Receptores Fc , Vacinas de Subunidades Antigênicas/farmacologia , Proteínas do Envelope Viral/farmacologia , Vacinas Virais/farmacologia , Animais , Anticorpos Neutralizantes/sangue , Vírus Chikungunya/genética , Chlorocebus aethiops , Escherichia coli/genética , Escherichia coli/imunologia , Escherichia coli/metabolismo , Feminino , Imunidade Humoral/efeitos dos fármacos , Imunização , Imunogenicidade da Vacina , Camundongos Endogâmicos C57BL , Conformação Proteica , Redobramento de Proteína , Receptores Fc/química , Receptores Fc/genética , Receptores Fc/imunologia , Proteínas Recombinantes de Fusão/química , Proteínas Recombinantes de Fusão/genética , Proteínas Recombinantes de Fusão/imunologia , Proteínas Recombinantes de Fusão/farmacologia , Relação Estrutura-Atividade , Equilíbrio Th1-Th2/efeitos dos fármacos , Vacinas de Subunidades Antigênicas/química , Vacinas de Subunidades Antigênicas/genética , Vacinas de Subunidades Antigênicas/imunologia , Células Vero , Proteínas do Envelope Viral/química , Proteínas do Envelope Viral/genética , Proteínas do Envelope Viral/imunologia , Vacinas Virais/química , Vacinas Virais/genética , Vacinas Virais/imunologia
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