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Mol Immunol ; 59(1): 79-90, 2014 May.
Artigo em Inglês | MEDLINE | ID: mdl-24491490

RESUMO

We have designed a 39 amino acid peptide mimic of the conformation-dependent main immunogenic region (MIR) of the Torpedo acetylcholine receptor (TAChR) that joins three discontinuous segments of the Torpedo α-subunit, α(1-12), α(65-79), and α(110 - 115) with two GS linkers: This 39MIR-mimic was expressed in E. coli as a fusion protein with an intein-chitin-binding domain (IChBD) to permit affinity collection on chitin beads. Six MIR-directed monoclonal antibodies (mAbs) bind to this complex and five agonist/antagonist site directed mAbs do not. The complex of MIR-directed mAb-132A with 39MIR has a Kd of (2.11±0.11)×10(-10)M, which is smaller than (7.13±1.20)×10(-10)M for the complex of mAb-132A with α(1-161) and about the same as 3.4×10(-10)M for that of mAb-132A with TAChR. Additionally, the 39MIR-IChBD adsorbs all MIR-directed antibodies (Abs) from an experimental autoimmune myasthenia gravis (EAMG) rat serum. Hence, the 39MIR-mimic has the potential to inactivate or remove pathogenic Torpedo MIR-directed Abs from EAMG sera and to direct a magic bullet to the memory B-cells that produce those pathogenic Abs. The hope is to use this as a guide to produce a mimic of the human MIR on the way to an antigen specific therapeutic agent to treat MG.


Assuntos
Proteínas de Peixes/imunologia , Peptídeos/imunologia , Receptores Colinérgicos/imunologia , Torpedo/imunologia , Sequência de Aminoácidos , Animais , Anticorpos Monoclonais/imunologia , Afinidade de Anticorpos/imunologia , Sequência de Bases , Sítios de Ligação/genética , Sítios de Ligação/imunologia , Western Blotting , Desenho de Fármacos , Proteínas de Peixes/química , Proteínas de Peixes/genética , Soros Imunes/imunologia , Modelos Moleculares , Mimetismo Molecular , Dados de Sequência Molecular , Miastenia Gravis/sangue , Miastenia Gravis/imunologia , Peptídeos/química , Peptídeos/genética , Ligação Proteica/imunologia , Estrutura Terciária de Proteína , Ratos , Receptores Colinérgicos/química , Receptores Colinérgicos/genética , Torpedo/genética
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