Assuntos
Melanócitos/patologia , Piebaldismo/patologia , Pigmentação da Pele/fisiologia , Pele/citologia , Linhagem da Célula , Pré-Escolar , Feminino , Humanos , Antígeno MART-1/metabolismo , Melanócitos/metabolismo , Fator de Transcrição Associado à Microftalmia/metabolismo , Piebaldismo/diagnóstico , Piebaldismo/genética , Proteínas Proto-Oncogênicas c-kit/genéticaAssuntos
Anticoagulantes/efeitos adversos , Calcinose/induzido quimicamente , Heparina/efeitos adversos , Lúpus Eritematoso Sistêmico/tratamento farmacológico , Dermatopatias/induzido quimicamente , Pele/efeitos dos fármacos , Idoso , Anticoagulantes/administração & dosagem , Biópsia , Calcinose/patologia , Heparina/administração & dosagem , Humanos , Doença Iatrogênica , Injeções Subcutâneas , Lúpus Eritematoso Sistêmico/diagnóstico , Masculino , Microscopia Eletrônica de Transmissão , Pele/ultraestrutura , Dermatopatias/patologiaRESUMO
BACKGROUND: Piebaldism is a pigmentary disorder characterized by a white forelock and depigmented patches. Although the loss-of-function mutations in the KIT gene underlie the disease, the intracellular dynamics of the mutant KIT are largely unknown. We herein report a Japanese family with piebaldism in which the affected members showed a mild phenotype. OBJECTIVE: The objective of this study is to investigate the functions and intracellular dynamics of the mutant KIT protein. METHODS: We performed genetic analyses of the KIT gene using peripheral blood cells. We analyzed the intracellular localization of the mutant KIT protein in HEK293T cells transfected with wild-type (Wt) and/or mutant KIT genes. Immunoprecipitation analyses, immunoblotting and immunofluorescence studies were performed using antibodies against KIT and downstream signaling proteins. Glycosidase digestion analysis was performed to clarify the intracellular localization of KIT protein. RESULTS: A genetic analysis revealed a novel heterozygous mutation c.645_650delTGTGTC which results in the in-frame deletion of Val216 and Ser217 in the extracellular domain of KIT. Immunoprecipitation analyses confirmed that the wild and mutant KIT formed a heterodimer after treatment with stem cell factor (SCF); however, the phosphorylation of the downstream signaling factors was decreased. In an immunofluorescence study, the mutant KIT accumulated predominantly in the endoplasmic reticulum (ER) and was sparsely expressed on the cell surface. A glycosidase digestion study revealed that the mutant KIT is predominantly localized in the ER. CONCLUSION: These data reveal an aberrant function and intracellular localization of mutant KIT protein in piebaldism.
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Piebaldismo/genética , Proteínas Proto-Oncogênicas c-kit/genética , Transdução de Sinais/genética , Fator de Células-Tronco/metabolismo , Adulto , Sequência de Bases/genética , Pré-Escolar , Análise Mutacional de DNA , Retículo Endoplasmático/metabolismo , Retículo Endoplasmático/patologia , Feminino , Células HEK293 , Heterozigoto , Humanos , Fenótipo , Fosforilação , Piebaldismo/sangue , Ligação Proteica , Dobramento de Proteína , Multimerização Proteica/genética , Proteínas Proto-Oncogênicas c-kit/metabolismo , Deleção de SequênciaAssuntos
Cicatriz/etiologia , Hemangiossarcoma/diagnóstico , Neoplasias Cutâneas/diagnóstico , Ferimentos e Lesões/complicações , Acidentes de Trânsito , Idoso , Amputação Cirúrgica , Pé , Hemangiossarcoma/etiologia , Hemangiossarcoma/patologia , Hemangiossarcoma/cirurgia , Humanos , Masculino , Pele/irrigação sanguínea , Pele/patologia , Neoplasias Cutâneas/etiologia , Neoplasias Cutâneas/patologia , Neoplasias Cutâneas/cirurgiaAssuntos
Displasia Ectodérmica/genética , Integrina beta4/genética , Biópsia , Pré-Escolar , Análise Mutacional de DNA , Displasia Ectodérmica/diagnóstico , Displasia Ectodérmica/patologia , Feminino , Testes Genéticos , Heterozigoto , Humanos , Mutação , Fenótipo , Índice de Gravidade de Doença , Pele/patologiaAssuntos
Neoplasias do Ânus/complicações , Deficiência de GATA2/complicações , Infecções Oportunistas/complicações , Papillomaviridae/isolamento & purificação , Neoplasias Cutâneas/complicações , Verrugas/complicações , Adulto , Neoplasias do Ânus/diagnóstico , Neoplasias do Ânus/patologia , Neoplasias do Ânus/virologia , Biópsia , Mutação da Fase de Leitura , Deficiência de GATA2/diagnóstico , Deficiência de GATA2/genética , Fator de Transcrição GATA2/genética , Humanos , Masculino , Infecções Oportunistas/diagnóstico , Infecções Oportunistas/patologia , Infecções Oportunistas/virologia , Sorotipagem , Índice de Gravidade de Doença , Pele/patologia , Pele/virologia , Neoplasias Cutâneas/diagnóstico , Neoplasias Cutâneas/patologia , Neoplasias Cutâneas/virologia , Verrugas/diagnóstico , Verrugas/patologia , Verrugas/virologiaAssuntos
Antineoplásicos/efeitos adversos , Toxidermias/diagnóstico , Ceratose/diagnóstico , Leucemia Mielogênica Crônica BCR-ABL Positiva/tratamento farmacológico , Terapia de Alvo Molecular/efeitos adversos , Inibidores de Proteínas Quinases/efeitos adversos , Pirimidinas/efeitos adversos , Administração Cutânea , Idoso , Antineoplásicos/uso terapêutico , Toxidermias/sangue , Toxidermias/tratamento farmacológico , Toxidermias/patologia , Feminino , Proteínas de Fusão bcr-abl/antagonistas & inibidores , Humanos , Ceratolíticos/administração & dosagem , Ceratolíticos/uso terapêutico , Ceratose/sangue , Ceratose/induzido quimicamente , Ceratose/tratamento farmacológico , Extremidade Inferior , Inibidores de Proteínas Quinases/uso terapêutico , Pirimidinas/uso terapêutico , Ácido Salicílico/administração & dosagem , Ácido Salicílico/uso terapêutico , Tronco , Extremidade SuperiorAssuntos
Eritema Endurado/microbiologia , Infecção por Mycobacterium avium-intracellulare/complicações , Idoso , Antituberculosos/uso terapêutico , Biópsia , Proteína C-Reativa/análise , Eritema Endurado/tratamento farmacológico , Feminino , Humanos , Infecção por Mycobacterium avium-intracellulare/tratamento farmacológico , Reação em Cadeia da Polimerase , Rifampina/uso terapêuticoAssuntos
Hanseníase Dimorfa/diagnóstico , Hanseníase Virchowiana/diagnóstico , Mycobacterium lepraemurium/isolamento & purificação , Pele/microbiologia , Adulto , Antibacterianos/uso terapêutico , Biópsia , Quimioterapia Combinada , Feminino , Glucocorticoides/uso terapêutico , Humanos , Hanseníase Dimorfa/tratamento farmacológico , Hanseníase Dimorfa/microbiologia , Hanseníase Dimorfa/patologia , Hanseníase Virchowiana/tratamento farmacológico , Hanseníase Virchowiana/microbiologia , Hanseníase Virchowiana/patologia , Mycobacterium lepraemurium/efeitos dos fármacos , Valor Preditivo dos Testes , Pele/efeitos dos fármacos , Pele/patologia , Resultado do TratamentoRESUMO
The precise mechanisms of tissue fibrosis have not yet been elucidated in systemic sclerosis (SSc). However, studies of the regulation of DNA methylation, the most widely studied epigenetic mechanism, have confirmed the involvement of the TET family proteins, recently identified DNA demethylases, in the pathogenesis of SSc. The mRNA levels of TET family members were compared in normal and SSc fibroblasts. The effects of hypoxia and siRNA specific to HIF-1α on TET expression were also examined. Global methylation status was analysed by LUMA. The presence of 5-hydroxymethylcytosine (5hmC) in SSc was examined by immunohistochemistry. The level of TET1 mRNA in SSc fibroblasts was elevated by 1.68 fold compared with that of normal fibroblasts, but the expression levels of TET2 and TET3 were comparable between both cell types. The expression levels of DNMT1 and DNMT3B mRNA have a tendency to elevate in SSc fibroblasts. Among TET family members, the expression of TET1 was exclusively induced by hypoxia via HIF-1α-independent pathways in SSc fibroblasts, but not in normal fibroblasts. The methylation level was decreased in SSc fibroblasts relative to normal fibroblasts, and 5hmC was present in dermal fibroblasts of skin sections from patients with SSc. TET1 expression in SSc fibroblasts was abnormally regulated in the hypoxic environment and accompanied by global DNA hypomethylation, suggesting the involvement of aberrant DNA methylation in the pathogenesis of SSc.