Frequência de imunofenótipos aberrantes em leucemias agudas: análise de 213 casos diagnosticados na Fundação Hemope / Frequency of aberrant immunophenotypes in acute leukemia: analysis of 213 cases diagnosed in Fundação Hemope

As leucemias agudas (LAs) são doenças clonais do tecido hematopoético caracterizadas por proliferação anômala de progenitores das diferentes linhagens. 0 diagnóstico das LAs se baseia em achados citomorfológicos, citoquimicos e imunofenotipicos em células da Medula Óssea (MO) e/ou Sangue Periférico (SP). Cerca de 30 a 50% das LMAs e LLAs, bem caracterizadas pelo imunofenótipo, exibem expressão de antigenos aberrantes e esta situação deve ser distinguida das leucemias bifenotipicas, que tem atualmente critérios de diagnóstico bem definidos. A detecção dos antígenos aberrantes não parece ter implicação prognóstica, mas é uma importante ferramenta para a detecção de doença residual mínima (DRM). 0 objetivo deste trabalho foi relatar a frequência de Fenótipos Aberrantes (FA) em LAs nos pacientes diagnosticados na Fundação Hemope, correlacionar este achado com a idade e identificar os antígenos aberrantes predominantes. 0 estudo contou com 213 pacientes de ambos os sexos e sem restric;:ao de faixa etária ou raça. A imunofenotipagem utilizou amostras de SP e/ou MO, sendo a análise realizada por citometria de fluxo multiparamétrica. Para as LMAs, LLAs BeLLAs T as frequências de FA encontradas foram de 47%, 40% e 52%, respectivamente. Os antígenos aberrantes predominantes foram CD? e CD56 para as LMAs e CD13 e CD33 para as LLAs. A frequência de antígenos aberrantes (45%) e a predominância de antígenos linfocitários T e NK na LMAs e de antígenos mielóides nas LLAs, condizem com a literatura. Por outro lado, o predomínio de FA entre os adultos parece sugerir mais uma caracteristica da amostra, onde esta faixa etária predominou, que uma caracteristica biológica das leucemias analisadas. Finalmente, este estudo, definindo melhor o perfil imunofenotipico de nossos pacientes, possibilita o uso deste conhecimento na avaliação de DRM.

Acute leukemias (AL) are clonal diseases of the hematopoietic tissue characterized by anomalous proliferation of precursors of different lineage. The diagnosis of AL is based on morphological, citochemical and immunophenotypical findings in cells of Bone Marrow (BM) and/or Peripheral Blood (PB). About 30 to 50% of AML and ALL, well-characterized by immunophenotype, display aberrant expression of antigens and this situation should be distinguished from biphenotipic leukemias, which are currently well-defined criteria for diagnosis. The detection of aberrant antigen does not seem to have prognostic implication, but it is an important tool for the detection of minimal residual disease (MRD). The objective of this study was to report the frequency of aberrant phenotypes (AP) at AL in patients diagnosticated by Funda9iio Hemope, correlate this finding with age and identify the predominant aberrant antigens. The study included 213 patients of both genders and without restriction of age or race. The immunophenotyping used samples of PB and/or BM, being the analysis by multiparametric flow cytometry. For AML, B-ALL and T-ALL the frequencies of FA found were 47%, 40% and 52% respectively. The predominant aberrant antigens for AML were CD7 and CD56 and for ALL were CD33 and CD13. The frequency of aberrant antigens (45%) and the predominance of lymphocyte T and NK antigens in AML and myeloid antigens in ALL, matches with the literature. Moreover, the prevalence of AP among adults, who are the predominant age group, seems to be more suggestive of a characteristic of the sample, than a biological feature of leukemias that were analyzed. Finally, this study, defines better the immunophenotypical profile of our patients and allows the use of this knowledge in the evaluation.

Flow cytometry protocol to evaluate ionizing radiation effects on P-glycoprotein activity

The aim of this work was to establish a protocol to evaluate ionizing radiation effects on P-glycoprotein (P-gp) activity. For this, human peripheral blood samples were irradiated in vitro with different doses and P-gp activity was analyzed for CD4 and CD8 T lymphocytes through rhodamine123-efflux assay by flow cytometry. By simultaneous employment of percentage and mean fluorescence index parameters, subject-by-subject analysis pointed out changes in P-gp activity for some individuals and irradiated samples. Based on this work, the proposed protocol was considered adequate for evaluating P-gp activity on cells after radioactive stress. Besides, this research suggests that P-gp activity could be an important factor to define patient-specific protocols in combined chemo-and radiotherapy, particularly when radiation exposure precedes chemical treatment.

O objetivo deste trabalho foi estabelecer um protocolo para avaliar o efeito da radiação ionizante na atividade da glicoproteína-P (gp-P). Para isto, amostras de sangue periférico humano foram irradiadas in vitro com diferentes doses, e a atividade da gp-P foi analisada para os linfócitos T CD4 e CD8 através do ensaio do efluxo da rodamina123 por citometria de fluxo. Por emprego simultâneo dos parâmetros de porcentagem e índice médio de fluorescência, a análise indivíduo por indivíduo apontou mudanças na atividade da gp-P para alguns indivíduos e amostras irradiadas. Com base neste trabalho, o protocolo proposto foi considerado adequado para avaliar a atividade da gp-P em células após estresse radioativo. Além disso, esta pesquisa sugere que a atividade da gp-P poderia ser um importante fator para definir protocolos paciente-específicos envolvendo quimio e radioterapia, particularmente quando a exposição à radiação precede o tratamento químico.