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Anal Biochem ; 612: 114021, 2021 01 01.
Artigo em Inglês | MEDLINE | ID: mdl-33189704

RESUMO

We developed a binary vector co-expressing firefly luciferase (FF) and Renilla luciferase (REN) to detect protein stability in response to different stimuli, and verified the functionality of the vector. The StrigoQuant-like reporter expressing FF and REN in one transcript is a sensitive tool for detecting protein abundance in different genotypes. However, we found that significant differences in the relative FF/REN ratio of empty StrigoQuant vector in different genotypes. Therefore, to determine the actual protein abundance, the relative FF/REN ratio of the protein of interest should be normalized to that of the empty vector.


Assuntos
Bioensaio/métodos , Genes Reporter , Luciferases/metabolismo , Estabilidade Proteica , Proteínas de Arabidopsis/genética , Proteínas de Arabidopsis/metabolismo , Vetores Genéticos , Compostos Heterocíclicos com 3 Anéis/farmacologia , Indicadores e Reagentes/química , Lactonas/farmacologia , Luciferases de Vaga-Lume/genética , Luciferases de Renilla/genética , Oryza/metabolismo , Reguladores de Crescimento de Plantas/genética , Reguladores de Crescimento de Plantas/metabolismo , Folhas de Planta/metabolismo , Protoplastos/metabolismo , Nicotiana/metabolismo
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