RESUMO
Hypoxia is a common medical problem, sometimes difficult to detect and caused by different situations. Control of hypoxia is of great medical importance and early detection is essential to prevent life threatening complications. However, the few current methods are invasive, expensive, and risky. Thus, the development of reliable and accurate sensors for the continuous monitoring of hypoxia is of vital importance for clinical monitoring. Herein, we report an implantable sensor to address these needs. The developed device is a low-cost, miniaturised implantable electrochemical sensor for monitoring hypoxia in tissue by means of pH detection. This technology is based on protonation/deprotonation of polypyrrole conductive polymer. The sensor was optimized in vitro and tested in vivo intramuscularly and ex vivo in blood in adult rabbits with respiration-induced hypoxia and correlated with the standard device ePOCTM. The sensor demonstrated excellent sensitivity and reproducibility; 46.4 ± 0.4 mV/pH in the pH range of 4-9 and the selectivity coefficient exhibited low interference activity in vitro. The device was linear (R2 = 0.925) with a low dispersion of the values (n = 11) with a cut-off of 7.1 for hypoxia in vivo and ex vivo. Statistics with one-way ANOVA (α = 0.05), shows statistical differences between hypoxia and normoxia states and the good performance of the pH sensor, which demonstrated good agreement with the standard device. The sensor was stable and functional after 18 months. The excellent results demonstrated the feasibility of the sensors in real-time monitoring of intramuscular tissue and blood for medical applications.
Assuntos
Acidose , Polímeros , Animais , Hipóxia/diagnóstico , Pirróis , Coelhos , Reprodutibilidade dos TestesRESUMO
Mantle-cell lymphoma (MCL) is genetically characterized by the translocation t(11;14)(q13;q32) and a high number of secondary chromosomal abnormalities. To identify genes inactivated in this lymphoma, we examined 5 MCL cell lines following a strategy previously described in tumors with microsatellite instability that is based on the combined inhibition of the nonsense-mediated mRNA decay pathway and gene-expression profiling. This approach, together with the design of a conservative algorithm for analysis of the results, allowed the identification of 3 genes carrying premature stop codons. These genes were p53 with a mutation previously described in JEKO-1, the leukocyte-derived arginine aminopeptidase (LRAP) gene in REC-1 that showed a new splicing isoform generating a premature stop codon, and RB1 in UPN-1 that contained an intragenic homozygous deletion resulting in a truncated transcript and total loss of protein expression. The new LRAP isoform was detected also in 2 primary MCLs, whereas inactivating intragenic deletions of RB1 were found in the primary tumor from which UPN-1 was derived and 1 additional blastoid MCL. These tumors carried a concomitant inactivation of p53, whereas p16INK4a was wild type. These results indicate for the first time that RB1 may be inactivated in aggressive MCL by intragenic deletions.
Assuntos
Códon sem Sentido , Inativação Gênica , Linfoma de Célula do Manto/genética , Análise em Microsséries , RNA Mensageiro/metabolismo , Proteína do Retinoblastoma/genética , Algoritmos , Linhagem Celular Tumoral , Proteínas do Esmalte Dentário/genética , Perfilação da Expressão Gênica , Humanos , Isoformas de Proteínas , Proteína Supressora de Tumor p53/genéticaRESUMO
Se describen los estimadores puntuales y por intervalos de confianza (IC) de la riqueza y del índice de Shannon; se aplican a un ejemplo con datos de vegetación y a otro con conteo de aves, y se comparan los resultados obtenidos sobre la base de simulaciones originales y de consideraciones teóricas. Se ofrecen recomendaciones para la aplicación de la técnica de remuestreo adecuada, con énfasis en casos de muestras pequeñas o sin repeticiones. Se orienta también en el uso del software disponible
Assuntos
Aves , Ecossistema , Árvores , EcologiaRESUMO
El conocimiento de la energía involucrada en las interacciones célula-célula tiene importantes implicaciones en las ciencias biológicas y médicas. Los glóbulos rojos se adhieren entre si cuando macromoléculas específicas o no específicas (aglutininas) enlazan células adyacentes de manera irreversible o reversible. La técnica de la cámara de flujo fue utilizada para evaluar la afinidad de un anticuerpo monoclonal analizando la disociación de un doblete (dos células aglutinadas por el anticuerpo) determinando la energía de adhesión. Esta técnica permite aplicar una tensión de corte uniforme paralela a la interfase de adhesión de un aglutinado de dos células fijado sobre la superficie inferior de un microcanal. La tensión produce el desprendimiento progresivo de la célula superior del doblete. La observación microscópica de la separación producida en el aglutinado aislado y la obtención de imágenes secuenciales con una cámara CCD (Charged Coupled Device), permite determinar la relación entre la tensión de corte aplicada (sigma) y el porcentaje de separación de las células del doblete. A partir de estos resultados calculamos la energía de disociación por unidad de área membranal adherida(gamma d), valor igual a 8.92 x 10 elevado a -19 N.cm por moléculas de anticuerpo. Del análisis de los resultados, se concluye que la tensión de corte necesaria para disociar el doblete es proporcional a la densidad superficial de moléculas de anticuerpo y a la densidad antigénica de los eritrocitos.
Assuntos
Anticorpos Monoclonais , Agregação Eritrocítica/fisiologia , Agregação Eritrocítica/imunologia , Hemaglutinação/imunologia , Comunicação Celular/fisiologia , Comunicação Celular/imunologia , Testes de Hemaglutinação , Hemaglutininas/análiseRESUMO
La aglutinación inmunológica es la consecuencia de la reacción Ag-Ac que adhiere eritrocitos adyacentes. Los anticuerpos se fijan a los sitios antigénicos distribuidos sobre la superficie de la membrana eritrocitaria, actuando como anclajes moleculares para unir células adyacentes y formas aglutinadas. Una pequeña cantidad de energía es disipada durante la reacción. Si se suministra una cantidad de trabajo mecánico equivalente a la energía disipada, los aglutinatos pueden ser disociados. El trabajo mecánico es realizado por tensiones de corte generadas en un viscosímetro de tipo Couette. Se propone una nueva técnica que utiliza la retrodifusión de un haz láser para analizar la cinética de disociación de aglutinatos eritrocitarios inmunológicos, producida por cizallamiento de los aglutinatos en suspensión. La intensidad del láser, retrodifundida, aumenta en la medida que los aglutinatos son disociados por corte. El registro de la intensidad retrodifundida suministra una curva de disociación que es ajustada por una ecuación exponencial. Los parámetros que caracterizan esta ecuación muestran una buena correlación con la potencia de la aglutinación. La integración numérica de las curvas de disociación conduce a la obtención de un parámetro ED que estima la energía intercambiada en el proceso de disociación y, en consecuencia, la constante de afinidad.