Functional Recovery Caused by Human Adipose Tissue Mesenchymal Stem Cell-Derived Extracellular Vesicles Administered 24 h after Stroke in Rats.

Ischemic stroke is a major cause of death and disability, intensely demanding innovative and accessible therapeutic strategies. Approaches presenting a prolonged period for therapeutic intervention and new treatment administration routes are promising tools for stroke treatment. Here, we evaluated the potential neuroprotective properties of nasally administered human adipose tissue mesenchymal stem cell (hAT-MSC)-derived extracellular vesicles (EVs) obtained from healthy individuals who underwent liposuction. After a single intranasal EV (200 µg/kg) administered 24 h after a focal permanent ischemic stroke in rats, a higher number of EVs, improvement of the blood-brain barrier, and re-stabilization of vascularization were observed in the recoverable peri-infarct zone, as well as a significant decrease in infarct volume. In addition, EV treatment recovered long-term motor (front paws symmetry) and behavioral impairment (short- and long-term memory and anxiety-like behavior) induced by ischemic stroke. In line with these findings, our work highlights hAT-MSC-derived EVs as a promising therapeutic strategy for stroke.

Aqueous wheat extract (Triticuma estivum) prevents carboplatin-induced myelosuppression and oxidative stress in Wistar rats / Extrato aquoso de trigo (Triticum aestivum) na prevenção da mielossupressão e estresse oxidativo induzidos pela carboplatina em ratos Wistar

ABSTRACT: The present study aimed to evaluate the use of aqueous wheat extracts as an adjunct to antineoplastic therapy with carboplatin. In this study, 32 rats were used which were randomly distributed into 4 groups: G1 - negative control; G2 - control treated with physiological solution; G3 - animals treated with aqueous extract of wheat in the concentration of 100mg/kg; G4 - animals treated with aqueous wheat extract at the concentration of 400mg/kg; 300mg/m² of carboplatin was administered intraperitoneally at day 0 in animals from groups G2, G3, and G4, whereas 1ml of physiological solution was administered by the same route in animals from group G1. Animals were treated daily for 21 days by orogastric gavage according to their respective experimental group. Blood was collected from animals on days 3, 7 and 21 for complete blood count (CBC), biochemistry, and measurement of paraoxonase 1 (PON1) activity. On day 21, animals were euthanized and necropsied. Promising results were obtained regarding oxidative balance in groups G3 and G4. Both presented better PON1 activity in comparison with group G2 (P<0.05). Total leukocyte count of group G4 differed significantly from group G2 (P<0.05) on day 21. Myelogram values of animals from groups G3 and G4 were ​​similar to those from G1; animals from G3 had lower numbers of promyelocytes and increased numbers of erythrocytes and rubriblasts than animals from G2 (P<0.05). In the present experimental study, aqueous wheat extract was safe at the doses used in the animals, and was an effective treatment for myelosuppression and for the prevention of an excessive release of free radicals induced by carboplatin.

RESUMO: O presente estudo avaliou a utilização dos extratos aquosos de trigo como adjuvante a terapia antineoplásica com carboplatina. No estudo foram utilizadas 32 ratas, as quais foram aleatoriamente distribuídas em quatro grupos: G1 - controle negativo; G2 - controle tratado com solução fisiológica; G3 - tratado com extrato aquoso de trigo na concentração de 100mg/kg; G4 - tratado com extrato aquoso de trigo na concentração de 400mg/kg. Administrou-se 300mg/m² de carboplatina por via intraperitoneal no dia 0 nos grupos G2, G3, e G4, enquanto no G1 foi administrado 1mL de solução fisiológica pela mesma via. Os animais foram tratados diariamente durante 21 dias por gavagem orogástrica de acordo com seu respectivo grupo experimental. Foi coletado sangue dos animais nos dias três, sete e 21, para realização de hemograma, testes bioquímicos e mensuração da atividade da paraoxanase 1 (PON1). No dia 21 os animais foram eutanasiados e realizada coleta de medula óssea, rim e fígado. Foram observados resultados promissores com relação ao balanço oxidativo no G3 e G4, pois ambos apresentaram melhor atividade da PON1 em relação ao G2 (P<0,05). Além disso, foi constatado que os mesmos grupos apresentaram contagem de leucócitos totais superiores ao G2 durante todo o período experimental, com G4 diferindo significativamente do G2 (P<0,05) no dia 21. Os mielogramas dos animais do G3 e G4 apresentaram valores análogos ao G1, sendo que o G3 apresentou menor contagem de promielócitos e maior de células eritroides e rubroblastos que o G2 (P<0,05). Nas condições experimentais deste estudo os extratos aquosos de trigo mostraram-se seguros nas doses utilizadas e úteis no tratamento da mielossupressão e liberação excessiva de radicais livres induzidas pelo fármaco carboplatina.

Decanoato de nandrolona no hemograma e nas células mononucleares da medula óssea de ratos Wistar hígidos / Nandrolone decanoate in the hemogram and bone marrow mononuclear cells of healthy Wistar rats

O decanoato de nandrolona (DN), um estimulante do sistema hematopoético, caracteriza-se por ser um medicamento acessível aos proprietários de animais com escassos recursos econômicos. Assim, este estudo objetivou avaliar o efeito de diferentes doses do DN no hemograma e na quantificação e a viabilidade das células mononucleares (CM) da medula óssea (MO), juntamente com a marcação das células hematopoéticas CD34+ de ratos Wistar saudáveis. Para isso, 48 animais foram separados em seis tratamentos, de forma aleatória, com oito animais cada. Os grupos foram constituídos por: G1 - controle (solução fisiológica); G2 - controle diluente (somente veículo oleoso de origem vegetal); G3 - 0,42mg kg-1 de DN; G4 - 1,8mg kg-1 de DN; G5 - 4,6mg kg-1 de DN; e G6 - 10,0mg kg-1 de DN. O fármaco foi aplicado semanalmente por três semanas. Os parâmetros hematológicos e medulares avaliados não tiveram diferença significativa entre os grupos, o que pode ter sido influenciado pela condição da MO ou pelo intervalo entre as doses. De acordo com os resultados obtidos e nas condições em que esta pesquisa foi desenvolvida, pode-se concluir que o DN não altera o hemograma, a quantificação e a viabilidade das CM e a marcação de CD34+ em ratos wistar saudáveis.

Nandrolone Decanoate (ND), a hematopoietic system stimulant, is characterized as an accessible medicament for low-income pet owners. The aim of this research is to study the effect of different ND doses in the blood cytological parameters and the quantification and viability of the bone marrow (BM) mononuclear cells (MC), together with the labeling of CD34+ hematopoietic stem cells of healthy Wistar rats. Forty eight animals were randomly separated into six different groups of treatment, each composed of eight animals. These groups were divided in: G1 - control group (physiologic solution); G2 - diluent control (only vegetal oily vehicle); G3 - ND 0.42mg kg-1; G4 - ND 1.8mg kg-1; G5 - ND 4.6mg kg-1 and G6 - ND 10.0mg kg-1. The drug was weekly applied for three weeks. The hematologic and medullar analyzed parameters showed no significant difference between the groups, which may have been influenced by the BM conditions or by the applications frequency. According to the results obtained and according to the conditions under which this research was developed, it can be concluded that ND did not affect the blood cytological parameters, quantification and viability of MC and CD34+ labeling in healthy Wistar rats.

Colheita de medula óssea em cães: modelo para obtenção da fração total de células mononucleares / Bone marrow harvest in dogs: model for acquisition of the total fraction of mononuclears cells

No presente trabalho foi elaborada uma técnica para protocolo de colheita de medula óssea (MO) (10ml. kg-1), do osso femoral, para isolamento, quantificação e viabilidade da fração total de células mononucleares (CM). Para tanto, 40 cães machos ou fêmeas, sem raça definida, com idade aproximada de dois anos, pesando em torno de 10kg, foram submetidos a procedimento asséptico em ambiente cirúrgico para colheita de MO. Para a obtenção de uma quantidade suficiente de CM, durante o procedimento foi utilizada a agulha tipo Steis anatômica, que favoreceu a colheita de volume sangüíneo em menor espaço de tempo e não danificou a viabilidade celular. Também foi utilizado o Kit Bone Marrow collection, que teve a finalidade de filtrar as espículas ósseas, mantendo a integridade das CM colhidas durante o período decorrido para o acondiconamento do sangue. Durante o período da colheita de MO, os animais foram submetidos à collheita de sangue periférico (pré, trans e pós-operatório) para avaliações hematológicas e sofreram autotransfusão sangüínea para suprir a queda acentuada de hemoglobina ocorrida nos primeiros momentos da coletaheita. O total de MO colhida e filtrada foi colocado lentamente sob gradiente de densidade Histopaque (1.077g ml-1). O material foi centrifugado a 440 x g por 30 minutos e o anel de células foi colhido, lavado e centrifugado três vezes em meio contendo solução salina 0,9 por cento, DMEM e soro sangüíneo autólogo estéril. Foi realizada a contagem do anel celular em câmara de Neubauer e foi verificada sua viabilidade utilizando corante vital. Neste estudo foi verificado que no volume de MO colhido foi possível obter a média de 2,57 x 10(6) (± 1,56) CM kg-1 e a viabilidade celular foi superior a 90 por cento (96,72 ± 2,9 por cento). Conclui-se que a técnica de colheita de MO com agulha Steis com lavagem celular no meio contendo soro autólogo e Kit Bone Marrow e agulha Steis com lavagem celular no meio contendo...

In the present research a new protocol to harvest 10ml kg-1 femoral bone marrow (BM) was developed to allow isolation, quantification and to test the mononuclear cell (MC) fraction viability. Forty male or female stray dogs, aging and weighting around two years old and 10kg respectively, were submitted to aseptic bone marrow harvest in a surgical environment. To achieve an ideal cell count of MC, an anatomical Steis needle was used during the procedure, which favored the indicated volume harvest in a shorter period of time without interfering cellular viability. A bone marrow collection kit was also used to filter bone fragments while maintaining harvested MC integrity during blood packaging. Meanwhile BM harvesting was conducted, animals peripheral blood collection was performed (pre, trans and post-operatory) to hematological evaluations and autologous blood transfusion was made to overcome the increased hemoglobin fall that takes place in the initial harvesting moments. The harvested and filtered BM was slowly placed over a Histopaque density gradient (1.077g ml-1). The material was centrifuged at 440g x for 30 minutes. The cellular ring was harvested, washed and three times centrifuged in saline 0.9 percent, DMEM and autologous sterile serum. Cellular ring count was conducted in neubauer chamber and its viability was performed with vital dye. In this study was possible to notice that with the harvested BM volume an average of 2.57 x 10(6) (± 1.56) MC kg-1 was obtained and the cell viability was over 90 percent (96.72 ± 2.9 percent). It was concluded that the bone marrow kit and Steis needle with autologous serum cellular wash BM harvesting technique allow an ideal MC number isolation which can be administered in tissue lesions to enhance the regeneration process.

Reticulócitos e hematócrito de cães pré e pós esplenectomia parcial / Reticulocytes and hematocrit of dogs before and after partial splenectomy

Os reticulócitos são células eritróides que exibem RNA residual e são liberados da medula óssea em resposta à hipoxia tecidual. Após sua liberação da medula óssea, ficam temporariamente seqüestrados no baço, onde adquirem forma de eritrócitos maturos. Além disso, o baço também é responsável pelo armazenamento do sangue e seus elementos. A esplenectomia é indicada para casos de torção ou ruptura esplênica, esplenomegalia sintomática e massas esplênicas. Este estudo tem como objetivo avaliar a resposta dos reticulócitos e do hematócrito em cães submetidos à remoção parcial do baço. Para isso, foram utilizados nove cães, sem raça definida, machos e fêmeas. As coletas foram feitas uma hora antes e 48, 96, 144 e 168 horas após o procedimento cirúrgico. Os resultados demonstraram que o hematócrito diminuiu significativamente após a esplenectomia parcial. O valor máximo de reticulócitos foi alcançado 96 horas após a cirurgia, a partir daí houve um declínio na quantidade de reticulócitos na corrente sangüínea, permanecendo, porém, em número superior à condição pré-esplenectomia parcial.

The reticulocytes are erythroid cells that exhibit residual RNA, being released from bone marrow by erythropoietin stimulus in response to tissue hypoxia. After its release from bone marrow, they are temporarily sequestred in the spleen, where they acquire form of mature erythrocytes. Besides, the spleen is also responsible for storage of the blood and their elements. The splenectomy is indicated in cases of splenic torsion or rupture, symptomatic splenomegaly, and splenic masses. This study aimed to evaluate the response of reticulocytes and of hematocrit in dogs submitted to partial splenectomy. Nine mongrel males and female dogs were used. The samples were obtained one hour before the surgery and 48, 96, 144 and 168 hours after this procedure. The findings demonstrated that the hematocrit decreases significantly after the partial splenectomy. Highest values reticulocytes were reached 96 h after the surgery, followed by a decline in number, nevertheless, the counting was higher than moments before of the partial splenectomy.