RESUMO
Activation-associated secreted proteins (ASP) of nematodes have been studied as potential vaccine components. In this study we report the cloning and analysis of cDNA and genomic sequences of Cooperia punctata and establish the presence of two 75% identical ASP-1 genes in C. punctata. Additional C. punctata ASP paralogues were shown to be present. Analysis of PCR products amplified from genomic DNA from a pool of worms revealed extensive sequence diversity within this family of proteins, reflecting the presence of different ASP paralogues in a single worm as well as extensive polymorphisms between different worms. ASP proteins contain a conserved region called the sperm-coating protein (SCP) domain of unknown function, which is present as a single copy in proteins from yeast and a wide range of multi-cellular organisms. Only in three nematodes has a protein composed of duplicated SCP-domains been identified. C. punctata is the first organism in which at least two such genes are found. Database searches identified similarity of the C-terminal cysteine-rich domain of ASP proteins to a nematode metallothionein motif. Cp-asp-1b was expressed in Escherichia coli and both the N-terminal and C-terminal domain were shown to be recognized by sera of C. punctata infected bovines. The description of the asp gene family of C. punctata provides the basis for more detailed studies into the extent of variation and immunological recognition of this family that may assist in rational vaccine design.
Assuntos
Doenças dos Bovinos/parasitologia , Proteínas de Helminto/genética , Trichostrongyloidea/genética , Tricostrongiloidíase/veterinária , Sequência de Aminoácidos , Animais , Sequência de Bases , Western Blotting , Bovinos , DNA Complementar/genética , Ensaio de Imunoadsorção Enzimática , Escherichia coli/genética , Proteínas de Helminto/metabolismo , Proteínas de Helminto/fisiologia , Dados de Sequência Molecular , Filogenia , Reação em Cadeia da Polimerase , RNA de Helmintos/genética , RNA de Helmintos/metabolismo , Técnica de Amplificação ao Acaso de DNA Polimórfico , Proteínas Recombinantes/genética , Proteínas Recombinantes/metabolismo , Reação em Cadeia da Polimerase Via Transcriptase Reversa , Homologia de Sequência do Ácido Nucleico , Trichostrongyloidea/metabolismo , Trichostrongyloidea/fisiologia , Tricostrongiloidíase/parasitologiaRESUMO
In vitro tests were carried out to verify the activity of 26 Brazilian isolates of predatory fungi of the genus Arthrobotrys on a free-living nematode (Panagrellus sp.) and on infective larvae of Cooperia punctata, a parasitic gastrointestinal nematode of cattle. The results showed that the free-living nematode Panagrellus sp. was the most preyed upon, compared to C. punctata, for all the fungal treatments. Also, variable predatory capacity was observed for different fungal isolates belonging to the same genus when applied to different nematode species
Assuntos
Animais , Bovinos , Técnicas In Vitro , Fungos Mitospóricos/patogenicidade , Nematoides/microbiologia , Larva , Fungos Mitospóricos/isolamento & purificação , Controle Biológico de VetoresRESUMO
In vitro tests were carried out to assess the activity of 26 Brazilian isolates of predatory fungi of the genus Arthrobotrys on a free-living nematode (Panagrellus sp.) and on infective larvae of Haemonchus placei, a parasitic gastrointestinal nematode of cattle. The results showed that the free-living nematode Panagrellus sp. was the most preyed upon, compared to H. placei, for all the fungal treatments. Also, variable predatory capacity was observed for different fungal isolates belonging to the same genus when applied to different nematode species
Assuntos
Animais , Bovinos , Técnicas In Vitro , Fungos Mitospóricos/patogenicidade , Nematoides/microbiologia , Brasil , Haemonchus/microbiologia , Fungos Mitospóricos/isolamento & purificação , Comportamento PredatórioRESUMO
Dois grupos de cinco bezerros, das raças Holandesa e Nelore, com idade aproximada de nove meses, receberam por via oral uma dose única de 1.000 larvas infectantes (L3) por kg de peso corporal de Haemonchus placei. Os animais foram mantidos sob observaçäo clínica após a infecçäo. Amostras de sangue foram coletadas semanalmente por punçäo venosa, desde uma semana antes, até a oitava semana pós-infecçäo. Os estudos hematológicos abrangeram hematócrito, contagem diferencial de leucócitos, determinaçöes de hemoglobina, fibrinogênio e proteínas plasmáticas. Os exames parasitológicos compreenderam exames de fezes semanais com contagem de ovos (OPG) e estimativa de cargas de vermes na necropsia. Amostras de tecido da mucosa do abomaso foram submetidos a estudos histopatológicos. Ambos os grupos mostraram números crescentes de OPG após a quinta semana, sendo que os bezerros de raça Holandesa apresentaram maiores contagens do que os da raça Nelore. Na terceira semana pós-infecçäo e até o final do experimento, os bezerros da raça Holandesa tiveram anemia e hipoproteinemia, enquanto que os bezerros Nelore näo apresentaram alteraçöes significativas desses parâmetros. A necropsia, os bezerros da raça Holandesa apresentaram uma carga de vermes significativamente maior dos que os da raça Nelore. As alteraçöes patológicas visíveis e lesöes histopatológicas foram similares, embora macroscopicamente fossem levemente mais evidentes na raça Holandesa. Estes resultados demonstram que bezerros da raça Holandesa säo mais susceptíveis à infecçäo e aos efeitos patogênicos de H. placei do que bezerros da raça Nelore