RESUMO
In December 2011, we reported an autochthonous case of Echinococcus multilocularis infection in a 42-year-old woman in Korea. The diagnosis was based on histopathological findings of the surgically resected liver cyst. In the present study, we evaluated the serological and molecular characteristics of this Korean E. multilocularis case. The patient's serum strongly reacted with affinity-purified native Em18 and recombinant Em18 antigens (specific for E. multilocularis) but negative for recombinant antigen B8/1 (reactive for Echinococcus granulosus). In immunoaffinity chromatography, the serum also strongly reacted with E. multilocularis and only weakly positive for E. granulosus. We determined the whole nucleotide sequence of cox1 (1,608 bp) using the paraffin-embedded cystic tissue which was compared with E. multilocularis isolates from China, Japan, Kazakhstan, Austria, France, and Slovakia. The Korean case showed 99.8-99.9% similarity with isolates from Asia (the highest similarity with an isolate from Sichuan, China), whereas the similarity with European isolates ranged from 99.5 to 99.6%.
Assuntos
Anticorpos Anti-Helmínticos/sangue , Antígenos de Helmintos/imunologia , Equinococose Hepática/imunologia , Echinococcus multilocularis/imunologia , Adulto , Animais , Antígenos de Helmintos/genética , Antígenos de Helmintos/metabolismo , Sequência de Bases , Equinococose Hepática/parasitologia , Equinococose Pulmonar/diagnóstico , Equinococose Pulmonar/genética , Equinococose Pulmonar/imunologia , Echinococcus granulosus/genética , Echinococcus granulosus/imunologia , Echinococcus multilocularis/genética , Echinococcus multilocularis/isolamento & purificação , Complexo IV da Cadeia de Transporte de Elétrons/genética , Feminino , Humanos , Mitocôndrias/genética , Dados de Sequência Molecular , República da Coreia , Análise de Sequência de DNARESUMO
Introducción: Se ha descrito variabilidad ambiental de Echinococcus granulosus (Eg). Se han reportado 10 genotipos y cierta heterogenicidad intergenotipo en estudios con material proveniente de animales. El objetivo de este estudio es describir los resultados de un protocolo de genotipificación de Eg en muestras de hidatidosis humana. Material y método: Estudio de corte transversal. Se recolectó el líquido hidatídico de una muestra consecutiva de pacientes intervenidos quirúrgicamente por hidatidosis hepática y pulmonar en hospitales de Temuco entre julio de 2004 y septiembre de 2005. Se diseñó un protocolo de extracción de ADN para Eg en muestras homogeneizadas de aspirado de quistes hidatídicos. Se emplearon 2 sistemas de reacción de polimerasa en cadena (PCR): PCREg9 y PCREg16; ambos en concentraciones de MgCl2 al 2mM. Para PCREg9, se utilizaron los primers Eg9F y Eg9R a concentraciones de 0.5 mM, empleándose 35 ciclos con temperatura de hibridación a 60°C. Para PCREg16 se utilizaron los primers Eg16F y Eg16R a concentraciones de 0,5 mM, empleándose 35 ciclos con temperatura de hibridación a 65°C. Los productos de las PCR fueron digeridos con una enzima de restricción (Rsa1) para la discriminación de los genotipos. Resultados: Se analizaron 25 muestras, 4 provenientes de quistes pulmonares y 21 de quistes hepáticos. Se logró amplificación de Eg en 22 de 25 muestras (88 por ciento). La digestión enzimática reveló la presencia de 3 genotipos posibles: en 21 de 22 muestras (95,45 por ciento) se observó un patrón de restricción correspondiente a los genotipos G1 ó G7 y en la muestra restante a los genotipos G4 ó G7. Conclusión: Con los sistemas de PCR empleados se detectó ADN de Eg.
Assuntos
Masculino , Adulto , Humanos , Animais , Feminino , DNA , Echinococcus/genética , Equinococose Hepática/genética , Equinococose Pulmonar/genética , Reação em Cadeia da Polimerase/métodos , Estudos Transversais , Genótipo , Biologia Molecular , Técnicas de Amplificação de Ácido Nucleico , Especificidade da EspécieRESUMO
Se denomina Hidatidosis a la zoonosis parasitaria que causa la infección de herbívoros o del hombre con el estado larval (hidátide) de parásitos del género Echinococcus. Objetivo: Revisión del tema y presentación del primer caso en Chile estudiado mediante técnicas de biología molecular. Caso Clínico: Preescolar de 3 años 9 meses procedente de Punta Arenas portadora de una hidatidosis múltiple de 6 quistes (4 pulmonares y 2 hepáticos), trasladada a la V Región para su tratamiento. Se realizó 3 cirugías y tratamiento médico asociado (Albendazol en dosis de 15 mg/kg/día vía oral) durante 73 días. Las hidátides extraídas fueron medidas, se efectuó estudio de fertilidad y vitalidad e identificación de cepa de Echinococcus granulosus mediante técnicas de biología molecular. La paciente mostró notable mejoría clínica e imagenológica, y mantuvo serología positiva. El tratamiento fue bien tolerado no presentando reacciones adversas. El tamaño de las hidátides fluctuó entre 6 y 11 cm de diámetro, todas fueron fértiles y vitales en diferente porcentaje y en todas se identificó cepa oveja de E. granulosus. De regreso en Punta Arenas, a los 4 meses se le detecta una nueva hidátide hepática que fue extirpada. El complejo manejo de este caso resultó exitoso.
Assuntos
Humanos , Feminino , Pré-Escolar , Equinococose Hepática/diagnóstico , Equinococose Hepática/terapia , Equinococose Pulmonar/diagnóstico , Equinococose Pulmonar/terapia , Albendazol/uso terapêutico , Chile , Ensaio de Imunoadsorção Enzimática , Echinococcus/isolamento & purificação , Equinococose Hepática/genética , Equinococose Pulmonar/genética , Técnicas de Diagnóstico Molecular , Reação em Cadeia da Polimerase , Resultado do Tratamento , ZoonosesRESUMO
This is the first study dealing with the correlation between HLA antigens and cystic echinococcosis (CE) in Egyptian patients. The potential immunogenetic predisposition for susceptibility and resistance to unilocular echinococcosis was investigated by HLA-DRB1 typing; first by HLA-DRB1 amplification using PCR then using the allele-specific probing technique based on the reverse hybridization principle. The study was carried out on 35 patients with confirmed CE, and 100 apparently healthy individuals. A statistically significant positive association was found between HLA-DR3 and HLA-DR11 and the occurrence of CE. HLA-DR3 antigen was positively associated with the occurrence of isolated pulmonary cysts, multiple cysts, cysts >5 cm in size, non-cured disease and with a common radiological picture of hydatid cyst. A significant positive association of HLA-DR11 with the occurrence of cysts <5 cm in size was detected. This study demonstrates that carriers of DR-3 and DR-11 are at high risk for CE, and that those with DR-3 are more liable to complications.
Assuntos
Suscetibilidade a Doenças , Equinococose/imunologia , Predisposição Genética para Doença , Antígenos HLA-DR/genética , Adolescente , Adulto , Idoso , Alelos , Criança , Pré-Escolar , Equinococose/genética , Equinococose Pulmonar/genética , Equinococose Pulmonar/imunologia , Egito , Feminino , Genes MHC da Classe II , Testes Genéticos/métodos , Genótipo , Subtipos Sorológicos de HLA-DR , Antígeno HLA-DR3/genética , Cadeias HLA-DRB1 , Humanos , Masculino , Pessoa de Meia-Idade , Fatores de RiscoRESUMO
It has been proposed that CD30, a member of the tumour necrosis factor (TNF) receptor superfamily, is preferentially up-regulated on Th2-type human T cells. In order to investigate a correlation between infection with Echinococcus multilocularis and CD30 expression, we analysed regulation of CD30 mRNA, a variant form of CD30 mRNA (CD30v) and CD30 ligand (CD30L) mRNA expression on PBMC from patients with alveolar echinococcosis (AE) using reverse transcriptase-polymerase chain reaction (RT-PCR). In PBMC of patients with AE as well as healthy donors, spontaneous expression of CD30L mRNA and the CD30v mRNA could be detected. However, the intact form of CD30 mRNA could be detected neither in freshly isolated PBMC of patients nor in PBMC of healthy individuals. Expression of CD30L mRNA and the variant form of CD30 mRNA was frequently detected at individual time points during 72 h of culture of PBMC stimulated with crude Echinococcus antigen. In contrast to CD30v or CD30L mRNA expression, induction of CD30 mRNA expression was detected only in three out of six (50%) healthy donors and in 10 out of 21 (48%) patients with alveolar echinococcosis after 72 h of incubation. As a control, mitogenic stimulation of PBMC of both healthy individuals and infected patients led to expression of intact CD30 mRNA within 24 h of culture. These data demonstrate the different expression of two different forms of CD30 mRNA in PBMC of human individuals. The specific induction of CD30 expression is correlated only in rare cases with the clinical status of patients with AE, indicating the lack of a general induction of CD30 mRNA in this Th2-type-dominated helminthic disease. The data provide further evidence that the CD30 receptor is not an exclusive marker for a Th2-type response.