A ação da microbiota nativa de Lutzomyia longipalpis no desenvolvimento de Leishmania spp

As leishmanioses são doenças causadas por protozoários do gênero Leishmania e transmitidas pela picada dos flebotomíneos. O estudo da microbiota intestinal de Lutzomyia longipalpis é importante para determinar uma possível influência na competência vetorial desse inseto. In vitro, a ação da microbiota sobre o parasito foi avaliada demonstrando a lise na parede celular de L. infantum chagasi e L. braziliensis, causada por Serratia marcescens. Em estudos realizados in vivo, autores observaram uma redução no número de flebotomíneos infectados com Leishmania mexicana pré-alimentados com Pseudozyma sp., Asaia sp. e Ochrobactrum intermedium. Estes estudos sugerem que a microbiota do vetor pode modular a sua infecção por Leishmania, porém o seu papel ainda não esta claro. O trabalho aqui apresentado teve como objetivo caracterizar e avaliar o papel da comunidade bacteriana intestinal do Lu. longipalpis no desenvolvimento e diferentes espécies de Leishmania spp. Métodos morfológicos e moleculares foram utilizados para identificar e mapear a microbiota intestinal. O DNA das bactérias isoladas foram extraídos, a região 16S amplificada, utilizando-se um iniciador específico para esta região do DNA bacteriano. Em seguida, foram purificados, sequenciados e analisados em bancos de dados. Foram obtidas 60 UFCs (Unidades Formadoras de Colônias) e classificadas taxonomicamente em 10 gêneros bacterianos

A atividade lítica ou efeito in vitro dessas bactérias nativas isoladas de Lu. longipalpis (Gruta da Lapinha) foi analisada por co-cultura utilizando promastigotas de Leishmania (L.) infantum chagasi,Leishmania (L.) amazonensis, Leishmania (V.) braziliensis e Leishmania (L.) major na concentração de 4 x 106 parasitas / mL e incubadas com diferentes gêneros de bactérias na concentração de 1 x 108 UFC / mL. Quando os parasitas foram co-cultivados com o gênero bacteriano Lysinibacillus todos os parasitas de L. infantum chagasi e L. amazonensis morreram em até 24h. L. braziliensis e L. major em até 48h de co-cultivo. Entre 96 a 144 horas, não observou-se a lise de todos os parasitas de L. infantum chagasi e L. amazonensis co-cultivados com Pseudomonas e Enterobacter. As bactérias Pseudomonas, Enterobacter e Erwinia quando co-cultivadas com L. braziliensis e de L. major co-cultivados com Pseudomonas, Enterobacter e Enterococcus. Os gêneros Lysinibacillus e Serratia apresentaram efeitos lítico sobre todas as quatros espécies de Leishmania testadas, abrindo a perspectiva de serem utilizadas em experimentos in vivo

Papel da saliva de flebotomos como marcador de exposição e seu efeito na proteção contra Leishmania braziliensis / Role of saliva from sandflies as an exposure marker and its effect on protection against Leishmania braziliensis

A Leishmaniose Tegumentar (LT) é uma importante patologia causada pelo protozoário Leishmania braziliensis, o principal agente etiológico nas Américas. Esse parasita é transmitido aos hospedeiros através durante a alimentação sanguínea do vetor. Comumente encontrados em área endêmica de LT, os flebótomos Lutzomyia intermedia e Lutzomyia whitmani, foram incriminados como vetores da L. braziliensis. Apesar dos amplos estudos acerca da saliva dos vetores e do papel dos flebótomos na transmissão, muito pouco se sabe sobre o envolvimento de L. whitmani na LT. OBJETIVO. Este trabalho visou avaliar o papel de L. whitmani em etapas críticas da transmissão da L. braziliensis, como a avaliação do vetor na área endêmica, a exposição de animais no peridomicílio humano ao flebótomo e o papel da saliva do vetor no estabelecimento da L. braziliensis em infecção experimental murina. MATERIAIS E MÉTODOS. Para a obtenção dos dados, foram realizados testes sorológicos como ELISA e Western blot no monitoramento das galinhas da área endêmica e nos camundongos mantidos em laboratório. Também foram realizadas coletas e identificação dos flebótomos da área endêmica e ensaios de estimulação celular para análise da resposta celular dos camundongos. RESULTADOS. Os resultados mostraram que galinhas no peridomicílio humano produziram anticorpos anti-saliva de L. whitmani, apresentando reconhecimento específico à saliva desta espécie. Também foi observado que a imunização de camundongos com saliva de L. whitmani é capaz de induzir proteção contra a infecção por L. braziliensis em camundongos imunizados. CONCLUSÃO. Estudos envolvendo a participação de importantes vetores em área endêmica são fundamentais para o entendimento da dinâmica da cadeia epidemiológica e futuros estudos envolvendo o desenvolvimento de vacinas eficazes contra a doença.

INTRODUÇÃO. A Leishmaniose Tegumentar (LT) é uma importante patologia causada pelo protozoário Leishmania braziliensis, o principal agente etiológico nas Américas. Esse parasita é transmitido aos hospedeiros através durante a alimentação sanguínea do vetor. Comumente encontrados em área endêmica de LT, os flebótomos Lutzomyia intermedia e Lutzomyia whitmani, foram incriminados como vetores da L. braziliensis. Apesar dos amplos estudos acerca da saliva dos vetores e do papel dos flebótomos na transmissão, muito pouco se sabe sobre o envolvimento de L. whitmani na LT. OBJETIVO. Este trabalho visou avaliar o papel de L. whitmani em etapas críticas da transmissão da L. braziliensis, como a avaliação do vetor na área endêmica, a exposição de animais no peridomicílio humano ao flebótomo e o papel da saliva do vetor no estabelecimento da L. braziliensis em infecção experimental murina. MATERIAIS E MÉTODOS. Para a obtenção dos dados, foram realizados testes sorológicos como ELISA e Western blot no monitoramento das galinhas da área endêmica e nos camundongos mantidos em laboratório. Também foram realizadas coletas e identificação dos flebótomos da área endêmica e ensaios de estimulação celular para análise da resposta celular dos camundongos. RESULTADOS. Os resultados mostraram que galinhas no peridomicílio humano produziram anticorpos anti-saliva de L. whitmani, apresentando reconhecimento específico à saliva desta espécie. Também foi observado que a imunização de camundongos com saliva de L. whitmani é capaz de induzir proteção contra a infecção por L. braziliensis em camundongos imunizados. CONCLUSÃO. Estudos envolvendo a participação de importantes vetores em área endêmica são fundamentais para o entendimento da dinâmica da cadeia epidemiológica e futuros estudos envolvendo o desenvolvimento de vacinas eficazes contra a doença.

Estudo da infecção natural de Lutzomyia longipalpis por Leishmania infantum e a flutuação mensal de flebotomíneos coletados no município de Camaçari, Estado da Bahia / Study of natural infection of Lutzomyia longipalpis by Leishmania infantum and the monthly fluctuation of sandflies collected in Camaçari, State of Bahia

No município de Camaçari, considerado área endêmica para leishmaniose visceral (LV), foi realizado estudo objetivando determinar a influência das variáveis climáticas sobre a flutuação mensal da população flebotomínica e a taxa de infecção natural desses flebotomíneos por Leishmania infantum. Para o levantamento entomológico foram realizadas capturas sistemáticas de flebotomíneos utilizando armadilhas tipo HP, tanto no peri como no intradomicílio. As residências foram selecionadas em bairros pertencentes a zona urbana orla e zona urbana sede, onde casos humanos de LV no foram registrados município. As capturas foram realizadas entre dezembro de 2011 e novembro de 2012. A relação entre pluviosidade, umidade relativa do ar e temperatura e a proporção de flebotomíneos foi calculada utilizando o coeficiente de Spearman. Para o estudo da infecção natural dos flebotomíneos foi utilizada a técnica de qPCR. Os pools avaliados foram compostos por flebotomíneos da mesma espécie, distribuídos pelas residências, ás quais foram investigadas no intra e peridomicilio. Além disso, os pools foram distribuídos de acordo com os 12 meses de coleta. Os resultados mostraram que a fauna flebotomínica é diversificada, sendo composta por quatro gêneros com ocorrência de cinco espécies. Espécimes de interesse epidemiológico foram encontrados com predominância para a espécie Lutzomyia (Lutzomyia) longipalpis (98,4%). Foi observada correlação positiva entre a densidade de flebotomíneos e a variável pluviosidade na zona urbana sede durante o período de coleta (r = 0,66, p <0,02). A correlação entre as variáveis bioclimáticas e a densidade dos flebotomíneos também foi avaliada em bairros que se destacaram individualmente pela densidade de flebotomíneos, sendo encontrado correlação positiva para a variável umidade relativa do ar (r = 0,58 p <0,04)...

In Camaçari city, considered an endemic area for visceral leishmaniasis (VL), the study was conducted aiming to determine the climatic variables influence on the sandflies monthly fluctuation and the natural infection rates by Leishmania infantum in the sandflies. The entomological inventory was performed with sandflies systematic captures using HP traps, both in peridomiciliar well as in intradomiciliar. The residences were selected in districts belonging to the coastline urban zone and headquarters urban zone, where human cases of VL were recorded in the city. Captures were performed between December 2011 and November 2012. The correlation between the number of sandflies and the different climatic variables was calculated using Spearman's coefficient. The sandfly natural infection was evaluated by qPCR technique. Pools reviews were composed by sand flies of the same species, distributed among households, which were investigated in peridomiciliare and intradomiciliare. Additionally, pools were distributed according to the 12-month sampling. The results showed that the phlebotomine fauna is diverse, consisting of four genera and five species. Specimens of epidemiological interest were found predominantly for Lutzomyia (Lutzomyia) longipalpis (98.4%). In addition, a positive correlation between sandfly density and pluviosity at headquarters urban zone was observed during the collection period. (r = 0.66, p <0.02). The correlation between bioclimatic variables and density of sandflies was also evaluated in neighborhoods that stood out individually by the sandfly density. A positive correlation was observed for the variable relative humidity during the collection period (r = 0.58 p <0.04)...

Vigilancia de insectos de importancia en salud pública durante la construcción de los proyectos hidroeléctricos Porce II y Porce III, Antioquia, Colombia, 1990-2009 / Twenty-year surveillance of insects relevant to public health during the construction of hydroelectric facilities in Antioquia, Colombia

Introducción. Los estudios entomológicos en las grandes obras de infraestructura hidroeléctrica constituyen una herramienta para la prevención y el control de enfermedades transmitidas por vectores, debido a que con frecuencia las alteraciones causadas en el medio producen aumento de criaderos naturales y artificiales en el área de influencia y, por ende, incremento de las poblaciones de artrópodos, entre ellos, insectos de interés en salud pública. Objetivo. Realizar estudio y vigilancia de la fauna de Culicidaey Phlebotominae en el área de los proyectos hidroeléctricos Porce II y Porce III, 1990-2009. Materiales y metódos. Se realizaron muestreos entomológicos periódicos para la vigilancia en salud pública de las comunidades ubicadas en el área de influencia y en campamentos y frentes de obra. Los adultos fueron capturados con red para mariposas, trampas de luz Shannon y CDC, y cebo humano protegido. Resultados. Se encontraron larvas de mosquitos de Culex coronator, Cx. nigripalpus, Cx. corniger, Cx. quinquefasciatus y Limatus durhami. Los depósitos más frecuentes fueron: tanques bajos, canecas, llantas y matas sembradas en agua. Aedes aegypti solo fue capturado en dos localidades rurales de dos municipios del área de influencia. En las zonas de bosque se capturaron mosquitos Aedes, Mansonia, Culex, Psorophora, Wyeomyia, Phonyomyia, Uranotaenia, Haemagogus y Sabethes; el principal fue Haemogogus janthinomis, eficiente vector de fiebre amarilla en Colombia. La zona es endémica para leishmaniasis y se identificaron 20 especies de Lutzomyia. Entre los vectores de malaria, las principales especies encontradas fueron Anopheles nuñeztovari y An. pseudopunctipennis. Conclusión. En la zona de Porce II y Porce III existe diversidad de vectores de importancia en salud pública, que es necesario continuar vigilando para minimizar el riesgo de transmisión de enfermedades a los trabajadores de las obras y comunidades aledañas.

Introduction. Entomological studies conducted in large hydroelectric infrastructure projects are a tool for the prevention and control of vector-borne diseases. These diseases emerge as a consequence of changes made to the terrain that often increase the natural and artificial mosquito larval habitats. Many of these insects are of public health importance and population increases result in an increased risk of disease transmission. Objective. The culicine (mosquito) and phlebotomine (sand fly) populations were characterized in the area of the Porce II and Porce III hydroelectric projects of Antioquia between 1990 to 2009. Materials and methods. Periodical entomological samplings were made in the area of impact, in the workers camps, and construction sites. Adult specimens were captured with nets, Shannon light traps, CDC light traps, and protected human bait. Results. Mosquito larvae of the following species were identified: Culex coronator, Culex nigripalpus, Culex corniger, Culex quinquefasciatus and Limatus durhami. The most frequently identifiers of larval habitats were low tanks, waste cans, tires, and aquatic plants. Aedes aegypti specimens were captured in only two rural locations from two municipalities within the area of influence. Specimens from the following mosquito genera were captured in forest areas: Aedes, Mansonia, Culex, Psorophora, Wyeomyia, Phonyomyia, Uranotaenia, Haemagogus and Sabethes. The most important mosquito found was Haemogogus janthinomis, an efficient yellow fever vector in Colombia. The area has been endemic for leishmaniasis and in the current study, 20 species of Lutzomyia sand flies, potential vectors, were identified. Among malaria vectors, the most important species found in the area were Anopheles nuneztovari and Anopheles pseudopunctipennis. Conclusion. A wide variety of vectors were discovered in the area of the Porce II and Porce III hydroelectric projects, and many of these were relevant for public health. Further monitoring will be necessary to minimize disease transmission risks among the workers and the inhabitants of the surrounding areas.

[In vitro insecticidal activity of seed neem oil on Lutzomyia longipalpis (Diptera: Psychodidae)]. / Atividade inseticida in vitro do óleo de sementes de nim sobre Lutzomyia longipalpis (Diptera: Psychodidae).

Lutzomyia longipalpis is the main vector of visceral leishmaniasis in Brazil. The objective was to evaluate the effect of oil from (Azadirachta indica) neem seeds on eggs, larvae and adults of the vector. The insects were captured in the field and kept in the laboratory at +/- 27 °C and 80% relative humidity. Five treatments with different concentrations were performed using two negative controls (distilled water and Tween 80) and a positive control. The eggs were sprayed with the oil at different concentrations and the number of hatched larvae evaluated for 10 days. Mortality of larvae was observed to pupation and adult mortality was observed after 24, 48, and 72 hours. Statistical analysis was performed by Tukey test at 5% probability. The highest oil concentration of eggs obtained 65.16 +/- 3.24% efficacy for reducing egg hatching. The test with larvae showed 67.75 +/- 2.21% efficacy at a concentration of 100 mg.mL⁻¹. In adults, the efficacy of the 100 mg.mL⁻¹ concentration was 96.64 +/- 4.11% after 24 hours. The phytochemical analysis revealed the presence of triterpenes. These results demonstrate the potential use of this oil in the control of this vector.

Atividade inseticida in vitro do óleo de sementes de nim sobre Lutzomyia longipalpis (Diptera: Psychodidae) / In vitro insecticidal activity of seed neem oil on Lutzomyia longipalpis (Diptera: Psychodidae)

Lutzomyia longipalpis é o principal vetor da Leishmaniose visceral no Brasil. O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito do óleo de sementes de nim (Azadirachta indica) sobre ovos, larvas e adultos do vetor. Os insetos foram capturados no campo e mantidos no laboratório a ± 27 °C e 80 por cento de umidade relativa. Cinco tratamentos com diferentes concentrações foram realizados, usando-se dois controles negativos, um com água destilada e outro com Tween 80 (3 por cento) e um controle positivo com cipermetrina. Os ovos foram borrifados com o óleo em diferentes concentrações e avaliou-se o número de larvas eclodidas por 10 dias consecutivos. A mortalidade das larvas foi observada até a pupação, e a mortalidade dos adultos foi observada após 24, 48, e 72 horas. A análise estatística foi feita pelo teste de Tukey a 5 por cento de probabilidade. No teste com ovos, a maior concentração obteve 65,16 ± 3,24 por cento de eficácia. O teste com larvas apresentou 67,75 ± 2,21 por cento de eficácia na concentração de 100 mg.mL-1. Com adultos, a eficácia na concentração de 100 mg.mL-1 foi de 96,64 ± 4,11 por cento, após 24 horas. A análise fitoquímica revelou a presença de triterpenos. Esses resultados demonstram o potencial uso desse óleo no controle deste vetor.

Lutzomyia longipalpis is the main vector of visceral leishmaniasis in Brazil. The objective was to evaluate the effect of oil from (Azadirachta indica) neem seeds on eggs, larvae and adults of the vector. The insects were captured in the field and kept in the laboratory at ± 27 °C and 80 percent relative humidity. Five treatments with different concentrations were performed using two negative controls (distilled water and Tween 80) and a positive control. The eggs were sprayed with the oil at different concentrations and the number of hatched larvae evaluated for 10 days. Mortality of larvae was observed to pupation and adult mortality was observed after 24, 48, and 72 hours. Statistical analysis was performed by Tukey test at 5 percent probability. The highest oil concentration of eggs obtained 65.16 ± 3.24 percent efficacy for reducing egg hatching. The test with larvae showed 67.75 ± 2.21 percent efficacy at a concentration of 100 mg.mL-1. In adults, the efficacy of the 100 mg.mL-1 concentration was 96.64 ± 4.11 percent after 24 hours. The phytochemical analysis revealed the presence of triterpenes. These results demonstrate the potential use of this oil in the control of this vector.

A new species of Philosepedon Eaton, 1904 (Diptera, Psychodidae) from Brazil / Uma espécie nova de Philosepedon Eaton (Diptera, Psychodidae) do Brasil

Philosepedon vieirai Chagas, Bravo & Rafael, n. sp. from Brazil is described and illustrated.

Neste trabalho é descrita a espécie Philosepedon vieirai Chagas, Bravo & Rafael, sp. nov. do Brasil.

Subfamilia Trichomyiinae (Psychodidae) en el territorio continental e insular colombiano / Subfamily Trichomyiinae (Psychodidae) in the Continental and Insular Territory of Colombia

La subfamilia Trichomyiinae es registrada por primera vez en el territorio continental e insular colombiano. Un total de 111 machos y 15 hembras de Trichomyia (Opisthotrichomyia) brevitarsa fueron recolectados con trampas de luz tipo CDC en bosques secos tropicales de los alrededores de la ciudad de Sincelejo, departamento de Sucre e isla Fuerte, departamento de Bolívar. Los ejemplares capturados exhiben los rasgos morfológicos característicos de la especie, incluyendo un grupo de sensilas sobre el primer y segundo palpómero. Dos de las hembras de Tr. brevitarsa examinadas fueron halladas con un alto número de nemátodos no identificados en el abdomen.

Characteristics of the bological cycle of Lutzomyia evandroi Costa Lima & Antunes, 1936 (Diptera: Psychodidae) under experimental conditions

Lutzomyia evandroi Costa Lima and Antunes, 1936 is found in Rio Grande do Norte, northeastern Brazil, in areas of visceral and mucocutaneous leishmaniasis and follows the same geographic distribution of L. longipalpis. The biological cycle, oviposition, morphological and behavioral characteristics of the species were studied under experimental conditions. The average number of eggs per wild caught female varied from 21 to 50 eggs along the year, with a peak occurring between January and March and another in August, with oviposition lasting for 4 to 12 days. The mean larval phase was 24 days. Ovipositing rates were influenced by rainfall and temperature indexes, with an increase of eggs per oviposition at the beginning and at the end of the rainy season, and a decrease at the peak of the rainy season

Effects of temperature and diet on the growth and longevity of phlebotomine sand flies (Diptera: Psychodidae)

Se realizó una serie de experimentos para estudiar los efectos de diferentes temperaturas ambientales (28 a 10ºC) y tipos de dieta sobre la tasa de crecimiento, el tamaño y la longevidad de los flebotomíneos: Se utilizaron cuatro colonias de laboratorio diferentes: Phlebotomus papatasi, P. perniciosus, Lutzomyia longipalpis (Brasil) y L. longipalpis (Colombia). Los períodos de desarrollo y supervivencia de los insectos fueron muy variables según la temperatura y la especie. Por debajo de 18ºC, la mayoría de las larvas y pupas de L. longipalpis murieron. A 15ºC, el tiempo de desarrollo de P. papatasi y P. perniciosus se prologó considerablemente (150 a 412 días) y muchas de las formas inmaduras murieron. En el rango de 28 a 15ºC, la longevidad de los adultos de P. papatasi y L. longipalpis aumentó a medida que la temperatura ambiente disminuía; a 15ºC los tiempos promedio de supervivencia de las hembras de P. papatasi y L. longipalpis fueron 63,2 y 37,1 días, respectivamente. El efecto de dos tipos de dieta diferentes (heces de animal/polvo de hígado y hojas en descomposición) sobre la tasa de crecimiento y el tamaño (peso de pupa) de L longipalpis también se determinó, estableciéndose que los insectos alimentados con heces de animal/polvo de hígado se desarrollaron más rápido y fueron más sincronizados y más grandes que aquellos alimentados con hojas de descomposición. Los resultados de este estudio entregan nueva información sobre los efectos de factores medioambientales en el crecimiento y la longevidad de flebotomíneos bajo condiciones de laboratorio

Biología reproductiva bajo condiciones experimentales y variabilidad genética de Lutzomyia shannoni (Dyar) (Diptera: Psychodidae) / Reproductive biology under experimental conditions and genetic variability of Lutzomyia shannoni (Dyar) (Diptera: Psychodidae)

Se estudiaron aspectos básicos del desarrollo biológico de Lutzomyia shannoni (Dyar) en dos condiciones experimentales, cajas de poliestireno e incubadora. El tiempo de desarrollo desde el estadio de huevo hasta adulto fue de 67 y 52 días respectivamente. Con base en cohortes de 100 hembras en cada experimento se construyeron tablas de vida horizontales. Se obtuvieron los siguientes parámetros predictivos en cada microambiente: tasa neta de reproducción (23,5 y 18 hembras por hembra), tiempo generacional (11,4 y 9,4 semanas), tasa intrínseca de incremento poblacional (0,27 y 0,30) y tasa finita de multiplicación (1,31 y 1,36). Se calculó el valor reproductivo de las hembras de cada cohorte en cada clase de edad. También, se calcularon parámetros poblaciones observados en los dos experimentos. Se elaboraron tablas de vida verticales y se describió la mortalidad de una generación en cada cohorte. Además, se estimó la varianza aditiva y heredabilidad para la fecundidad en dos generaciones sucesivas de Lu. shannoni. Se utilizó la técnica de electroforésis en geles de poliacrilamida para analizar la variación genética de 11 loci isoenzimáticos entre poblaciones silvestres de Lu. shannoni de tres localidades ampliamente separadas: Palambí (Nariño), Cimitarra (Santander) y Chinácota (Norte de Santander). Estas muestras fueron comparadas con una colonia de laboratorio originada de Carmen de Bolívar (Bolivar). La heterozigosidad promedio estuvo entre el 16 y 25 por ciento, con 2,2 hasta 2,6 alelos detectados por locus. La distancia genética de Nei entre las poblaciones fue baja, oscilando entre 0.014 y 0,075. El número de migrantes (Nm=3), fue estimado con base en los estadíticos-F de Wrigth, el F subíndice st, indicó bajos niveles de flujo génico entre las poblaciones silvestres de Lu. shannoni. Este nivel bajo de migración indica que la dispersión del virus de la estomatitis vesicular es más factible que ocurra vía hospederos infectados, y no por este insecto infectado. En la muestra de la colonia de 79 individuos, el locus GPI fue homozigoto en todas las hembras y heterozigoto en todos los machos. aunque, esta observación es probablemente una consecuencia de colonización, indica que estos alelos estan fuertemente unidos a los cromosomas sexuales, el alelo GPI superíndice 62 unido al cromosona-X y el alelo GPI superíndice 72 asociado con el cromosoma-Y

Colonização de Lutzomyia longipalpis (Lutz e Neiva, 1912): estudos morfológicos e susceptibilidade à infecção por Leishmania spp

Uma colônia de flebotomíneos Lutzomyia Longipalpis originários da caverna da Lapinha (Minas Gerais,Brasil) foi estabelecida em um curto período em nosso laboratório. O objetivo foi obetr quantidade suficiente de insetos para desenvolver experimentos a fim de: estudar os eatágios de desenvolvimento do flebotomíneo,estudar a morfologia do intestino médio, e investigar a susceptibilidade dos insetos à infecções por Leishmania. A colônia foi iniciada com 850 adultos fêmeas as quais foram imediatamente com sangue, e individualizadas para oviposição e identificação. Os ovos foram contados,separados e colocados em postes de criação.As larvas foram alimentadas diariamente em dieta especial. Os insetos foram mantidos durante todo o tempo a 26°C em incubadora. Os adultos emergiram num período de 30-35 dias. A colônia que foi estabelecida e mantida está na 11ª geração.Nós usamos a microscopia elêtronica de varredura para observar a morfologia dos ovos e as larvas.

A superfícies externas dos ovos são cobertas por um exocório caracterizado por arranjos de uma série de cristas longitudinais, paralelas e descontínuas, convergindo nas extremidades. Os estágios larvares foram distinguidos pela presença de um ou dois pares de filamentos caudais.Os segmentos abdominais foram reconhecidos pela presença de pseudo-pernas na superfície dorsal. A superfície ventro-lateral é coberta pela presença de películas. A pupa tem muitas espículas nos segmentos abdominais, e é fácil de observar as asas e pernas.Nós fizemos um estudo histológico do intestino médio dos adultos. Colorações convencionais demonstraram diferenças entre as regiões torácica e abdominal do intestino médio. Experimentos feitos para verificar a infecção do Lu.Longipalpis por Leishmania, constatou que os insetos da colônia sào mais susceptíveis à infecçào do que aqueles originários do campo.A fim de melhor compreender este aspecto, nós desenvolvemos estudos bioquímicos para comparar a presença de proteínas no intestino médio e na saliva destes insetos. Nós concluímos que existem diferenças no conteúdo protéico destes órgãos

Colonização de Lutzomyia longipalpis (Lutz e Neiva, 1912): estudos morfológicos e susceptibilidade à infecção por Leishmania spp / Colonization of Lutzomyia longipalpis (Lutz and Neiva, 1912): Morphological studies and susceptibility to infection with Leishmania spp

Uma colônia de flebotomíneos Lutzomyia Longipalpis originários da caverna da Lapinha (Minas Gerais,Brasil) foi estabelecida em um curto período em nosso laboratório. O objetivo foi obter quantidade suficiente de insetos para desenvolver experimentos a fim de: estudar os eatágios de desenvolvimento do flebotomíneo, estudar a morfologia do intestino médio, e investigar a susceptibilidade dos insetos à infecções por Leishmania. A colônia foi iniciada com 850 adultos fêmeas as quais foram imediatamente com sangue, e individualizadas para oviposição e identificação. Os ovos foram contados, separados e colocados em postes de criação. As larvas foram alimentadas diariamente em dieta especial. Os insetos foram mantidos durante todo o tempo a 26°C em incubadora. Os adultos emergiram num período de 30-35 dias. A colônia que foi estabelecida e mantida está na 11ª geração. Nós usamos a microscopia elêtronica de varredura para observar a morfologia dos ovos e as larvas. A superfícies externas dos ovos são cobertas por um exocório caracterizado por arranjos de uma série de cristas longitudinais, paralelas e descontínuas, convergindo nas extremidades. Os estágios larvares foram distinguidos pela presença de um ou dois pares de filamentos caudais. Os segmentos abdominais foram reconhecidos pela presença de pseudo-pernas na superfície dorsal. A superfície ventro-lateral é coberta pela presença de películas. A pupa tem muitas espículas nos segmentos abdominais, e é fácil de observar as asas e pernas. Nós fizemos um estudo histológico do intestino médio dos adultos. Colorações convencionais demonstraram diferenças entre as regiões torácica e abdominal do intestino médio. Experimentos feitos para verificar a infecção do Lu. Longipalpis por Leishmania, constatou que os insetos da colônia são mais susceptíveis à infecçào do que aqueles originários do campo. A fim de melhor compreender este aspecto, nós desenvolvemos estudos bioquímicos para comparar a presença de proteínas no intestino médio e na saliva destes insetos. Nós concluímos que existem diferenças no conteúdo protéico destes órgãos.

Estudio en condiciones de laboratorio de los ciclos de vida de Lutzomyia torvida y Lutzomyia longiflocosa (Diptera: Psychodidae) posibles vectores de Leishmania braziliensis en la zona cafetera colombiana de vida de Lutzomyia torvida y Lutzomyia longiflocosa (Diptera: Psychodidae) posibles vectores de Leishmania braziliensis en la zona cafetera colombiana / A laboratory study of Lutzomyia torvida and Lutzomyia longiflocosa (Diptera: Psychodidae) Life-cicles, being possible Leishmania braziliensis vectors in Colombia's coffee-growing area

En el presente estudio, se hizo un seguimiento diario en condiciones de laboratorio del ciclo de vida de Lutzomyia torvida y Lutzomyia longiflocosa con el propósito de mejorar el conocimiento de la biología de estas dos especies del grupo verrucarum, serie townsendi. Cada una de ellas es la especie antropofílica más abundante de dos focos diferentes de Leishmania braziliensis localizados en el centro del país sobre la cordillera oriental. L. torvida fue capturada en Reventones (Cundinamarca) y L. longiflocosa en Tello (Huila) con cebo humano y trampa Shannon entre febrero de 1996 y marzo de 1997, principalmente en la época seca. La postura promedio de las hembras capturadas fue de 25,8 para la L. toRvida y 27,6 huevos para L. longiflocosa. El tiempo promedio de duración del ciclo de vida de huevo a adulto fue de 96.8 días para L. torvida y 93,8 días para L. longiflocosa. Los mayores porcentajes de pérdida de individuos para las dos especies se presentaron en la fase de huevo y cuarto estadio larval. Aunque 54.8 por ciento de los insectos de L. torvida y 72 por ciento de L. longiflocosa lograron llegar a la fase adulta, fue difícil alimentar las hembras sobre hámster por que estas se resistieron a picar

Life cycle and fecundity analysis of Lutzomyia shannoni (Dyar) (Diptera: Psychodidae)

The life cycle of Lutzomyia shannoni (Dyar) was described for laboratory conditions with maximum daily temperature of 27-30ºC, minimum daily temperatures of 22-27ºC and relative humidity between 87-99 per cent. Life cycle in each stage was as follows: egg 6-12 days (ave. 8.5 days); first stage larva 5-13 days (ave. 9.6 days); second stage larva 4-13 days (ave. 9.2 days); third stage larva 5-19 days (ave. 11.8 days); fourth stage larva 7-37 days (ave. 19.9 days); pupa 7-32 days (ave. 15.2 days). The life expectancy of adults ranged from 4 to 15 days (ave. 8.6 days). The entire egg to adult period ranged from 36 to 74 days (ave. 54.6 days). On average, each female oviposited 22.7 eggs; the average egg retention per female was 24.3 eggs.

Rearing and colonization of Lutzomyia evansi (Diptera: Psychodidae), a vector of visceral leishmaniasis in Colombia

The sandfly Lutzomyia evansi from a focus of visceral leishmaniasis in northern Colombia was reared and maintained under laboratory conditions for five generations. The average time for total development was 41.8 days (range = 35.1 - 49.6) at 25ºC and 89-95 per cent of relative humidity. The mean number of eggs laid was lower in laboratory bred females either in pots (13.2 eggs/female) or vials (29.9 eggs/female) than in wild caught females (33.4 eggs/female). Immature mortality, mainly due to fungal and mite contamination, was higher during the first two instars than in the remaining immature stages. Adults were robust and healthy although difficult to feed on hamster or chick skin membrane. In summary, Lu. evansi is a colonizable species but requires specific conditions.

Cow, farm, and ecologic risk factors of clinical vesicular stomatitis on Costa Rican dairy farms.

Twenty-two Costa Rican dairy herds were actively monitored for vesicular diseases between November 1991 and March 1992, in anticipation of the annual dry season occurrence of vesicular stomatitis (VS). Thirty-nine confirmed cases of VS were concentrated on nine farms, resulting in an average herd incidence rate of 11.1% of mature cattle for the affected farms, or 2.6% for all farms. Affected cattle were generally older (average age = 5.4 years), with seven-year-old cows having the highest age-specific incidence rate (6.5%). The New Jersey serotype of VS was diagnosed for all but four cases, primarily manifesting as teat vesicles. Cases had high acute and convalescent antibody titers for both major VS serotypes, New Jersey and Indiana, with significant titer increases after clinical disease. Screening and multiple variable regression analyses of 140 cow, farm, and ecologic variables revealed that clinical disease was significantly associated with cows being in lactation, and with higher acute antibody titers to serotype Indiana, but not with any predisposing diseases. Significant farm factors were the presence of poultry and a longer calving interval on the farm, but not higher rates of other diseases. According to a prior epidemiologic hypothesis, two ecologic factors were forced to be included into the farm model: the reported presence of sand flies, and a higher proportion of the farm being in forest land, with subsequent stepwise regression. The resulting model containing only the two forced variables was significant (P < 0.003) and correctly classified 78% of farms into the correct group, as compared with 79% for the final stepwise model.(ABSTRACT TRUNCATED AT 250 WORDS)