RESUMO
ABSTRACT Melatonin (MLT) is a potential signaling molecule in the homeostasis of bone metabolism and may be an important mediator of bone formation and stimulation. The aim of this in vitro study was to evaluate the effect of MLT on the viability, mRNA/protein expression and mineralization of pre-osteoblastic cells. The concentrations 5, 2.5, 1, 0.1 and 0.01 mM MLT were tested on pre-osteoblastic cells (MC3T3) compared to control (no MLT), evaluating proliferation and cell viability (C50), gene expression (RT-PCR) and secretion (ELISA) of COL-I and OPN at 24h, 48h and 72h, and the formation of mineral nodules (alizarin red and fast red) after 10 days of treatment. MLT at 5 and 2.5 mM proved to be cytotoxic (C50), so only 0.01, 0.1 and 1 mM were used for the subsequent analyses. OPN mRNA expression increased with MLT at 0.1 mM - 1 mM, which was followed by increased secretion of OPN both at 24h and 72h compared to the remaining groups (p <0.05). COL-I mRNA and COL-1 secretion followed the same pattern as OPN at 0.1 mM MLT at 72h of treatment (p <0.05). Regarding mineralization, all MLT doses (except 1mM) caused an increase (p <0.05) in the formation of mineral nodules compared to the control. Melatonin at 0.01mM - 1mM had a stimulatory effect on osteoblasts by upregulating COL-I and OPN expression/ secretion and mineralization, thereby fostering osteogenesis.
RESUMO A melatonina (MLT) é uma molécula potencial de sinalização na homeostase do metabolismo ósseo e pode ser um importante mediador da formação e estimulação óssea. O objetivo deste estudo in vitro foi avaliar o efeito da MLT na viabilidade, na expressão do mRNA da proteína e mineralização de células préosteoblásticas. As concentrações de MLT 5, 2,5, 1, 0,1 e 0,01 mM foram testadas em células pré-osteoblásticas da linhagem MC3T3 em comparação ao controle (sem MLT), avaliando a proliferação e a viabilidade celular (C50), expressão gênica (rtPCR) e secreção (Elisa) de Colágeno tipo 1 (COL-I) e osteopontina (OPN) às 24, 48 e 72 horas, além da formação de nódulos minerais por meio do teste vermelho de Alizarina fast red após 10 dias de tratamento. MLT a 5 e 2,5 mM provou ser tóxico (C50). Portanto, as concentrações de 0,01, 0,1 e 1 mM foram utilizadas para as análises subsequentes. A expressão do mRNA da OPN aumentou com MLT a 0,1 mM-1mM, seguida pela secreção aumentada de OPN às 24 e 72 horas em comparação aos demais grupos (p<0,05). O mRNA de COL-I e a secreção de COL-I seguiram o mesmo padrão do OPN a 0,1 mM de MLT em 72 horas de tratamento (p<0,05). Em relação à mineralização, todas as doses de MLT (exceto 1mM) causaram aumento (p<0,05) na formação de nódulos minerais em comparação ao controle. A MLT na concentração entre 0,01mM a 1 mM teve um efeito estimulador sobre os osteoblastos, ao regular positivamente a expressão e secreção de COL-I e OPN, além da mineralização, favorecendo a osteogênese.
Assuntos
Humanos , Osteoblastos/efeitos dos fármacos , Osteogênese/efeitos dos fármacos , Osteogênese/genética , Fragmentos de Peptídeos/metabolismo , Diferenciação Celular/efeitos dos fármacos , Diferenciação Celular/genética , Metaloproteinase 2 da Matriz/metabolismo , Osteopontina/metabolismo , Melatonina/farmacologia , Osteoblastos/metabolismo , Fragmentos de Peptídeos/genética , RNA Mensageiro/genética , Ensaio de Imunoadsorção Enzimática , Expressão Gênica , Regulação da Expressão Gênica no Desenvolvimento/efeitos dos fármacos , Metaloproteinase 2 da Matriz/genética , Proliferação de Células/efeitos dos fármacos , Proliferação de Células/genética , Osteopontina/genética , Reação em Cadeia da Polimerase em Tempo RealRESUMO
Despite the overall benefits of immunization, vaccine hesitancy has been a growing trend and has been associated with the resurgence of vaccine-preventable diseases. The aim of this study was to assess vaccine confidence and hesitancy in Brazil, as part of a wider project to map vaccine confidence globally. One thousand subjects were interviewed, either online or face-to-face, based on a general questionnaire regarding perceptions on vaccines and vaccination. Further exploratory questions were used with the subset of respondents who were parents of children aged under 5. Such questions extracted information regarding vaccination behavior, opinions on vaccination and government health services, and vaccine hesitancy. Reasons for hesitancy were classified as relating to confidence, convenience and/or complacency, and the population was also analyzed socio-demographically. The results showed that overall confidence in immunization was higher than confidence in family planning services, community health workers and emergency services. Seventy-six people reported hesitancy to vaccinate. The commonest reasons for hesitancy were issues with confidence (41.4%), efficacy/safety of the vaccine (25.5%) and concerns about adverse events (23.6%). The sociodemographic analysis revealed that vaccine hesitancy was associated with marital status, level of education and income. Despite overall vaccine confidence being high, a clear trend toward lower levels of confidence was associated with higher levels of hesitancy, which warrants on-going monitoring, due to the dynamic and changing nature of vaccine hesitancy.
Assuntos
Atitude Frente a Saúde , Conhecimentos, Atitudes e Prática em Saúde , Aceitação pelo Paciente de Cuidados de Saúde/estatística & dados numéricos , Vacinação/estatística & dados numéricos , Vacinas/administração & dosagem , Adulto , Brasil , Feminino , Humanos , Masculino , Pessoa de Meia-Idade , Fatores SocioeconômicosRESUMO
Despite the overall benefits of immunization, vaccine hesitancy has been a growing trend and has been associated with the resurgence of vaccine-preventable diseases. The aim of this study was to assess vaccine confidence and hesitancy in Brazil, as part of a wider project to map vaccine confidence globally. One thousand subjects were interviewed, either online or face-to-face, based on a general questionnaire regarding perceptions on vaccines and vaccination. Further exploratory questions were used with the subset of respondents who were parents of children aged under 5. Such questions extracted information regarding vaccination behavior, opinions on vaccination and government health services, and vaccine hesitancy. Reasons for hesitancy were classified as relating to confidence, convenience and/or complacency, and the population was also analyzed socio-demographically. The results showed that overall confidence in immunization was higher than confidence in family planning services, community health workers and emergency services. Seventy-six people reported hesitancy to vaccinate. The commonest reasons for hesitancy were issues with confidence (41.4%), efficacy/safety of the vaccine (25.5%) and concerns about adverse events (23.6%). The sociodemographic analysis revealed that vaccine hesitancy was associated with marital status, level of education and income. Despite overall vaccine confidence being high, a clear trend toward lower levels of confidence was associated with higher levels of hesitancy, which warrants on-going monitoring, due to the dynamic and changing nature of vaccine hesitancy.
Apesar dos benefícios globais da imunização, a hesitação em vacinar é uma tendência crescente que tem sido associada ao ressurgimento das doenças imunopreveníveis. O estudo teve como objetivo avaliar a confiança nas vacinas e a hesitação em vacinar no Brasil, como parte de um projeto mais amplo para mapear a confiança em vacinas em nível global. Foram entrevistadas mil pessoas, direta ou virtualmente, usando um questionário geral sobre percepção em relação às vacinas e à vacinação. Foram utilizadas perguntas exploratórias adicionais no subconjunto de entrevistados que eram pais de crianças abaixo de cinco anos de idade. Essas perguntas produziram informações sobre o comportamento em relação à vacinação, opiniões sobre vacinação e serviços públicos de saúde e hesitação em vacinar. Os motivos da hesitação foram classificados em relação à confiança, conveniência e/ou acomodação, e a população também foi analisada conforme as características sociodemográficas. Os resultados mostraram que a confiança geral na imunização foi maior do que nos serviços de planejamento familiar, agentes comunitários de saúde e serviços de emergência. Setenta e seis pessoas relataram hesitação em vacinar. Os motivos mais frequentes da hesitação diziam respeito a confiança (41,4%), eficácia/segurança da vacina (25,5%) e preocupações com eventos adversos (23,6%). A análise sociodemográfica mostrou que a hesitação em vacinar estava associada ao estado civil, escolaridade e renda. Apesar da alta confiança geral na vacinação, uma clara tendência para níveis de confiança mais baixos esteve associada a níveis mais altos de hesitação, o que justifica o monitoramento permanente dessa tendência, em função da natureza dinâmica da hesitação em vacinar.
A pesar de lo beneficios generales de la inmunización, la renuencia a la vacunación ha sido una tendencia en crecimiento que ha sido asociada con el resurgimiento de las enfermedades prevenibles por vacunación. El objetivo de este estudio fue evaluar la confianza y renuencia a las vacunas en Brasil, como parte de un proyecto más amplio para mapear la confianza en las vacunas globalmente. Mil sujetos fueron entrevistados, bien en línea o cara-a-cara, mediante un cuestionario general respecto a sus percepciones sobre las vacunas y la vacunación. Se utilizaron otras preguntas exploratorias con el subconjunto de encuestados, que eran padres de niños con una edad inferior a los cinco años. Tales preguntas recabaron información respecto al comportamiento sobre la vacunación, opiniones sobre vacunación y servicios de salud gubernamentales, así como su renuencia a las vacunas. Las razones para esta última se clasificaron como aquellas relacionadas con la confianza, conveniencia y/o complacencia, y la población fue también analizada sociodemográficamente. Los resultados mostraron que la confianza general en inmunización fue más alta que la confianza en servicios de planificación familiar, trabajadores de salud comunitarios y servicios de emergencia. Setenta y seis personas informaron de renuencia a la vacunación. Las razones más comunes para la renuencia fueron temas relacionados con la confianza (41,4%), eficacia/seguridad de la vacuna (25,5%) y preocupaciones sobre efectos adversos (23,6%). El análisis sociodemográfico reveló que la renuencia a la vacunación estaba asociada con el estado civil, nivel de educación e ingresos. A pesar de que la confianza general en las vacunas es alta, existe una clara tendencia hacia niveles más bajos de confianza, que estaba asociada con altos niveles de renuencia, lo que garantiza una supervisión permanente, debido a la dinámica y naturaleza cambiante del rechazo a las vacunas.
