Sequencing of E2 and NS5A regions of HCV genotype 3a in Brazilian patients with chronic hepatitis.

Hepatitis C virus (HCV) is a major cause of liver disease throughout the world. The NS5A and E2 proteins of HCV genotype 1 were reported to inhibit the double-stranded (ds) RNA-dependent protein kinase (PKR), which is involved in the cellular antiviral response induced by interferon (IFN). The response to IFN therapy is quite different between genotypes, with response rates among patients infected with types 2 and 3 that are two-three-fold higher than in patients infected with type 1. Interestingly, a significant percentage of HCV genotype 3-infected patients do not respond to treatment at all. The aim of this paper was to analyse the sequences of fragments of the E2 and NS5A regions from 33 outpatients infected with genotype 3a, including patients that have responded (SVR) or not responded (NR) to treatment. HCV RNA was extracted and amplified with specific primers for the NS5A and E2 regions and the PCR products were then sequenced. The sequences obtained covered amino acids (aa) 636-708 in E2 and in NS5A [including the IFN sensitivity determining region (ISDR), PKR-binding domain and extended V3 region)]. In the E2 and NS5A regions, we did observe aa changes among patients, but these changes were not statistically significant between the SVR and NR groups. In conclusion, our results suggest that the ISDR domain is not predictive of treatment success in patients infected with HCV genotype 3a.

Sequencing of E2 and NS5A regions of HCV genotype 3a in Brazilian patients with chronic hepatitis

Hepatitis C virus (HCV) is a major cause of liver disease throughout the world. The NS5A and E2 proteins of HCV genotype 1 were reported to inhibit the double-stranded (ds) RNA-dependent protein kinase (PKR), which is involved in the cellular antiviral response induced by interferon (IFN). The response to IFN therapy is quite different between genotypes, with response rates among patients infected with types 2 and 3 that are two-three-fold higher than in patients infected with type 1. Interestingly, a significant percentage of HCV genotype 3-infected patients do not respond to treatment at all. The aim of this paper was to analyse the sequences of fragments of the E2 and NS5A regions from 33 outpatients infected with genotype 3a, including patients that have responded (SVR) or not responded (NR) to treatment. HCV RNA was extracted and amplified with specific primers for the NS5A and E2 regions and the PCR products were then sequenced. The sequences obtained covered amino acids (aa) 636-708 in E2 and in NS5A [including the IFN sensitivity determining region (ISDR), PKR-binding domain and extended V3 region)]. In the E2 and NS5A regions, we did observe aa changes among patients, but these changes were not statistically significant between the SVR and NR groups. In conclusion, our results suggest that the ISDR domain is not predictive of treatment success in patients infected with HCV genotype 3a.

Simultaneous quantitation of serum HBV DNA and HBeAg can distinguish between slow and fast viral responses to antiviral therapy in patients with chronic hepatitis B / A quantificação simultânea do DNA VHB e do AgHBe séricos podem distinguir entre resposta viral lenta e rápida à terapêutica anti-viral em pacientes com hepatite crônica B

BACKGROUND: The quantitation of serum HBeAg is not commonly used to monitor viral response to therapy in chronic hepatitis B. METHODS: In this study, 21 patients receiving varying therapies were followed and their viral response monitored by concomitant viral load and HBeAg quantitation in order to study the meaning and the kinetics of both parameters. RESULTS: It was possible to distinguish between three different patterns of viral response. The first was characterized by a simultaneous decrease in serum HBV DNA and HBeAg. The second pattern was characterized by a decrease in serum HBeAg but persistent detection of HBV DNA. The third pattern was characterized by undetectable HBV DNA with persistent HBeAg positivity, which points to a non-response (Pattern III-B) except when HBeAg levels showed a slow but steady drop, characterizing a "slow responder" patient (Pattern III-A). CONCLUSIONS: The first pattern is compatible with a viral response. A long-term HBeAg seropositivity with a slow and persistent decrease (Pattern III-A) is also compatible with a viral response and calls for a prolongation of anti-viral treatment.

INTRODUÇÃO: A quantificação do AgHBe sérico não é habitualmente utilizada para monitorizar a resposta viral ao tratamento da hepatite crônica B. MÉTODOS: Neste estudo, 21 pacientes sob tratamento com diferentes terapias foram acompanhados e a resposta viral monitorizada pela quantificação concomitante da carga viral e do AgHBe a fim de investigar o significado e a cinética de ambos os parâmetros. RESULTADOS: Distinguiram-se três diferentes padrões de resposta viral. O primeiro caracterizou-se pela redução simultânea do HBV DNA e AgHBe séricos. O segundo padrão caracterizou-se por uma redução do AgHBe porém com detecção persistente do HBV DNA. O terceiro padrão caracterizou-se por HBV DNA indetectável com positividade persistente do AgHBe, sugerindo ausência de resposta (Padrão III-B), exceto quando os níveis de AgHBe mostraram uma queda lenta porém persistente, caracterizando um "respondedor lento" (Padrão III-A). CONCLUSÕES: O primeiro padrão é compatível com resposta viral. Uma seropositividade prolongada do AgHBe porém com uma redução lenta e persistente (Padrão III-A) é também compatível com resposta viral, sugerindo o prolongamento do tratamento anti-viral.

Transtorno de déficit de atenção e hiperatividade (TDAH) - avaliação do padrão no EEG e estado nutricional de crianças e adolescentes de Brasília/DF / Attention deficit/hyperactivity disorder - evaluation of the pattern on the electroencephalogram and nutritional status of children and teenagers of Brasília/DF

O diagnóstico do transtorno de déficit de atenção e hiperatividade (TDAH) é baseado em sintomas clínicos e estudos mostram correlação de fatores genéticos, ambientais, nutricionais e psicossociais. Na prática clínica, a análise do eletroencefalograma (EEG) pode ser um dado objetivo de auxílio no diagnóstico. Objetivo: Analisar o perfil epidemiológico, nutricional e as alterações do EEG em crianças e adolescentes, com sinais e sintomas de TDAH, encaminhados do Serviço de Neuropediatria do Hospital Universitário. Métodos: Estudo de base transversal, analítico-descritivo. Foram selecionados 70 pacientes entre 9 e 18 anos que apresentavam critérios clínicos de TDAH, segundo o SNAP-IV. Foram coletados dados nutricionais, de peso, altura e IMC/idade e realizado EEG em vigília. Resultados: Identificaram-se alterações do EEG unicamente em pacientes do sexo masculino, tendo as ondas thetas como achados predominantes. Os portadores de TDAH apresentaram índice de repetência escolar de 44,4%, prevalência de dificuldades na escrita e na leitura elevados, com índices de 72,2% e de 44,4%, respectivamente, refletindo a maior frequência de transtornos de aprendizagem relacionados à escrita e expressão da linguagem. Os indivíduos com sintomas de TDAH avaliados neste estudo apresentaram perfil nutricional adequado para idade, sendo todos eutróficos e não foi encontrada associação de alterações nutricionais com a hiperatividade. Conclusão: Não houve associação entre sinais clínicos de TDAH e alteração no EEG, nem alterações do estado nutricional. Predomina o EEG alterado entre os meninos, sendo relatada entre eles, maior dificuldade quanto à leitura e à escrita...

Portal hypertension in schistosomiasis: pathophysiology and treatment

In heavily infected young patients, there is a "non-congestive" phase of the disease with splenomegaly which can improve after chemoterapy. A strong correlation between hepatosplenic form and worm burden in young patients has been repeatedly shown. The pattern of vascular intrhepatic lesions seems to depend on two mechanisms: (a) egg embolization, with a partial blocking of the portal vasculature; (b) the appearance of small portal collaterals along the intrahepatic portal sistem. The role played by hepatitis B virus (HBV) and C virus infections in the pathogenesis of liver lesions is variably considered. Selective arteriography shows a reduced diameter of hepatic artery with thin and arched branches outlining vascular gaps. A rich arterial network , as described in autopsy cases, is usually not seen in vivo, except after splenectomy or shunt surgery. An augmented hepatic arterial flow was demonstrated in infected animals. These facts suggest that the poor intrahepatic arterial vascularization demonstrated by selective arteriography in humans is due to a "functional deviation"of arterial blood to the splenic territory. The best results obtained in treatment of portal hypertension were: esophagogastric desvascularization and splenectomy (EGDS), although risk of rebleeding persists; classical (proximal) splenorenal shunt (SRS) should be abandoned; distal splenorenal shunt may complicate with hepatic encephalopaty, although later and in a lower percentage than in SRS. Propranolol is currently under investigation. In our Department, schistosomotic patients with esophageal varices bleeding are treated by EGDS and, if rebleeding occurs, by sclerosis of the varices

GB virus C/Hepatitis G virus and other putative hepatitis non A-E viruses

A identificacao dos virus responsaveis pela vasta maioria dos casos de hepatite (Virus das Hepatites A, B, C, D e E) foi realizada durante os ultimos 30 anos. Entretanto, existem ainda alguns casos epidemiologicamente relacionados com agentes infecciosos, nos quais nao se encontra nenhuma evidencia de infeccao por nenhum virus conhecido...

Schistosomiasis mansoni: immunodiagnosis aspects and search for an immunological marker related to therapeutic efficacy

The recent findings on immunodiagnosis of schistosomiasis mansoni have shown that purified Schistosoma mansoni antigens do not provide maximum positivity. Therefore, the authors suggest the use of semi-purified antigens for diagnostic purposes. So far, no serological marker for cured patients as shown by negative stool examination was found. However, a tendency of IgG antibody titre decrease was observed, when egg antigen was used.

Decay of antibody isotypes against early developmental stages of Schistosoma mansoni after treatment of schistosomiasis patients

Em pacientes com esquistossomose, säo encontrados anticorpos contra grande número de antigenos parasitários, e aqueles contra formas evolutivas jovens do parasita demonstraram que eram eficientes marcadores imunológicos para o diagnóstico da esquistossomose. Padröes de queda de anticorpos IgM e IgG contra cercaria e esquistossomulo foram aqui estudados, comparativamente aos dos anticorpos contra verme e ovo, em pacientes esquistossomoticos após quimioterapia, abordando aspectos soroepidemiologicos. Dados obtidos no estudo de 359 amostras de soros, pertencentes a pacientes infectados por Schistosoma mansoni, individuos näo infectados e pacientes acompanhados pos-tratamento por um periodo de 12 a 15 meses...

Gelatin particle indirect agglutination test for serodiagnosis of schistosomiasis: comparative study with enzyme-linked immunosorbent assay

Um novo teste sorologico, o teste de aglutinacao com particulas de gelatina (TAPG), foi utilizado para o diagnostico sorologico de esquistossomose mansonica. Esta tecnica mostra que a sensibilidade (90,6 por cento) e especificidade (97,8 por cento) chegam proximas do teste de enzima imunoensaio. O TAPG pode ser facil e rapidamente realizado sem equipamentos especializados usando particulas liofilizadas sensibilizadas com o antigeno. O teste mostrou ser tambem util em condicoes de campo para triagem em massa da infeccao pelo Schistosoma mansoni.

Evaluation of the enzyme-linked-immuno-electro-diffusion-assay (ELIEDA) for the diagnosis of Shistosoma mansoni infection with low worm burden

A tecnica de imunoprecipitacao ELIEDA (enzyme-linked-immuno-electro-difusion-assay)foi avaliada para fins diagnosticos de esquistossomose mansoni em pacientes com baixa carga parasitaria. Amostras de soros de 50 pacientes com exames de fezes positivo para S. mansoni (carga parasitaria < 600 por grama de fezes = opg) e 50 nao esquistossomoticos (30 com outras afeccoes e 20 normais) foram estudadas. Em pacientes com carga parasitaria acima de 200 opg, a sensibilidade da tecnica de ELIEDA, tanto para anticorpos com IgG como IgM , respectivamente 1,000 e 0,293, nao diferiu da observada para outras reacoes sorologicas, como a de hemoglutinacao...

Schistosoma mansoni circulating polysaccharide and protein antigens recognized by sheep antisera in patients with different clinical forms of schistosomiasis before and after treatment

Dois antissoros produzidos em carneiros, um dos quais contra a fracao polissacaridica (Po) e outro contra componentes proteicos (Pt) de vermes adultos de Schistosoma mansoni, foram avaliados quanto ao seu desempenho na deteccao de antigenos parasitarios circulantes em pacientes com diferentes formas ciclicas da esquistossomose mansonica, atraves de um ensaio imunoenzimatico, (ELISA). O primeiro antissoro revelava antigenos parasitarios no granuloma hepatico e o segundo, nos glomerulos renais de pacientes com esquistossomose mansonica, bem como em camundongos experimentalmente infectados pelo S. mansoni....

Comparison of serum hepatitis B virus replication markers in patients with chronic hepatitis B: studies on HBeAg/anti-HBe system, viral DNA polymerase and HBV-DNA

A detecçäo do genoma do HBV no soro por hibridizaçäo molecular é o mais sensível e específico marcador da replicaçäo e infectividade do HBV, sendo sua utilizaçäo proposta como técnica rotineira no acompanhamento de doenças relacionadas a este vírus. Comparando diferentes técnicas descritas, anteriormente, escolhemos a deposiçäo direta das amostras séricas sobre a membrana de nitrocelulose sob filtraçäo a vácuo, seguida de banhos desnaturantes e neutralisantes como mais prática e simples, com sensibilidade equivalente. O ensaio da DNA polimerase usando ácido fosfonofórmico como inibidor viral específico mostrou 86.8% de concordância com a detecçäo direta do DNA viral, sendo, portanto, uma alternativa viável no acompanhamento de pacientes com hepatite crônica B. Encontramos 19,2% das amostras AgHBe positivos sem outros marcadores de replicaçäo viral. Por outro lado, nenhuma amostra anti-HBe positiva teve HBV-DNA detectável. discordância entre dois sistemas foi extensamente descrita, e confirmamos pela primeira vez este fato em pacientes com hepatite crônica B em nosso país. Técnicas de biologia molecular säo, portanto, fundamentais na determinaçäo da replicaçäo viral em cada paciente

Pesquisa do antígeno polissacarídico do Schistosoma mansoni em soros de hamsters pela técnica de imunoeletroforese cruzada / Detection of circulating polysaccharide antigen of Schistosoma mansoni in sera of hamsters by crossed immunoelectrophoresis

A imunoeletroforese cruzada (IEC) foi utilizada para a detecçäo do antígeno polissacarídico circulante anódico (AgCA) do Schistosoma mansoni, livre e complexado, em soro de hamsters infectados. O AgCA foi também pesquisado em soros humanos de 7 pacientes na fase aguda e de 23 na fase crónica da infecçäo. Foram estabelecidas as condiçöes para isolamento e determinaçäo do AgCA complexado. A sensibilidade da técnica foi aumentada pela incorporaçäo de polietilenoglicol a 2% à agarose e realizaçäo da corrida eletroforética a 4-C. O AgCA livre foi detectado em 12 e o complexado em 30 dos 37 soros de hamsters analisados. Foi observada correlaçäo entre AgCA (livre e complexado) e carga parasitária. O AgCA näo foi detectado, nas condiçöes experimentais utilizadas, nas amostras de soro humano de 7 pacientes na fase aguda e de 23 na fase crônica da infecçäo

Predictive factors for response to lamivudine in chronic hepatitis B

BACKGROUND: Lamivudine has been shown to be an efficient drug for chronic hepatitis B (CHB) treatment. AIM: To investigate predictive factors of response, using a quantitative method with high sensitivity. METHODS: We carried out a prospective trial of lamivudine in 35 patients with CHB and evidence for viral replication, regardless to their HBeAg status. Lamivudine was given for 12 months at 300 mg daily and 150 mg thereafter. Response was considered when DNA was undetectable by PCR after 6 months of treatment. Viral replication was monitored by end-point dilution PCR. Mutation associated with resistance to lamivudine was detected by DNA sequencing in non-responder patients. RESULTS: Response was observed in 23/35 patients (65.7 per cent) but only in 5/15 (33.3 per cent) HBeAg positive patients. Only three pre-treatment variables were associated to low response: HBeAg (p = 0.006), high viral load (DNA-VHB > 3 x 10(6) copies/ml) (p = 0.004) and liver HBcAg (p = 0.0028). YMDD mutations were detected in 7/11 non-responder patients. CONCLUSIONS: HBeAg positive patients with high viral load show a high risk for developing drug resistance. On the other hand, HBeAg negative patients show a good response to lamivudine even with high viremia.

Long term follow-up and patterns of response of alt in patients with chronic hepatitis NANB/C treated with recombinant interferon-a

A resposta ao tratamento com interferon em pacientes com hepatite cronica NANB/C tem sido classificada como completa, parcial ou ausente, de acordo com o comportamento da alanino aminotransferase serica (ALT). Entretanto, uma observacao mais detalhada da atividade enzimatica tem mostrado que os padroes da resposta da ALT em pacientes com hepatite cronica NANB/C tratados com interferon alfa recombinante...

p53 immunostaining pattern in Brazilian patients with hepatocellular carcinoma

O carcinoma hepatocelular (CHC) é um importante tipo de câncer relacionado etiologicamente a alguns vírus, carcinógenos químicos e outros fatores ambientais que causam danos crônicos ao fígado em humanos. A freqüência de mutação do gene p53 em CHC é altamente heterogênea (0-52 por cento) nos diversos países. OBJETIVO: O objetivo deste estudo foi determinar, imuno-histologicamente, a freqüência da expressão anômala de p53 em CHCs em pacientes cirróticos versus não-cirróticos, bem como em displasia hepática e hiperplasia adenomatosa. Para isso, foram estudados 84 pacientes com carcinoma hepatocelular ou cirrose. RESULTADOS: Foram detectadas expressões do p53 alterado em 58,3 por cento dos pacientes com CHC graus III-IV, contrastando com os 22,2 por cento dos pacientes com CHC graus I-II (p = 0,02). Áreas não tumorais, tanto nas proximidades do CHC como nos 30 casos de cirrose não mostraram expressão nuclear alterada do p53, mesmo nas displasias ou hiperplasias adenomatosas. Quando se considerou HBV, HCV ou alcoolismo nos casos estudados, não se encontrou diferença significativa. CONCLUSÃO: A elevada freqüência de imuno-expressão de p53 nesta população é próxima à relatada na China e África, tornando necessárias outras pesquisas para explicar as diferenças com os CHC estudados na Europa e na América do Norte.

Detection of hepatitis B virus DNA by the polymerase chain reaction in anti-HBE positive chronic hepatitis B patients

A deteccao do DNA do Virus da Hepatite B pela Reacao em cadeia Polimerase (PCR) foi comparada com os outros marcadores sorologicos virais (AgHBs, AgHBe e anti-HBe) numa serie de 49 pacientes com hepatite cronica B, incluindo 12 que apresentaram clareamento espontaneo do AgHBs. Nenhum caso AgHBs negativo foi PCR positivo, mas 33/37 (89,2 por cento) dos casos AgHBs positivos foram PCR positivos (p<0,0001). Entre as amostras AgHBs positivas, 9 foram AgHBe positivas e anti-HBe negativas, todas elas PCR positivas....

Interferon in viral liver diseases: pharmalogical aspects

Descreveram-se os principais tipos de Interferon (IFN) fundamentais. Os IFN alfa, beta e gama foram comparados quanto a origem de açäo. Os principais tópicos analisados foram: receptores, vias metabolicas, proteinas induzidas pelo IFN, efeitos imunes, anticorpos anti-interferon e outros efeitos. Efeitos colaterais e farmacocinetica do IFN foram também analisados

Tratamento clínico da hipertensäo portal / Clinical treatment of portal hypertension

A revisäo dos trabalhos mais recentes sobre tratamento clínico da hipertensäo portal mostra que exitem ainda aspectos polêmicos a respeito do real valor das medidas clínicas utilizadas até o presente momento. Assim, no tratamento eletivo com propranolol, visando prevenir a recorrência hemorrágica, os resultados säo conflitantes, näo somente quando comparado a um grupo controle, como quando comparado a escleroterapia. Na vigência do sangramento, as drogas vasoconstritoras associadas ou näo as vasodilatadoras, apresentam eficácia semelhante ao tamponamento esôfago-gástrico por baläo. Além disso, ambos os métodos säo superiores ao tratamento clínico convencional. Do ponto de vista profilático há grande escassez de publicaçöes, porém três estudos controlados mostraram que o propranolol foi superior ao placebo. Há, contudo, necessidade urgente de maiores investigaçöes a este respeito

Schistosoma mansoni cercaria and schistosomulum antigens in serodiagnosis of schistosomiasis

Schistosoma mansoni cercaria and schistosomulum obtained in vitro were used in immunofluorescence (IF) tests and indirect hemagglutination (IHA) tests of 137 study sera, 44 from subjects infected with S. mansoni and 93 from healthy subjects residing outside áreas endemic for the disease. The results of these tests were compared with those obtained by testing the same sera using conventional adult worm antigen, and also with the initial clinical and parasitologic diagnoses of the 137 subjects providing the study sera. Regarding sera from acute versus chronic cases, IF testing of the acute sera consistently detected IgA antibodies along with IgM and IgG, the last two being found consistently in chronic sera. Also, the geometric mean of the IgM antibody titers found in the IF tets was higher for acute that for chronic sera. Excluding IF IgA, which was negative for chronic cases, the sensitivity of the other types of tests (IF IgG, IF IgM, and IHA) using cercaria and schistosomulum antigens, both under evaluation, ranged from 0.773 to 0.955, the specificity ranged from 0.957 to 1.000, the efficiency ranged from 0.927 to 0.985, the predective value of positives ranged from 0.909 to 1.000, and the predective value of negatives ranged from 0.903 to 0.979. No statistical differences were observed between these results and those obtained with conventional adult worm antigen. This suggests that cercaria and schistosomulum antigens, both of which can be produced more quickly and cheaply than adult worm antigen, could serve as reliable alternatives to adult worm antigen in the serodiagnosis of schistosomiasis mansoni