IFN-gamma expression is up-regulated by peripheral blood mononuclear cells (PBMC) from non-exposed dogs upon Leishmania chagasi promastigote stimulation in vitro.

While the response to Leishmania spp. is well characterized in mice and humans, much less is known concerning the canine immune response, particularly soon after exposure to the parasite. Early events are considered to be a determinant of infection outcome. To investigate the dog's early immune response to L. chagasi, an in vitro priming system (PIV) using dog naïve PBMC was established. Until now, dog PIV immune response to L. chagasi has not been assessed. We co-cultivated PBMC primarily stimulated with L. chagasi in vitro with autologous infected macrophages and found that IFN-gamma mRNA is up-regulated in these cells compared to control unstimulated cells. IL-4 and IL-10 mRNA expression by L. chagasi-stimulated PBMC was similar to control unstimulated PBMC when incubated with infected macrophages. Surprisingly, correlation studies showed that a lower IFN-gamma/IL-4 expression ratio correlated with a lower percentage of infection. We propose that the direct correlation between IFN-gamma/IL-4 ratio and parasite load is dependent on the higher correlation of both IFN-gamma and IL-4 expression with lower parasite infection. This PIV system was shown to be useful in evaluating the dog immune response to L. chagasi, and results indicate that a balance between IFN-gamma and IL-4 is associated with control of parasite infection in vitro.

Ki-67 is expressed in multiplying forms of Schistosoma mansoni, but not in snail host tissues.

Ki-67 is a protein expressed in the nucleus of several species during cell-division, being absent during the GO resting phase of the cellular cycle. During attempts to disclose mitosis in the so-called " amebocyte-producing organ " in Biomphalaria glabrata infected with Schistosoma mansoni, the parasite multiplying forms appeared strongly marked for Ki-67, while the snail tissues were completely negative. These data are worth registering to complement general data on Ki-67, and to help future studies on the relationship of the parasite and of its intermediate host.

Control of Mycobacterium fortuitum and Mycobacterium intracellulare infections with respect to distinct granuloma formations in livers of BALB/c mice

Mycobacterium fortuitum is a rapidly growing nontuberculous Mycobacterium that can cause a range of diseases in humans. Complications from M. fortuitum infection have been associated with numerous surgical procedures. A protective immune response against pathogenic mycobacterial infections is dependent on the granuloma formation. Within the granuloma, the macrophage effector response can inhibit bacterial replication and mediate the intracellular killing of bacteria. The granulomatous responses of BALB/c mice to rapidly and slowly growing mycobacteria were assessed in vivo and the bacterial loads in spleens and livers from M. fortuitum and Mycobacterium intracellulare-infected mice, as well as the number and size of granulomas in liver sections, were quantified. Bacterial loads were found to be approximately two times lower in M. fortuitum-infected mice than in M. intracellulare-infected mice and M. fortuitum-infected mice presented fewer granulomas compared to M. intracellulare-infected mice. These granulomas were characterized by the presence of Mac-1+ and CD4+ cells. Additionally, IFN-γmRNA expression was higher in the livers of M. fortuitum-infected mice than in those of M. intracellulare-infected mice. These data clearly show that mice are more capable of controlling an infection with M. fortuitum than M. intracellulare. This capacity is likely related to distinct granuloma formations in mice infected with M. fortuitum but not with M. intracellulare.

Ki-67 is expressed in multiplying forms of Schistosoma mansoni, but not in snail host tissues

Ki-67 is a protein expressed in the nucleus of several species during cell-division, being absent during the GO resting phase of the cellular cycle. During attempts to disclose mitosis in the so-called " amebocyte-producing organ " in Biomphalaria glabrata infected with Schistosoma mansoni, the parasite multiplying forms appeared strongly marked for Ki-67, while the snail tissues were completely negative. These data are worth registering to complement general data on Ki-67, and to help future studies on the relationship of the parasite and of its intermediate host.

Avaliação da expressão de osteopontina na infecção in vitro por leishmania sp / Evaluation of osteopontin expression during in vitro infection by leishmania sp

Este estudo teve como objetivos caracterizar a eco-epidemiologia da leishmaniose visceral americana (LVA) no município de São Vicente Férrer, identificar hospedeiros reservatórios silvestres e/ou domésticos envolvidos na manutenção da endemia, identificar a(s) espécies(s) de Leishmania e as espécies de flebotomíneos envolvidas na transmissão. Capturas de flebotomíneos foram realizadas entre dezembro de 2002 a novembro de 2003, através de capturas manuais utilizando capturador de Castro, armadilha de Shannon e armadilhas luminosas modelo CDC. Animais silvestres foram capturados com armadilhas do tipo Tomahawk no período de junho a dezembro de 2003. Um inquérito epidemiológico de prevalência da infecção e da doença foi realizado na população de cães através de biópsias da medula e coleta de sangue para a realização dos testes de RIFI e PCR, totalizando a freqüência de 33,3 por cento na localidade de Mundo Novo, e de 4,8 por cento na localidade de Mirim para RIFI e de dois casos positivos por PCR, um em cada localidade. Outro inquérito epidemiológico foi realizado na população humana das duas localidades em um total de 450 indivíduos, dos quais 68(37,6 por cento) foram positivos para IDRM na localidade de Mundo Novo e 47(17,4 por cento) na localidade de Mirim. Com o teste da RIFI, 17(26,2) foram positivos em Mundo Novo e 24 (52,2 por cento) em Mirim. Quatro amostras de Leishmania foram de cães e identificados como Leishmania (L.) chagasi, através de anticorpos monoclonais específicos. 23.156 exemplares de flebotomíneos foram coletados em resquícios de Mata Atlântica, domicílios e peridomicílios, dos quais Lutzomyia (Psychodopygus) complexa obteve predominância com 14.445 (62, 5 porcento) do total, seguido por L. migonei, com 7.677 (33, 2 por cento). L. longipalpis, vetor de L. chagasi, não foi encontrado nesta região. Um total de 60 mamíferos silvestres e sinantrópicos foram coletados, pertencentes a dez diferentes espécies. O marsupial Didelphis albiventris (timbu) e o roedor Nectomys squamipes (rato da água), foram positivos para Leishmania chagasi no teste de PCR. O desenvolvimento deste estudo possibilitou a caracterização de aspectos eco-epidemiológicos envolvidos na trasmissão da LVA nessa área da Zona da Mata, contibuindo para o conhecimento desta endemia em Pernambuco e na implementação de medidas de controle.

Caracterização dos leucócitos e da produção de quimiocinas envolvidas na resposta imuno-inflamatória in situ de camundongos CBA infectados com Leishmania major ou Leishmania amazonensis / Characterization of leukocytes and production of chemokines involved in immune-inflammatory response in situ of CBA mice infected with Leishmania major or Leishmania amazonensis

Camundongos CBA infectados com L. major ou L. amazonensis apresentam perfis morfológicos distintos de resposta tecidual, relacionados, respectivamente, com resistência ou susceptibilidade. O perfil Th1, de resistência, é caracterizado por um infiltrado mononuclear misto, com aumento do número de linfócitos, necrose fibrinóide e formação de granulomas que culmina com cura das lesões. O perfil Th2, de susceptibilidade, apresenta um infiltrado macrofágico difuso, monomórfico, com intenso parasitismo e áreas de necrose lítica que resulta na morte dos animais. Esses diferentes perfis histopatológicos são determinados pelas células efetoras da resposta imuno-inflamatória e por citocinas e quimiocinas. A caracterização da resposta imuno-inflamatória relacionada com infecção por diferentes espécies de Leishmania pode trazer informações importantes quanto a patogênese das mesmas e oferecer subsídios à sua modulação. Avaliamos comparativamente a infecção de camundongos CBA com L. major (Lm), L. amazonensis (La), em diferentes períodos, em relação à constituição celular nos linfonodos popliteos e a caracterização do infiltrado inflamatório das lesões através das técnicas de imunohistoquímica e RT-PCR. Nos linfonodos de drenagem das lesões foi observado aumento no número de células MAC-1+ nos grupos infectados. No grupo La houve aumento no número de células T CD4+ e S, enquanto no grupo Lm houve aumento crescente na quantidade de células T CD8+. Nos infiltrados inflamatórios das lesões, foi observada uma maior expressão de RNAm para as moléculas TNF-a, MIG e CRG-2 no grupo Lm. Somente a expressão de RNAm para IL-4, detectada na fase tardia, foi maior...