RESUMEN
RATIONALE: Central dogma suggests that rifampicin resistance in Mycobacterium tuberculosis develops solely through rpoB gene mutations. OBJECTIVE: To determine whether rifampicin induces efflux pumps activation in rifampicin resistant M. tuberculosis strains thereby defining rifampicin resistance levels and reducing ofloxacin susceptibility. METHODS: Rifampicin and/or ofloxacin minimum inhibitory concentrations (MICs) were determined in rifampicin resistant strains by culture in BACTEC 12B medium. Verapamil and reserpine were included to determine their effect on rifampicin and ofloxacin susceptibility. RT-qPCR was applied to assess expression of efflux pump/transporter genes after rifampicin exposure. To determine whether verapamil could restore susceptibility to first-line drugs, BALB/c mice were infected with a MDR-TB strain and treated with first-line drugs with/without verapamil. MEASUREMENTS AND MAIN FINDINGS: Rifampicin MICs varied independently of rpoB mutation and genetic background. Addition reserpine and verapamil significantly restored rifampicin susceptibility (p = 0.0000). RT-qPCR demonstrated that rifampicin induced differential expression of efflux/transporter genes in MDR-TB isolates. Incubation of rifampicin mono-resistant strains in rifampicin (2 µg/ml) for 7 days induced ofloxacin resistance (MIC > 2 µg/ml) in strains with an rpoB531 mutation. Ofloxacin susceptibility was restored by exposure to efflux pump inhibitors. Studies in BALB/c mice showed that verapamil in combination with first-line drugs significantly reduced pulmonary CFUs after 1 and 2 months treatment (p < 0.05). CONCLUSION: Exposure of rifampicin resistant M. tuberculosis strains to rifampicin can potentially compromise the efficacy of the second-line treatment regimens containing ofloxacin, thereby emphasising the need for rapid diagnostics to guide treatment. Efflux pump inhibitors have the potential to improve the efficacy of anti-tuberculosis drug treatment.
Asunto(s)
Antibacterianos/farmacología , Antibióticos Antituberculosos/farmacología , Ofloxacino/farmacología , Rifampin/farmacología , Tuberculosis Resistente a Múltiples Medicamentos/tratamiento farmacológico , Inhibidores de Captación Adrenérgica/farmacología , Animales , Proteínas Bacterianas/efectos de los fármacos , Proteínas Bacterianas/genética , Bloqueadores de los Canales de Calcio/farmacología , Técnicas de Cultivo de Célula , ARN Polimerasas Dirigidas por ADN , Modelos Animales de Enfermedad , Ratones , Ratones Endogámicos BALB C , Pruebas de Sensibilidad Microbiana , Mycobacterium tuberculosis/efectos de los fármacos , Mycobacterium tuberculosis/genética , Reserpina/farmacología , Reacción en Cadena de la Polimerasa de Transcriptasa Inversa , Tuberculosis Resistente a Múltiples Medicamentos/genética , Verapamilo/farmacologíaRESUMEN
Due to the emergence of multi-drug resistant Mycobacterium tuberculosis strains, there is an urgent need to search for new antimycobacterial drugs. The present work describes the bioactivity-guided fractionation of Chamaedora tepejilote hexane extract which led to the isolation and the characterization of squalene, farnesol, methylic ester of hexadecanoic acid, beta-sitosterol and ursolic acid. Activity against Mycobacterium tuberculosis H37Rv, determined by radiorespirometric Bactec assay, showed ursolic acid, squalene and farnesol to produce a M. tuberculosis growth inhibition of 99% at a concentration of 100 microg/mL.
Asunto(s)
Antituberculosos/farmacología , Resistencia a Múltiples Medicamentos , Magnoliopsida , Mycobacterium tuberculosis/efectos de los fármacos , Fitoterapia , Extractos Vegetales/farmacología , Antituberculosos/administración & dosificación , Antituberculosos/uso terapéutico , Humanos , Pruebas de Sensibilidad Microbiana , Mycobacterium tuberculosis/clasificación , Extractos Vegetales/administración & dosificación , Extractos Vegetales/uso terapéutico , Hojas de la PlantaRESUMEN
Se realiza un estudio en 84 pacientes de un consultorio del médico de la familia del municipio Ciego de Avila con sintomatología clínica de parasitosis intestinal, con el propósito de valorar los parásitos intestinales que más afectan la población en estudio, la posible relación de estos con las condiciones higiénico sanitarias y determinar la utilidad de las charlas educativas en la población afectada. Para el mismo se procedió a tomarle dos muestras de heces fecales a cada paciente en días alternos. Para el diagnóstico se utilizó el método directo y la técnica de Ritchie. Se concluyó que la Giardia lamblial y Entamoeba histolytica son los parásitos intestinales que más afectaron la población estudiada y las deficiencias en el suministro de agua y mala calidad de esta influyeron notablemente en la presencia de los parásitos. La quimioterapia específica y charlas educativas contribuyeron a disminuir las parasitosis a un 15,4 porciento, mientras en los casos donde sólo se aplicó la quimioterapia específica la disminución fue de un 40 porciento.
Asunto(s)
Intestinos , ParasitologíaRESUMEN
Se trabajaron 2180 muestras de heces fecales de niños que impresionaban amebiasis intestinal sintomática en un período de 3 años. Los que resultaron positivos a Entamoeba Histolytica se les administró metronidazol 30 mg/kg de peso 3 veces al día durante 10 días. Se repitió el examen a los 21 días y los que se mantuvieron positivos se les realizó el examen gastroenterológico con el objetivo de descartar lesiones gastrointestinales sangrantes y una vez obtenidos los resultados se practicó un test de sangre oculta con el objetivo de descartar Entamoeba dispar...