Genetic variability of Leishmania (Leishmania) infantum causing human visceral leishmaniasis in the Southeastern Brazil

ABSTRACT Leishmania infantum is a protozoan that causes visceral leishmaniasis (VL) in the Americas and some regions of Europe. The disease is mainly characterized by hepatosplenomegaly and fever, and can be fatal. Factors related to the host and parasite can contribute to the transmission of Leishmania and the clinical outcome. The intraspecific genetic variability of L. infantum strains may be one of these factors. In this study, we evaluated the genetic variability of L. infantum obtained from bone marrow smear slides from patients in the Sao Paulo State, Brazil. For this, the minicircle of the kDNA hypervariable region was used as target by Sanger sequencing. By analyzing the similarity of the nucleotides and the maximum likelihood tree (Fasttree), we observed a high similarity (98%) among samples. Moreover, we identified four different profiles of L. infantum. In conclusion, L. infantum strains from Sao Paulo State, Brazil, showed low diversity measured by minicircle of the kDNA hypervariable region.

Unusual manifestation of genital cutaneous leishmaniasis in an immunocompetent patient from São Paulo, Brazil: A case report

Abstract A 31-year-old male patient developed an ulcer on the glans penis that evolved for three months without healing. We diagnosed it as leishmaniasis using polymerase chain reaction. No immunosuppression or associated diseases were observed. The patient was treated with meglumine antimoniate that cured the lesion in a month post-treatment. Here, we report this case of cutaneous leishmaniasis lesion at the unusual location of glans penis in an immunocompetent individual. The lesion likely developed due to the bite of a vector, highlighting the need for considering cutaneous leishmaniasis among differential diagnosis of sexually transmitted diseases in areas endemic for leishmaniasis.

Reactivation of cutaneous and mucocutaneous tegumentary leishmaniasis in rheumatoid arthritis patients: an emerging problem?

ABSTRACT Rheumatoid arthritis (RA) is a chronic condition that is frequent in patients living in tropical areas exposed to leishmaniasis. RA therapy involves immunosuppressant drugs such as methotrexate (MTX), monoclonal antibodies (mAbs) and prednisone. We report an unusual presentation of cutaneous (CL) or mucocutaneous leishmaniasis (ML) in RA patients from an endemic area of leishmaniasis. A 51-year-old woman noted a cutaneous ulcer on her left ankle during MTX and prednisone RA therapy. Initially diagnosed as a venous stasis ulcer, the aspirate of the injury revealed the presence of Leishmania DNA. A 73-year-old woman presenting non-ulcerated, infiltrated and painful erythematous nodules inside her nostrils while receiving MTX, anti-TNF mAb, and prednisone for RA, had also the aspirate of injuries showing the presence of Leishmania DNA. Both patients healed after the therapy with liposomal amphotericin. The RA therapy has changed to low-dose prednisone, without further reactivation episodes. Both cases suggest that CL or ML can reactivate after administration of an immunosuppressant for RA treatment. Therefore, immunosuppressive treatments for RA should be carefully prescribed in patients from endemic areas or with a history of CL and ML.

USEFULNESS OF kDNA PCR IN THE DIAGNOSIS OF VISCERAL LEISHMANIASIS REACTIVATION IN CO-INFECTED PATIENTS / Utilidade da kDNA PCR no diagnostico de reativacao de leishmaniose visceral em pacientes co-infectados sintomaticos

SUMMARY It is important to develop new methods for diagnosing relapses in the co-infection of visceral leishmaniasis (VL) and HIV to enable earlier detection using less invasive methods. We report a case of a co-infected patient who had relapses after VL treatment, where the qualitative kDNA PCR showed a good performance. The kDNA PCR seems to be a useful tool for diagnosing VL and may be a good marker for predicting VL relapses after treatment of co-infected patients with clinical symptoms of the disease. .

RESUMO É importante a pesquisa de novos métodos laboratoriais para o diagnóstico de recidivas em casos de co-infecção leishmaniose visceral (LV) e vírus da imunodeficiência humana (HIV), que permitam o diagnóstico precoce das recidivas, utilizando métodos menos invasivos. Descrevemos aqui, o caso de paciente co-infectada que apresentou recidivas após o tratamento da LV e onde a PCR qualitativa demonstrou bom desempenho. A kDNA PCR parece ser ferramenta útil para o diagnóstico de recidivas de LV após o tratamento em pacientes co-infectados com sintomas clínicos da doença. .

Análise de técnicas parasitológicas utilizadas no seguimento de pacientes com doença de chagas e tratados por meio do transplante cardíaco / Analysis of parasitological techniques in the monitoring of patients with Chagas disease and treated by heart transplantation

Este estudo teve como objetivo analisar a função da hemocultura, do xenodiagnóstico e do creme leucocitário no acompanhamento e diagnóstico de possível reativação em pacientescrônicos tratados por meio do transplante de coração. Foram examinadas 70 amostras das quais15,7por cento (11/70) se mostraram positivas, sendo 8,5por cento (6/70) na hemocultura e 12,8por cento (9/70) noxenodiagnóstico. Apresentaram concordância nos dois métodos quatro amostras (36,36por cento). Nãohouve positividade no creme leucocitário. Os achados corroboram informações sobre a superiorsensibilidade do xenodiagnóstico em relação à hemocultura. A amostra do paciente 20, positiva noxenodiagnóstico (décimo quinto dia) e que apresentou miocardite com ninhos de amastigotas 15 dias antes dadetecção laboratorial, sinaliza a importância da leitura precoce dos exames parasitológicos comopreditivos de possível reativação da doença.

Conservação de oocistos de Cryptosporidium em fezes para exame parasitológico / Preservation of Cryptosporidium oocystis in fecal specimens for parasitological examination

Por meio de dispositivo facilmente acessível que contém formol a 10 por cento tamponado, dispensa refrigeraçäo, permite execuçäo de maneira higiênica, evita o mau odor e garante biossegurança é possível evidenciar satisfatoriamente oocistos de Cryptosporidium em fezes, sendo utilizado o método de Kinyoun. O sistema possibilita conservaçäo adequada até durante período prolongado, facilitando a execuçäo de tarefas assistências e epidemiológicas

Avaliaçäo da atividade antiparasitária do alopurinol, referente ao Trypanosoma cruzi, em sistema experimental que utiliza triatomíneos infectados / Evaluation of antiparasitic activity of allopurinol, against Trypanosoma cruzi, in experimental system using infected triatomines

Foi avaliada a atividade antiparasitaria do alopurinol, referente ao Trypanosoma cruzi, atraves de procedimento que depende da utilizacao de triatomineos infectados. De acordo com a metodologia usada, o formacso nao eliminou o protozoario do tubo digestivo dos insetos. Nao ocorreu, portanto, obtencao de novo subsidio para melhor entendimento da posicao do alopurinol no contexto do tratamento etiologico da infeccao pelo T. cruzi, porquanto ela continua em foco, se bem que eivada de divergencias e contradicoes

Trypanosoma cruzi parasitemia observed in immunocompromised patients: the importance of the artificial xenodiagnosis

Trypanosoma cruzi parasitemia observed in immunocompromised patients (transplant or positive HIV) occurred more frequently by the artificial xenodiagnosis method (10/38) compared with hemoculture (2/38), given the same quantity of blood. Other ways of diagnosis, like mice inoculation (5/38), QBC and buffy coat (2/38), were evaluated also. This result showed the importance of the artificial xenodiagnosis. The other techniques increased only one more patient positive

Avaliaçäo da eficácia da azitromicina e da pirimetamina, usadas isolada ou associadamente, no tratamento de infecçäo experimental de camundongos pelo Toxoplasma gondii / Evaluation of the efficacy of azithromycin and pyrimethamine, alone or in combination, for the treatment of experimental infection of mice with Toxoplasma gondii

Foi comprovada a eficácia da azitromicina e da pirimetamina no tratamento da infecçäo experimental de camundongos pelo Toxoplasma gondii. Houve administraçäo cotidiana, pela via oral de 200mg/kg e 12,5mg/kg, respectivamente durante dez dias. O uso dos medicamentos ocorreu mediante associaçäo ou näo e o emprego concomitante proporcionou o melhor resultado e convirá efetuar investigaçäo semelhante com cepa cistogênica do parasita

Blastocistose: controvérsias e indefinições / Blastocystosis: controversy and indefinedness

Blastocistose é a infecçäo causada pelo Blastocystis hominis. Está relacionada com várias controvérsias e indefinições, sem dúvida muito importantes sobretudo pelas implicações médico-assistenciais que suscitam. A propósito, pendência expressiva diz respeito à patogenicidade do referido protozoário, que precisa ser categoricamente definida. Ao lado dessa particularidade outros assuntos exigem elucidações através de pesquisas bem conduzidas, para que a blastocistose fique devidamente situada no contexto da saúde pública. Aspecto também digno de atençäo é o diagnóstico pelo exame parasitológico de fezes, necessariamente executável por meio de métodos adequados, como o direto e os permanentes, exemplificados pelos que usam a a hematoxilina férrica ou a tionina. O emprego de técnicas impróprias propicia resultados falsos-negativos, conturbando o aconselhável bom conhecimento da real participaçäo do microrganismo em questäo

Human cyclosporiasis diagnosis: report of a case in Sao Paulo, SP, Brazil

E relatado o diagnostico de ciclosporiase humana em Sao Paulo, SP, Brasil. Cyclospora cayetanensis foi encontrada nas fezes de um individuo atraves de exame pelo metodo de coloracao de Kinyoun modificado, com posterior esporulacao em dicromato de potassio a 2,5 por cento. Esta verificacao deve estimular a necessidade de considerar a ciclosporiase como eventual causa de disturbios gastrointestinais no pais, podendo ela ser reconhecida ate mesmo por meio de tecnica razoavelmente simples. Foi ainda lembrado que esta parasitose vem adquirindo expressividade sobretudo pelo fato de nao raramente acometer imunodeprimidos, agora cada vez mais numerosos em especial como decorrencia da infeccao pelo virus da imunodeficiencia humana (HIV), que causa a sindrome da imunodeficiencia adquirida (AIDS)

A survey of congenital Chagas' disease, carried out at three Health Institutions in São Paulo City, Brazil

The congenital transmission of ChagasÆ disease was evaluated in 57 pregnant women with ChagasÆ disease and their 58 offspring. The patients were selected from three Health Institutions in São Paulo City. The maternal clinical forms of ChagasÆ disease were: indeterminate (47.4 percent), cardiac (43.8 percent) and digestive (8.8 percent); 55 were born in endemic areas and two in São Paulo City. The transmission of Chagas disease at fetal level was confirmed in three (5.17 percent) of the 58 cases studied and one probably case of congenital ChagasÆ disease. Two infected infants were born to chagasic women with HIV infection and were diagnosed by parasitolological assays (microhematocrit, quantitative buffy coat-QBC or artificial xenodiagnosis). In both cases the placenta revealed T. cruzi and HIV p24 antigens detected by immunohistochemistry. In one case, a 14-week old abortus, the diagnosis of congenital T. cruzi infection was confirmed by immunohistochemistry. The other probable infection, a 30-week old stillborn, the parasites were found in the placenta and umbilical cord. The Western blot method using trypomastigote excreted/secreted antigens of T. cruzi (TESA) was positive for IgG antibodies in 54/55 newborns and for IgM in 1/55 newborns. One of the two newborns with circulating parasites had no detectable IgG or IgM antibodies. The assessment of IgG antibodies in the sera of pregnant women and their newborns was performed by ELISA using two different T. cruzi antigens: an alkaline extract of epimastigotes (EAE) and trypomastigote excreted/secreted antigens (TESA). The analysis showed a linear correlation between maternal and newborn IgG antibody titers at birth

Observaçöes sobre a viabilidade do Trypanosoma cruzi no caldo da cana / Viability of Trypanosoma cruzi in sugar cane juice

Em Catolé do Rocha (Estado da Paraíba, Brasil) Várias pessoas foram concomitantemmente acometidas de doença de Chagas, em fase aguda. A propósito desse evento, houve cogitaçäo de que o Trypanosoma cruzi foi veiculado pela via digestiva, através de ingestäo de caldo de cana acidentalmente contaminado. Com o presente estudo, verificamos que o parasita permaneceu viável, durante quatro horas, no líquido em questäo mantido em temperatura ambiente. Ao mesmo tempo, cocmprovamos que após uma hora ele pôde promover infecçäo em camundongo ao ser administrado por meio de sonda gástrica, renovando o interesse já demonstrado quanto a esse mecanismo alternativo de transmissäo

Human cryptosporidiosis: detection of specific antibodies in the serum by an indirect immunofluorescence

Utilizando a técnica de imunofluorescência indireta, foram demonstradas imunoglobulinas G e M, no soro humano, contra o Cryptosporidium, coccídeo implicado recentemente como agente de doença intestinal humana, principalmente em pacientes imunocomprometidos. Foi obtida positividade de 62 por cento para imunoglobulinas G e M nos soros das crianças imunocompetentes com oocistos nas fezes, e, respectivamente, 20 por cento e 40 por cento, nos soros das crianças sem oocistos. Nos pacientes adultos, com o vírus da imunodeficiência humana e excreçäo fecal do parasita, foram encontrados índices de positividade de 57 por cento da IgG mas apenas 2 por cento para IgM e aqueles com excreçäo näo determinada apresentaram 23 por cento da IgG. Crianças com o vírus da imunodeficiência humana, apresentaram apenas 14 por cento da IgG e foram negativas quanto à IgM. Os resultados apontaram para a utilidade do teste, associado a outras técnicas parasitológicas, em estudos populacionais retrospectivos ou diagnósticos na infecçäo aguda e, ainda, que a resposta imune humoral a este protozoário necessita de maiores investigaçöes, nos pacientes imunocomprometidos, principalmente crianças

Pesquisa da proteína 24 do vírus da imunodeficiência humana (HIV) nas fezes de triatomíneos alimentados em pacientes com AIDS / Evaluation of presence of protein 24 from HIV in feces of Triatoma infestans fed blood from HIV positive patients

Verifica se pode haver eliminaçäo da proteína p24, antígeno que é um dos marcadores da infecçäo pelo HIV, pelas fezes de triatomíneos. Foi avaliado o possível risco de contaminaçäo por parte de profissionais que exercem atividades laboratoriais relacionadas aos triatomíneos, e também verificado o eventual mecanismo de disseminaçäo do HIV. Os triatomíneos (Triatoma infestans) alimentaram-se com sangue de 23 pacientes acometidos de AIDS e nos quais estava presente a p24. As fezes desses insetos foram examinadas 24 e 48 horas depois como tentativas de evidenciar a presença do antígeno. As pesquisas da p24 sempre ocorreram por meio de técnica imunoenzimática. Em nenhuma das ocasiöes sucedeu detecçäo da p24. De acordo com a metodologia adotada o objetivo pôde ser alcançado, no sentido de mostrar que a eliminaçäo da p24 nunca aconteceu. Talvez outras formas de agir revelem fatos diferentes e subsidiem o que se conhece quanto aos riscos de veiculaçäo do HIV

Comparação da reação em cadeia da polimerase com o exame microscópio na detecção do Trypanosoma cruzi em amostras procedentes do trato digestório do Triatoma infestans / Comparison of polymerase chain reaction with microscopic examination to detect Trypanosoma cruzi in Triatoma infestans digestive tract samples

O presente estudo comparou a PCR com o exame microscópico (EM) na detecção do T. cruzi em amostras do trato digestório do T. infestans, do 1º ao 5º, 10º, 15º, 20º, 25º, 30º e 60º dia, após repasto sanguíneo em camundongos Balb/C infectados pelo T. cruzi, divididos em grupos de alta e baixa parasitemia. Concluiu-se que a PCR apresentou vantagens em termos diagnósticos para a doença de Chagas quando comparada ao EM, em 10 dos 11 tempos estudados no grupo de alta parasitemia, e em todos os tempos na baixa parasitemia. O diagnóstico precoce na baixa parasitemia é de relevância clínica já que poderá influenciar o prognóstico dos pacientes imunossuprimidos com reativação da doença de Chagas / Detection of T. cruzi in T. infestans digestive tract samples was compared by PCR and microscopic examination (ME) on the 1st to 5th, 10th, 15th, 20th, 25th, 30th and 60th day after feeding in Balb/C mice infected by T. cruzi, and divided in two groups: with high parasitemia and with low parasitemia. PCR presented vantages to the Chagas’ disease diagnosis when compared with EM in 10 of 11 times in high parasitemia, and in all times in low parasitemia. Earlier diagnosis in low parasitemia model is of clinical relevance since may influence prognosis of immunosupressed patients in reactivation of Chagas’ disease...

Estudo sobre eventual influencia do estimulo para producao de macrofagos, por meio da proteose-peptona, na infeccao experimental de camundongos pelo Plasmodium berghei / Study about eventual influence of macrophage stimulation by means of proteose-peptone in experimental infection caused by Plasmodium berghei in mice

A disponibilidade de modelo experimental, baseado na infeccao de camundongos pelo Plasmodium berghei, permitiu a realizacao do presente estudo, no qual procurou-se verificar possivel diminuicao da parasitemia e consequente alteracao quanto a mortalidade como decorrencia de exacerbacao macrofagica inespecifica, apos estimulo por meio de proteose-peptona a 10 por cento. Os resultados nao demonstraram a cogitada acao sobre os protozoarios, mantendo-se o nivel de parasitemia e a mortalidade proximos ao verificado no grupo de animais infectados, sem participacao do indutor da producao de macrofagos. Assim, pelo menos de acordo com a metodologia empregada, nao ocorreu a contencao da protozoose, sugerida por informacoes registradas em publicacoes anteriores.

Avaliaçäo da transmissäo congênita e por aleitamento materno do Plasmodium berghei em camundongos "Swiss" / Congenital transmission and by nursing of Plasmodium berghei in \"Swiss\" mice

In this study we sought to evaluate the congenital and maternal suckling transmission of the Plasmodium berghei, in Swiss mice, after pregnant females were infected, as an attempt to cooperate in the improvement of the understanding of these questions, taking account findings from the literature. The results obtained confirmed the existence of an increase in stillbirth, abortions and retardation of the infants growth. Transmission through maternal suckling proved to be absent. It was also possible to demonstrate the uncommon transmission of the parasite from the infected females to the infants, but, it was not possible to demonstrate whether the transmission occurred through transplacental passage or at the time of childbirth.