Tissue-engineered autologous vaginal organs in patients: a pilot cohort study.

BACKGROUND: Several disorders might require vaginal reconstruction, such as congenital abnormalities, injury, or cancer. Reconstructive techniques for which non-vaginal tissue is used can be associated with complications. We assessed the use of engineered vaginal organs in four patients with vaginal aplasia caused by Mayer-Rokitansky-Küster-Hauser syndrome (MRKHS). METHODS: We invited to participate four consecutive patients who presented over a 3-year period with congenital vaginal aplasia due to MRKHS. Patients were aged 13-18 years. We obtained a vulvar biopsy of autologous tissue from every patient. We cultured, expanded, and seeded epithelial and muscle cells onto biodegradable scaffolds. The organs were constructed and allowed to mature in an incubator in a facility approved for human-tissue manufacturing. We used a perineal approach to surgically implant these organs. We recorded history, physical examination, vaginoscopy, serial tissue biopsies, MRIs, and self-administered Female Sexual Function Index questionnaire results for all patients, with a follow-up of up to 8 years. FINDINGS: We noted no long-term postoperative surgical complications. Yearly serial biopsies showed a tri-layered structure, consisting of an epithelial cell-lined lumen surrounded by matrix and muscle, with expected components of vaginal tissue present. Immunohistochemical analysis confirmed the presence of phenotypically normal smooth muscle and epithelia. The MRIs, which showed the extent of the vaginal aplasia before surgery, showed the engineered organs and the absence of abnormalities after surgery, which was confirmed with yearly vaginoscopy. A validated self-administered Female Sexual Function Index questionnaire showed variables in the normal range in all areas tested, such as desire, arousal, lubrication, orgasm, satisfaction, and painless intercourse. INTERPRETATION: Vaginal organs, engineered from the patient's own cells and implanted, showed normal structural and functional variables with a follow-up of up to 8 years. These technologies could be useful in patients requiring vaginal reconstruction. FUNDING: Wake Forest University and Hospital Infantil de México Federico Gómez.

Effect of a plasma synthesized polypyrrole coverage on polylactic acid/hydroxyapatite scaffolds for bone tissue engineering.

Composite biomaterials are solids that contain two or more different materials, combining the properties of their components to restore or improve the function of tissues. In this study, we report the generation of electrospun matrices with osteoconductive properties and porosity using the combination of a biodegradable polyester, polylactic acid (PLA), and hydroxyapatite (HA). Additionally, we report the effects of modifying these matrices through plasma polymerization of pyrrole on the growth and osteogenic differentiation of rabbit bone marrow stem cells. Cells were isolated, seeded and cultured on biomaterials for periods between 7 and 28 days. The matrices we obtained were formed by nano and microfibers containing up to 35.7 wt% HA, presenting a variety of apparent pore sizes to allow for the passage of nutrients to bone cells. Scanning electron microscopy showed that the fibers were coated with polypyrrole doped with iodine, and MTT assay demonstrated this increased cell proliferation and significantly improved cell viability due to the adhesive properties of the polymer. Our results show that PLA/HA/Pyrrole/Iodine matrices are favorable for bone tissue engineering.

Prospective Study in Children with Complicated Urinary Tract Infection Treated with Autologous Bacterial Lysates.

Antimicrobial bacteria resistance is an important problem in children with recurrent urinary tract infections (rUTI), thus it is crucial to search for alternative therapies. Autologous bacterial lysates (ABL) may be a potential treatment for rUTI. Twenty-seven children with rUTI were evaluated for one year, urine and stool cultures were performed, 10 colonies of each culture were selected and those identified as Escherichia coli were characterized by serology. For patients who presented ≥105 UFC/mL, an ABL was manufactured and administered orally (1 mL/day) for a month. Twelve children were monitored for ≥1-year, 218 urine and 11 stool samples were analyzed. E. coli (80.5%) was the main bacteria isolated from urine and feces (72%). E. coli of classical urinary serotypes (UPEC), O25:H4, O75:HNM, and O9:HNM were identified in patients with persistent urinary infection (pUTI). In 54% of patients treated with ABL, the absence of bacteria was observed in urine samples after 3 months of treatment, 42% of these remained without UTI between 10-12 months. It was observed that the use of ABL controlled the infection for almost 1 year in more than 60% of the children. We consider it necessary to develop a polyvalent immunogen for the treatment and control of rUTI.

Tissue engineered testicular prostheses with prolonged testosterone release.

PURPOSE: Bilateral anorchia, either congenital or acquired, often requires testicular prostheses placement and testosterone supplementation. Several types of testosterone compounds and various modes of hormone delivery are currently used clinically, however, their pharmacokinetic properties are not ideal. In this study, we explored the possibility of creating hormone releasing testicular prostheses that could continuously supply and maintain physiologic levels of testosterone in vivo over time. METHODS: Chondrocytes, harvested from bovine articular cartilage, were seeded on testicular shaped polymer scaffolds at a concentration of 100 x 10(6) ml(-1). The scaffolds were maintained in a bioreactor for 4 weeks to form cartilage tissue. Subsequently, testosterone enanthate (100 microg) was injected into the central hollow space of each testicular prosthesis, and maintained for 40 weeks in culture. A sample of the medium was collected every 2 days for testosterone assays. Another group of ex vivo engineered testicular prostheses was implanted into the scrotal space of castrated athymic mice (n = 10). Intratesticular injection of testosterone enanthate was made into each prosthesis at a concentration of 100 microg. Control groups consisted of animals with castration only (n = 8) and sham operations (n = 5). Testosterone levels were measured prior and 2 weeks after castration, 1 day after testosterone administration, and weekly up to 14 weeks. The engineered testicular prostheses were retrieved at sacrifice for histomorphological and immunocytochemical analyses. RESULTS: Milky white cartilage testicular protheses were formed by 4 weeks. The ex vivo prostheses showed an initial burst effect of testosterone followed by a broad plateau for 16 weeks (>500 ng/dl) and a decreased level of testosterone until 40 weeks. The testosterone levels were physiologic throughout 40 weeks and the entire testosterone released was calculated as 60% of the injected volume. The circulating testosterone levels in the protheses implanted animals demonstrated a maximum peak on day 1 and a continued physiologic range during the entire study period. Histologically, the retrieved testicular implants showed mature chondrocytes with a hollow center in each prosthesis. CONCLUSION: This study demonstrates that engineered cartilage testis can be created in bioreactors, can be implanted in vivo, and can release testosterone for a prolonged period. Furthermore, the levels of testosterone release can be maintained within the physiologic range. Periodic reinjection may potentially provide permanent physiologic hormonal replacement. This novel technology may be beneficial for patients who require testicular prostheses and chronic hormone supplementation.

Valvas de la uretra posterior (análisis de 35 casos) / Posterior urethra valves (analysis of 35 cases)

Se revisó el tratamiento efectuado en el Hospital de pediatría del Centro Médico Nacional de Occidente, I.M.S.S., Guadalajara, Jalisco, México, de 35 pacientes con valvas de uretra posterior. Los 35 pacientes se trataron dentro del periodo comprendido entre febrero de 1987 y abril de 1995. Para determinar la gravedad y el pronóstico de esta patología se utilizó el criterio por B. Churchill, que clasifica a estos casos en pacientes con pronóstico favorable cuando existen productos azoados normales, no hay reflujo vesicouretral o unilateral ni displasia, y con pronóstico desfavorable, pacientes con productos azoados elevados, reflujo vesicoureteral bilateral, ureterectasia grave y displasia renal. La edad de los pacientes varió entre el nacimiento y los 12 años, con promedio de 3.3 años. La principal manifestación fue la infección de vías urinarias en 85 por ciento de los pacientes, seguida por alteraciones en la micción en 6 por ciento, y retención aguda de orina en 3 por ciento. El diagnóstico se estableció con cistoureterograma muccional en 100 por ciento de los casos e informó acerca del reflujo. Ecosonograma, urograma y el gamagrama renal establecieron el estado de las vías urinarias superiores. Diez y nueve pacientes (54 por ciento tuvieron pronóstico favorable y su tratamiento consistió en resección primaria de valvas en 13 y vesicostomía en seis. Sólo dos pacientes requirieron reimplantación subsecuente, y los 19 pacientes se encontraron estables cuando se redactaba este informe. Tuvieron pronóstico desfavorable 16 pacientes (46 por ciento). De ellos 14 desarrollaron reflujo, ocho bilateral y seis unilateral. Seis pacientes tuvieron megauréter, ocho bilateral y seis unilateral. Seis pacientes tuvieron megauréter obstructivo y en dos de ellos fue bilateral. Este grupo se trató con derivación urinaria (14 pacientes) o resección primaria de valvas (dos pacientes). Estos pacientes requirieron varios procedimientos reconstructivos: reimplantación vesicoureteral cinco, transureteroureteroanastomosis dos, transureteroureteroanastomosis más aumento vesical dos, y nefroureterectomía de riñones unilaterales no funcionales los últimos siete pacientes (20 por ciento). De estos 16 pacientes, ocho se encuentran en insuficiencia renal crónica progresiva y, probablemente, requerirán transplante renal a largo plazo. Cabe concluir que las valvas de uretra posterior son un defecto congénito con una forma de presentación clínica. En los casos leves o moderados...

Uso de laparsocopia en el manejo de gónada no palpaples y remanentes de ductos Müllerianos en un masculino con disgenecia gonadal mixta / Laparoscopy in management of the gonadal dysgenesis mixed and persistent Müllerian duct remanents

Introducción. La ablación de gónadas intraabdominales y remanentes Müllerinos está indicada en casos de pacientes con ambigüedad de genitales a los cuales se decidió la asignación al sexo masculino. Existen pocos reportes relacionados con la excisión laparoscópica de gónadas y restos Müllerianos en estados intersexuales. Se reporta un casso de disgenesia gonadal mixta en quien se realizó resección laparoscópica de gónada única y de restos Müllerianos. Caso clínico. Masculino de 3 años 5 meses de edad, producto de la gesta XIII, al cual se le detectó al nacimiento la presencia de genitales ambiguos, con gónadas no palpables en escroto ni en trayecto inguinal, con falo de 3 x 1 cm, hipospadias pseudovaginal, y cariotipo 46XY. Se decidió de manera conjunta entre padres y médicos de la clínica de intersexo, de acuerdo al fenotipo predominante, la asignación al sexo masculino así como su manejo quirúrgico por laparoscopia. Hallazgos: útero rudimentario de 7 cm de longitud por 4 cm de diámetro, gónada única localizada en el lado derecho con morfología histológica de testículo inmaduro con restos de epidídimo y conducto deferente. Técnica quirúrgica: se colocó un puerto de 10 mm transumbilical, un puerto auxiliar de 5mm en fosa iliaca derecha y se introdujo por punción una pinza de 3 mm a través de la fosa iliaca izquierda. Se identificaron las estructuras, disecándose ambas trompas uterinas y la gónada única derecha; finalmente se colocó un punto trasfictivo en la porción distal del útero y se procedió a resecar el mismo, extrayendose con su anexos. Conclusión. La cirugía laparoscópica para el manejo de gónadas y genitales internos proporciona un visualización apropiada y un acceso terapéutico simple y mínimamente invasivo, por lo cual deberá considerarse como el procedimiento de primera elección en ciertos estados intersexuales

Comparación de los hallazgos urodinámicos en pacientes con enuresis primaria y pacientes con reflujo vesicoureteral primario / Comparison of the urodynamic findings in patients with primary enuresis and patients with vesicoureteral primary reflux

La vejiga inestable del paciente enurético se atribuye a una alteración primaria del detrusor que no explica por qué se manifiesta, además, una contracción hiperactiva de este músculo durante lamicción; podría ser secundaria a obstrucción ureteral funcional, como en los pacientes con reflujo vesicoureteral primario (RVUP). por lo anterior, se compararon los hallazgos entre estudios urodinámicos de pacientes con enuresis primaria (EP) y con RVUP para identificar si sus patrones son similares. El estudio comparativo analítico retrolectivo se efectuó en una población de pacientes con diagnóstico de Ep y RVUP enviados para estudio de urodinamia durante el periodo 1992-1996. Las variables tomadas en cuenta fueron edad, sexo y hallazgos urodinámicos. Para el análisis estadístico se utilizó la prueba de la X cuadrada (X²), y para evaluar el riesgo la razón de momios (OR). Se encontraron 18 pacientes con EP y 14 con RVUP, con edades medias de 9 años (EP) y 4 años (RVUP), respectivamante. La capacidad vesical staba disminuida en 15 de los 18 casos de EP y en 4 de los 14 con RVUP (OR 12.5, P = 0.0017). Había adaptabilidad moderada a disminuida en 14 de los 18 casos de EP y en 6 de los

Evaluación urodinámica en pacientes en edad pediátrica con vejiga neurogénica secundaria a mielodisplasia: aplicación de los marcadores predictivos de lesión de las urinarias superiores / Urodynamic evaluation of pediatric patients with neurogenic bladder secondary to myelodysplasia: application of lesion predictive markers of upper urinary tract

En 1991 Galloway propuso un marcador que permite predecir, de manera individual, el deterioro de las vías urinarias superiores, tomando en cuenta los cinco factores que contribuyen a la presión de vías urinarias inferiores, a saber: 1) Reflujo vesicoureteral 2) contractilidad del detrusor (hiperreflexia), 3) adaptabilidad vesical, 4) resistencia uretral (presión de fuga de estrés), y 5) comportamiento de los esfinteres interno y extrno (disinergia). La finalidad de este estudio fue evaluar la aplicabilidad de estos criterios en pacientes con vejiga neurogénica secundaria a mielodisplasia con el propósito de predecir la lesión de las vías urinarias superiores. Durante el periodo de 1993 a 1995 se enviaron para estudio de urodinamia 30 pacientes en edad pediátrica con diagnóstico de vejiga neurogénica secundaria a mielodisplasia y seleccionados de manera aleatoria simple. Se revisaron los expedientes clínicos, radiológicos y urodinámicos, y se aplicó la escala pronóstica de Galloway. Se calculó el punto de corte de mayor sensibilidad y especificidad en relación con la presencia de daño renal. Se cuantificó la relación entre la presencia de hidronefrosis y cada uno de los factores que influyen en la presión de las vías urinarias superiores, y se determinó la significación estadística de estas relaciones. El punto de corte predictivo de daño renal fue de 6 puntos (83 por ciento de sensibilidad y 52 por ciento de especificidad), OR = 12.38, P = 0.019. Todos los factores se correlacionaron significativamente con el riesgo de daño renal, excepto la presión de fuga, aunque su valor OR resultó significativo. La adaptabilidad vesical fue el factor con el mayor grado de relación con el riesgo de daño renal, OR = 96, P = 0.000038. Por lo anterior, la escala pronóstica de Galloway ofrece una alternativa de medición objetiva y simple de la función de las vías urinarias inferiores. Además, identificar el factor específicamente implicado en el aumento de la presión de las vías urinarias superiores permite la intervención más eficiente y eficaz, con tratamiento farmacológico o quirúrgico, para disminuir la presión intravesical y prevenir la lesión de las vías urinarias superiores

Disfunción miccional en pacientes con reflujo vesicoureteral primario / Micturition disorders related to primary vesicoureteral reflux

Introducción. La corrección quirúrgica del reflujo vésico ureteral primario (RVUP) en un gran número de pacientes no erradica el problema de la infección urinaria, lo que sugiere la existencia de vaciamiento vesical insuficiente. Objetivo. Identificar prevalencia de disfunción miccional, tipo de disfunción presente en paciente con RVUP y correlacionar hallazgos cistográficos con urodinámicos. Material y métodos. Estudio transversal, analítico y prospectivo. Se evaluó clínica, cistográfica y urodinámicamente a 19 niños con RVUP durante el periodo comprendido de 1992-1997. Resultados. La mediana de edad al tiempo de realización de urodinamia fue de 3 años (5 meses a 10 años). Se encontró disfunción miccional en 18 pacientes: vejiga hipoctiva en 1 paciente femenino; disinergia de esfínter externo en 8 pacientes femeninos; la mediana de presión miccional fue de 60 cm H2O (38-80 cm H2O) y en 1 pacientes masculino de 80 cm H2O durante la micción. Se encontró disinergia de cuello vesical en 6 pacientes masculino con mediana de presión miccional de 40 cm H2O (40-200 cm H2O) y 1 paciente femenino con presión miccional de 40 cm H2O. La urorradiología reveló falta de relajación del cuello vesical en pacientes con disinergia del cuello vesical, así como estenosis de la uretra distal o anillo de Lyon en pacientes con disinergia de esfínter externo. Conclusión. Los niños con reflujo RVUP tiene algún tipo de incoordinación miccional. Es importante realizar una completa evaluación con cistouretrograma miccional con medición de presiones en todos los casos. Tal vez la evaluación del niño con reflujo e infección de vías urinarias no es completa si nop incluye evaluación del vacinamiento vesical