RESUMO
Glycosaminoglycans (GAGs) serve as a biomarker for mucopolysaccharidoses disease. In this study, a novel fluorometric method was developed to measure total GAGs in urine. Graphene oxide (GO) and rhodamine B (RhB), a cationic fluorescent dye, were employed in the development of the method. RhB attaches to the GO surface via electrostatic attraction, leading to the quenching of its fluorescence upon the establishment of the RhB-GO complex. However, the presence of GAGs prompts a resurgence of intense fluorescence. The linear range of the method is between 5.00 and 70.00 mg/L. The total GAG levels of urine samples analyzed using the method agree with the results of the biochemistry analysis laboratory (65.85 and 79.18 mg/L; 73.30 ± 1.76 and 72.21 ± 2.21). The method is simple, accurate, and sensitive and may be used for both first-step diagnosis of the mucopolysaccharidoses and detection of individual GAGs for studies of GAG-related research and other biological applications.
Assuntos
Glicosaminoglicanos , Grafite , Grafite/química , Glicosaminoglicanos/urina , Glicosaminoglicanos/química , Humanos , Espectrometria de Fluorescência , Rodaminas/química , Corantes Fluorescentes/química , Fluorescência , Mucopolissacaridoses/urina , Mucopolissacaridoses/diagnósticoRESUMO
OBJECTIVE: The aim of this study was to investigate whether urinary glycosaminoglycans (GAG) levels reflect clinical status in men with lower urinary tract symptoms and if they could be used as a marker in management of overactive bladder (OAB). METHODS: A total of 34 patients were recruited who were admitted with LUTS and diagnosed as having clinically bladder outlet obstruction (BOO) due to prostate enlargement. These newly diagnosed, never treated patients underwent routine investigation, consisting of history, physical examination, PSA, ultrasound, uroflowmetry, assessment of symptoms scored by both International Prostate Symptom Score (IPSS) and Marmara- Overactive Bladder Questionnaire (M-OBQ). The patients were divided into two groups as those with an initial M-OBQ score < 12 (group 1) and ≥ 13 (group 2). Alfa blocker was initiated in eligible patients. Further evaluations included prostate volume measurement, pre- and post-treatment urinary GAG levels, IPSS and M-QAOB values and maximum urine flow rate (Qmax). RESULTS: Before treatment, urinary GAG level was 21.5 mg/gCr (6.1-45.5) in Group 1, and 23.35 mg/gCr (15.6-32.6) in Group 2 (p =0.845). After the treatment, the GAG level in Group 1 and Group 2 were found to be 19.8 mg/gCr (7.4-70.5) and 18 (7.6- 41.7), respectively (p = 0.511). No difference in GAG levels was found in subgroup analysis for patients with or without OAB. CONCLUSIONS: In recent years, there have been many studies investigating the relationship between LUTS and urinary markers. However, in our prospective study, no relationship was found between pre- and post- treatment urinary GAG levels in patients with LUTS with or without OAB.
Assuntos
Biomarcadores , Glicosaminoglicanos , Sintomas do Trato Urinário Inferior , Obstrução do Colo da Bexiga Urinária , Humanos , Masculino , Glicosaminoglicanos/urina , Sintomas do Trato Urinário Inferior/urina , Sintomas do Trato Urinário Inferior/etiologia , Idoso , Pessoa de Meia-Idade , Biomarcadores/urina , Seguimentos , Obstrução do Colo da Bexiga Urinária/urina , Obstrução do Colo da Bexiga Urinária/complicações , Obstrução do Colo da Bexiga Urinária/diagnóstico , Bexiga Urinária Hiperativa/urina , Bexiga Urinária Hiperativa/diagnóstico , Hiperplasia Prostática/urina , Hiperplasia Prostática/complicações , Inquéritos e Questionários , Estudos ProspectivosRESUMO
Abstract Introduction: It is hypothesized that increased macrophage migration inhibitory factor (MIF) expression may contribute to diabetic nephropathy (DN) pathogenesis. The aim of the present study was to investigate the renal effects of MIF inhibition in a diabetic experimental model. Methods: Eighteen male Wistar rats (230 ± 20 g) were divided into three groups: 1) control, 2) diabetic (STZ, 50 mg/kg, dissolved in saline, ip), 3) diabetic + MIF antagonist (p425, 1 mg/kg per day, ip, on the 21th day, for 21 consecutive days). The treatment started since we founwd a significant increase in urine albumin excretion (UAE) rate in the diabetic rats in comparison with the control rats. The rats were kept individually in metabolic cages (8 AM-2 PM) and urine samples were collected in the 21 and 42th day. At the end, blood and tissue samples were collected for biochemical (BS, UPE, urine GAG, BUN, Cr, Na, and K) and histological analyses. Results: The results of this study showed that MIF antagonist (p425) significantly decreased urine protein and GAG excretion, urine protein/creatinine ratio, and serum BUN and Cr in the streptozotocin-induced DN in the rats. Pathological changes were significantly alleviated in the MIF antagonist (p425)-administered DN rats. Conclusion: Collectively, these data suggested that MIF antagonist (p425) was able to protect against functional and histopathological injury in the DN.
Resumo Introdução: Supõe-se que elevações da expressão do fator de inibição da migração de macrófagos (MIF) possam contribuir para a patogênese da nefropatia diabética (ND). O objetivo do presente estudo foi investigar os efeitos renais da inibição do MIF em um modelo experimental diabético. Métodos: Dezoito ratos Wistar machos (230 ± 20g) foram divididos em três grupos: 1) controle, 2) diabético (STZ 50 mg/kg dissolvida em soro fisiológico, IP), 3) diabético + antagonista do MIF (p425 1 mg/kg por dia IP no 21o dia por 21 dias consecutivos). O tratamento começou após a identificação de aumento significativo na albuminúria nos ratos diabéticos em relação aos controles. Os ratos foram mantidos individualmente em gaiolas metabólicas (8h-14h) e amostras de urina foram colhidas no 21o e no 42o dia. Ao final do estudo, amostras de sangue e tecido foram colhidas para análises bioquímicas (BS, excreção urinária de proteína, excreção urinária de GAGs, BUN, Cr, Na e K) e histológicas. Resultados: O presente estudo demonstrou que o antagonista do MIF (p425) diminuiu significativamente proteinúria, excreção urinária de GAGs , relação proteína/creatinina na urina, BUN e Cr no grupo com ND induzida por estreptozotocina. As alterações patológicas foram significativamente abrandadas nos ratos com ND que receberam antagonista do MIF (p425). Conclusão: Coletivamente, os dados sugerem que o antagonista do MIF (p425) teve efeito protetor contra lesões funcionais e histopatológicas da ND.
Assuntos
Animais , Masculino , Ratos , Fatores Inibidores da Migração de Macrófagos/antagonistas & inibidores , Oxirredutases Intramoleculares/antagonistas & inibidores , Substâncias Protetoras/uso terapêutico , Substâncias Protetoras/farmacologia , Diabetes Mellitus Experimental/patologia , Nefropatias Diabéticas/terapia , Glicemia , Ratos Wistar , Estreptozocina/farmacologia , Creatinina/urina , Creatinina/sangue , Diabetes Mellitus Experimental/induzido quimicamente , Diabetes Mellitus Experimental/urina , Diabetes Mellitus Experimental/sangue , Nefropatias Diabéticas/urina , Nefropatias Diabéticas/patologia , Nefropatias Diabéticas/sangue , Albuminúria/tratamento farmacológico , Modelos Animais de Doenças , Glicosaminoglicanos/urina , Rim/patologia , Ativação de MacrófagosRESUMO
Glycosaminoglycans (GAGs) participate in a variety of processes in the kidney, and evidence suggests that gender-related hormones participate in renal function. The aim of this study was to analyze the relationship of GAGs, gender, and proteinuria in male and female rats with chronic renal failure (CRF). GAGs were analyzed in total kidney tissue and 24-h urine of castrated (c), male (M), and female (F) Wistar control (C) rats (CM, CMc, CF, CFc) and after 30 days of CRF induced by 5/6 nephrectomy (CRFM, CRFMc, CRFF, CRFFc). Total GAG quantification and composition were determined using agarose and polyacrylamide gel electrophoresis, respectively. Renal GAGs were higher in CF compared to CM. CRFM presented an increase in renal GAGs, heparan sulfate (HS), and proteinuria, while castration reduced these parameters. However, CRFF and CRFFc groups showed a decrease in renal GAGs concomitant with an increase in proteinuria. Our results suggest that, in CRFM, sex hormones quantitatively alter GAGs, mainly HS, and possibly the glomerular filtration barrier, leading to proteinuria. The lack of this response in CRFMc, where HS did not increase, corroborates this theory. This pattern was not observed in females. Further studies of CRF are needed to clarify gender-dependent differences in HS synthesis.
Assuntos
Animais , Feminino , Masculino , Castração , Glicosaminoglicanos/urina , Hormônios Esteroides Gonadais/deficiência , Falência Renal Crônica/metabolismo , Rim/química , Proteinúria/urina , Eletroforese em Gel de Ágar , Eletroforese em Gel de Poliacrilamida , Taxa de Filtração Glomerular , Glicosaminoglicanos/isolamento & purificação , Heparitina Sulfato/urina , Falência Renal Crônica/cirurgia , Rim/cirurgia , Nefrectomia , Distribuição Aleatória , Ratos Wistar , Fatores SexuaisRESUMO
PURPOSE: We reproduced a non-bacterial experimental model to assess bladder inflammation and urinary glycosaminoglycans (GAG) excretion and examined the effect of dimethyl sulfoxide (DMSO). MATERIALS AND METHODS: Female rats were instilled with either protamine sulfate (PS groups) or sterile saline (control groups). At different days after the procedure, 24 h urine and bladder samples were obtained. Urinary levels of hyaluronic acid (HA) and sulfated glycosaminoglycans (S-GAG) were determined. Also to evaluate the effect of DMSO animals were instilled with either 50 percent DMSO or saline 6 hours after PS instillation. To evaluate the effect of DMSO in healthy bladders, rats were instilled with 50 percent DMSO and controls with saline. RESULTS: In the PS groups, bladder inflammation was observed, with polymorphonuclear cells during the first days and lymphomononuclear in the last days. HA and S-GAG had 2 peaks of urinary excretion, at the 1st and 7th day after PS injection. DMSO significantly reduced bladder inflammation. In contrast, in healthy bladders, DMSO produced mild inflammation and an increase in urinary HA levels after 1 and 7 days and an increase of S-GAG level in 7 days. Animals instilled with PS and treated with DMSO had significantly reduced levels of urinary HA only at the 1st day. Urinary S-GAG/Cr levels were similar in all groups. CONCLUSIONS: Increased urinary levels of GAG were associated with bladder inflammation in a PS-induced cystitis model. DMSO significantly reduced the inflammatory process after urothelial injury. Conversely, this drug provoked mild inflammation in normal mucosa. DMSO treatment was shown to influence urinary HA excretion.
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Animais , Feminino , Ratos , Cistite Intersticial/urina , Glicosaminoglicanos/urina , Ácido Hialurônico/urina , Protaminas/uso terapêutico , Biomarcadores/urina , Cistite Intersticial/tratamento farmacológico , Modelos Animais de Doenças , Dimetil Sulfóxido/farmacologia , Ratos WistarRESUMO
OBJETIVO: Descrever o perfil de mobilidade articular e das forças de garra e de pinça de indivíduos com MPS VI, além de sua correlação com a excreção urinária de glicosaminoglicanos, atividade da ARSB e distância percorrida no teste de caminhada de 6 minutos. MÉTODOS: Estudo observacional de 28 pacientes com MPS VI, não submetidos a tratamento específico. Todos os pacientes foram avaliados em relação à amplitude da mobilidade articular, forças de garra e de pinça, excreção urinária de glicosaminoglicanos, atividade da ARSB e teste de caminhada de 6 minutos. RESULTADOS: Demonstrou-se maior comprometimento de flexão de ombro, sem correlação com a idade, e da extensão de joelho e flexão de cotovelo, estas últimas correlacionadas negativamente com a idade. A força de garra mostrou-se comprometida em todos os pacientes, e a força de pinça apresentou correlação positiva com idade. CONCLUSÕES: A restrição da flexão de ombro, sem correlação com a idade, sugere que este achado esteja presente precocemente na MPS VI e se constitua em sinal clínico importante para suspeita diagnóstica desta doença. A amplitude da extensão de joelho e da flexão de cotovelo, por sua vez, por apresentarem correlação negativa com a idade, são possíveis marcadores da evolução da doença. Estudos adicionais são necessários para confirmação dessas hipóteses.
OBJECTIVE: To describe the profile of joint mobility and grip and pinch strength of MPS VI patients and to correlate this with urinary excretion of glycosaminoglycans (GAGs), ARSB activity, and the distance covered in a 6-minute walking test (6MWT). METHODS: This was an observational study of 28 patients with MPS VI, who had not undergone specific treatment. All patients were assessed for amplitude of joint mobility (shoulder, elbow, and knee), grip and pinch strength and urinary GAG excretion and also performed the 6MWT. RESULTS: Shoulder flexion exhibited the greatest limitation, with no correlation with age, followed by knee extension and elbow flexion, both of which were correlated inversely with age. Hand grip strength was compromised in all patients, and pinch strength exhibited a positive correlation with age. CONCLUSIONS: The fact that restricted shoulder flexion was not correlated with age suggests that this finding is present early on in MPS VI and that it constitutes an important clinical sign that should arouse diagnostic suspicion of this disease. The amplitude of knee extension and elbow flexion, in turn, are possible markers of disease progression since they have a negative correlation with age. Further studies are needed to confirm these hypotheses.
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Criança , Feminino , Humanos , Masculino , Força da Mão/fisiologia , Instabilidade Articular/fisiopatologia , Mucopolissacaridose VI/fisiopatologia , Articulação do Cotovelo/fisiopatologia , Glicosaminoglicanos/urina , Instabilidade Articular/diagnóstico , Instabilidade Articular/etiologia , Articulação do Joelho/fisiopatologia , Mucopolissacaridose VI/complicações , Mucopolissacaridose VI/metabolismo , /sangue , Valores de Referência , Articulação do Ombro/fisiopatologiaRESUMO
A excreção urinária de glicosaminoglicanos (GAG) está alterada em várias patologias do trato urinário; o padrão de excreção pode estar associado com o estado da doença. A excreção urinária de GAG em crianças com bexiga neurogênica (BN) secundária a mielomeningocele (MMC) pode também estar alterada, mas até a presente data não há detalhamento epidemiológico dos pacientes e não se correlacionou o padrão de excreção com grau de disfunção vesical. Analisamos a excreção urinária de um grupo bem definido de crianças de 17 pacientes com MMC, 10 meninos e 7 meninas (média de idade +- DP de 4,6 +- 2,9 anos) foram obtidas durante o exame cistométrico. As amostras do grupo controle foram obtidas de 18 crianças normais, 13 meninos e 5 meninas (6,9 +- 2,2 anos). Todas as crianças não estavam com infecção urinária, tinham função renal normal e não estavam sob tratamento farmacológico. A quantificação do GAG urinário total foi expressa em ug de ácido hexurônico/mg de creatinina e a proporção dos diferentes tipos de GAGs sulfatados foi obtida por eletroforese em gel de agarose. A avaliação cistométrica foi realizada utilizando aparelho de urodinâmica Dynapack modelo MPX816 (Dynamed, São Paulo, Brasil), a partir da qual o escore cistométrico foi calculado de acordo com procedimento recente publicado [14]. Não observamos diferença significativa na excreção urinária de GAG total entre meninos e meninas tanto no grupo com MMC (0,913 +- 0,528 vs 0,867 +- 0,434, p>0,05) como no grupo controle (0,546 +- 0,240 vs 0,699 +- 0,296, p>0,05). Os resultados mostraram também que a excreção de GAG urinário não se correlacionou com a idade tanto no grupo com MMC (r = -0,28, p>0,05) como no grupo controle (r = -0,40, p>0,05). Entretanto, a comparação dos dois grupos mostrou que o grupo com MMC excretava 52% a mais de GAG total que o grupo controle (0,894 +- 0,477 vs 0,588 +- 0,257, p<0,04). Nesses pacientes a excreção de GAG total não se correlacionou com a complacência vesical...
Urinary glycosaminoglycan (GAG) excretion is altered in a number of urinary tract disorders, and the excretion pattern may be associated with disease state and/or outcome. GAG excretion in children with neurogenic bladder secondary to myelomeningocele (MMC) may be affected, but existing data lack more detailed demographics and does not correlate excretion pattern with severity of bladder dysfunction. Here we analyzed GAG excretion in a well defined group of children with MMC and correlated the results with cystometric score. Urine specimens from 17 patients (10 boys, 7 girls) mean age +- SD, 4.6 +- 2.9 years) were obtained during cystometry. Control specimens were from 18 normal children (13 boys, 5 girls) (6.9 +- 2.2 years). All children were free from urinary infection, had normal renal function, and were not under pharmacological treatment. Total urinary GAG was assayed as ug hexuronic acid/mg urinary creatinin e, and sulfated GAGs were determined by agarose gel electrophoresis. Cistometry was done using a Dynapack MPX816 (Dynamed, São Paulo, Brazil), from wich a cystometry score was calculated according to a recent procedure [14]. There were no significant differences in total GAG excretion between male and female individuals in the MMC (0.913 +- 0.528 vs 0.867 +- 0.434, p>0.05) and control (0.546 +- 0.240 vs 0.699+- 0.296, p>0.05) groups. Also, urinary GAG did not correlated with age in the MMC (r = -0.28, p>0.05) and control (r = -0.40, p>0.05) groups. However, MMC patients excreted 52% more GAG than controls (0.894 +- 0.477 vs 0.588 +- 0.257, p<0.04). In these patients, total GAG excretion was not associated with vesical complicance alone (r = -0.18, p>0.05), but was significantly and negatively correlated (r = -0.56, p<0.05) with cystometric score. On average, MMC patients with worst scores (<9) excreted 81% more GAG than those with better scores (>9) (1.157 +- 0.467 vs 0.639 +- 0.133, p<0.04). Chondroitin sulfate prevailed in both groups...
Assuntos
Humanos , Masculino , Feminino , Criança , Glicosaminoglicanos/urina , Meningomielocele/complicações , Sistema Urinário/patologia , Bexiga Urinaria Neurogênica , Urodinâmica , Vesícula Biliar/fisiopatologia , Cistite Intersticial/etiologia , Infecções Urinárias/etiologiaRESUMO
OBJETIVO: Avaliar a progressão da mucopolissacaridose II, durante um período de 12 meses, em 11 pacientes brasileiros. MÉTODOS: Onze pacientes brasileiros com mucopolissacaridose II foram avaliados prospectivamente no Serviço de Genética Médica do Hospital de Clínicas de Porto Alegre. As avaliações realizadas na visita inicial e na de 12 meses foram: anamnese, exame físico, ressonância nuclear magnética abdominal, ecocardiograma, teste da caminhada em 6 minutos, audiometria, exames bioquímicos séricos e dosagem uriná- ria de glicosaminoglicanos. RESULTADOS: Os principais achados relativos à comparação entre as duas visitas foram: 1) dois pacientes apresentaram retardo de crescimento; 2) dois pacientes apresentaram variação negativa em relação ao peso; 3) um paciente apresentou variação de obesidade para sobrepeso; 4) três pacientes desenvolveram alargamento do ventrículo esquerdo; destes, dois aumentaram o número de lesões nas valvas cardíacas; 5) não foi encontrada diferença estatística significativa entre a média das distâncias percorridas no teste da caminhada em 6 minutos; 6) houve aumento do volume esplênico; 7) ocorreu aumento dos níveis de gamaglutamiltransferase; 8) não houve alteração dos níveis urinários de glicosaminoglicanos. CONCLUSÕES: De uma maneira geral, a única variável que apresentou, no período estudado, piora com potencial repercussão clínica imediata foram os achados ecocardiográficos. Embora o período de 12 meses seja curto para medir alterações na maioria dos parâmetros comprometidos na mucopolissacaridose II, sua natureza progressiva deve ser levada em conta na avaliação da eficácia dos protocolos de tratamento para essa condição.
OBJECTIVE: To assess the progression of mucopolysaccharidosis II in 11 Brazilian patients over a 12-month period. METHODS: Eleven Brazilian patients with mucopolysaccharidosis II were prospectively studied at the Division of Medical Genetics of Hospital de Clínicas de Porto Alegre. The initial assessment and the assessment at 12 months included: anamnesis, physical examination, abdominal nuclear magnetic resonance, echocardiogram, 6-minute walk test, audiometry, serum biochemical tests and urinary glycosaminoglycan concentration. RESULTS: The major findings after comparing the assessments were: 1) two patients had growth retardation; 2) two patients showed negative weight change; 3) one patient went from obese to overweight; 4) three patients revealed left ventricle hypertrophy; of these, two increased the number of cardiac valve lesions; 5) there was no statistically significant difference between the mean distances obtained on the 6-minute walk test; 6) there was splenic enlargement; 7) there was an increase in gamma-glutamyltransferase levels; 8) the urinary concentration of glycosaminoglycans remained unchanged. CONCLUSIONS: In general, echocardiographic findings were the only variable with deterioration and possible immediate clinical consequences. Although a 12-month period is too short to detect changes in most variables related to mucopolysaccharidosis II, its progressive nature should be taken into account when evaluating the efficiency of treatment protocols.
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Criança , Pré-Escolar , Humanos , Mucopolissacaridose II/patologia , Brasil , Avaliação da Deficiência , Progressão da Doença , Glicosaminoglicanos/urina , Testes de Inteligência/estatística & dados numéricos , Mucopolissacaridose II/complicações , Mucopolissacaridose II , Estudos Prospectivos , Estatísticas não Paramétricas , Fatores de Tempo , Caminhada/estatística & dados numéricosRESUMO
As mucopolissacaridoses (MPS) constituem, devido às suas características bioquímicas, genéticas e clínicas, um grupo grande e heterogêneo dentro das doenças lisôssomicas de depósito (LSD), e säo causadas pela deficiência de enzimas específicas que säo responsáveis pela quebra de gicosaminoglicanos (GAGs) em passos diferentes da sua rota de degradaçäo. Sendo as MPS responsáveis por aproximadamente 32 por cento dos erros inatos do metabolismo (EIM) e 54 por cento das LSD identificadas em nosso laboratório (Laboratório Regional dos Erros Inatos do Metabolismo (RLIEM), Serviço de Genética Médica, Hospital de Clínicas de Porto Alegre), que é um centro de referência para o diagnóstico de LSD no Brasil, nós decidimos implantar uma rotina para detecçäo e o diagnóstico diferencial de MPS em pacientes com características clínicas sugestivas deste grupo de doenças.
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Humanos , Lactente , Pré-Escolar , Criança , Doenças por Armazenamento dos Lisossomos , Mucopolissacaridoses/diagnóstico , Diagnóstico Diferencial , Testes Diagnósticos de Rotina , Enzimas/deficiência , Glicosaminoglicanos/metabolismo , Glicosaminoglicanos/urinaRESUMO
Las mucopolisacaridosis (MPS) son errores innatos del metabolismo de los glicosaminoglicanos (GAG), que ocurren por déficit de alguna de las enzimas que degradan estas moléculas en los lisosomas. Esto conduce al depósito intralisosomal progresivo de GAG en diferentes tejidos, lo que explica el carácter multistémico de estas patologías. Las MPS, se presentan con una frecuencia aproximada de 1 caso en 10.000 a 25.000 recién nacidos vivos y son de herencia autosómica recesiva, salvo la MPS II o enfermedad de Hunter, que se hereda ligada al cromosoma X. Las características clínicas más frecuentes de las MPS son la presencia de rasgos faciales toscos, macrocefalia, opacidades corneales, disostosis múltiple, talla baja, valvulopatía mitroaórtica, hepatoesplenomegalia, hernias umbilical e inguinales, con o sin retraso del desarrollo sicomotor y con un deterioro neurológico progresivo. Salvo para las formas menos severas de MPS I, hasta ahora no hay un tratamiento efectivo para estas patologías, por lo que el daño sistémico progresivo produce la muerte entre los fines de la primera y de la cuarta década de la vida. En esta revisión se discuten las características clínicas de las MPS con las particularidades de cada fenotipo, el modo de confirmar el diagnóstico y los avances recientes en su tratamiento.
Assuntos
Humanos , Recém-Nascido , Glicosaminoglicanos/análise , Glicosaminoglicanos/metabolismo , Glicosaminoglicanos/urina , Erros Inatos do Metabolismo , Mucopolissacaridoses/diagnóstico , Mucopolissacaridoses/etiologia , Mucopolissacaridoses/fisiopatologia , Mucopolissacaridoses/terapia , Enzimas/deficiência , LisossomosRESUMO
The mucopolysaccharidoses (MPS) are a heterogeneous group of inborn errors of lysosomal glycosaminoglycan (GAG) metabolism. The importance of this group of disorders among the inborn errors of metabolism led us to report 19 cases. METHOD: We performed clinical, radiological, and biochemical evaluations of the suspected patients, which allowed us to establish a definite diagnosis in 19 cases. RESULTS: Not all patients showed increased GAG levels in urine; enzyme assays should be performed in all cases with strong clinical suspicion. The diagnosis was made on average at the age of 48 months, and the 19 MPS cases, after a full clinical, radiological, and biochemical study, were classified as follows: Hurler -- MPS I (1 case); Hunter -- MPS II (2 cases); Sanfilippo -- MPS III (2 cases); Morquio -- MPS IV (4 cases); Maroteaux-Lamy -- MPS VI (9 cases); and Sly -- MPS VII (1 case). DISCUSSION: The high relative frequency of Maroteaux-Lamy disease contrasts with most reports in the literature and could express a population variability
Assuntos
Humanos , Masculino , Feminino , Pré-Escolar , Criança , Adolescente , Adulto , Mucopolissacaridoses/diagnóstico , Glicosaminoglicanos/metabolismo , Glicosaminoglicanos/urina , Mucopolissacaridoses/fisiopatologia , Mucopolissacaridose VI/diagnóstico , Mucopolissacaridose VI/fisiopatologiaRESUMO
La mucopolisacaridosis tipo I es una enfermedad de depósito lisosomal, autosómica recesiva, de baja incidencia, aproximadamente 1:100.000 recién nacidos. Su etiología es el déficit de la glicosidasa, -L-iduronidasa (IDUA), que es una enzima que degrada los glicosaminoglicanos (GAG), heparán sulfato y dermatán sulfato. El déficit causa su acumulación progresiva a nivel intralisosomal, y posteriormente desencadena el daño a nivel celular y tisular. La gran heterogeneidad fenotípica depende del tipo de mutación del gen IDUA, ubicado en el cromosoma 4p16.3. Los casos más severos se denominan síndrome de Hurler, los intermedios, síndrome de Hurler-Scheie y el fenotipo más atenuado corresponde al síndrome de Scheie.1 Los pacientes con síndrome de Hurler habitualmente fallecen en la primera década de vida. En el síndrome de Scheie la sobrevida es normal y su sintomatología es más atenuada. El síndrome de Hurler-Scheie tiene un curso intermedio, falleciendo cerca de los 20 años por compromiso cardiorrespiratorio. La fascies tosca, talla baja, retraso del desarrollo psicomotor progresivo, opacidad corneal y hepatomegalia deben plantear la sospecha clínica de la forma más severa de esta enfermedad, que es letal sin tratamiento. El objetivo de esta comunicación es presentar un caso de síndrome de Hurler con manifestaciones cutáneas como motivo de consulta.
Mucopolysaccharidosis type I is an autosomal recessive genetic disorder that has a low incidence of approximately 1:100.000 new born. It is caused by the deficiency of -L- iduronidase (IDUA), a lysosomal enzyme involved in the degradation of the glycosaminoglycans, heparan sulfate and dermatan sulfate. This deficient activity leads to intracellular accumulation and ultimately compromises cellular and organ function. The -L- iduronidase gene (IDUA) is located on chromosome 4p16.3. The phenotypic heterogeneity ranging from the most severe (Hurler syndrome) to the most attenuated phenotype (Scheie syndrome) is related to the different mutations.1 Life expectancy for Hurler disease is less than ten years; Scheie syndrome has a normal survival rate and its symptomatology is less severe; Hurler-Scheie syndrome follows an intermediate line and life expectancy is approximately twenty years due to cardiorespiratory complications. The most appropriate approach to patients with coarse facial features, short stature, hepatosplenomegaly, corneal clouding and progressive mental retardation is to perform a diagnostic test to rule out the presence of a mucopolysaccharidosis. Early diagnosis and adequate treatment prevent its progression, which can otherwise be lethal. We present a case of Hurler syndrome with cutaneous symptoms whose reason for consultation was dermatological.
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Humanos , Masculino , Criança , Mucopolissacaridose I/patologia , Evolução Fatal , Glicosaminoglicanos/urina , Hepatomegalia/etiologia , Hipertricose/etiologia , Transtornos Psicomotores/etiologiaRESUMO
As mucopolissacridoses (MPS) säo rotineiramente detectadas pela dosagem de glicosaminoglicanos (GAG), usualmente realizadas em urina de 24 horas. Como os pacientes suspeitos säo geralmente crianças sem controle miccional e a excreçäo de GAG varia com a idade, nós estudamos os valores de GAG em amostras ocasionais de urina de 78 crianças normais e de 16 pacientes com MPS de 6 meses a 12 anos de idade. Este trabalho teve objetivos (a) estabelecer valores normais para os índices urinários GAG/volume (GAG/L e GAG/cratinina (GAG/creat), relacionados com a idade, e (b) testar a utilidade desses índices na identificaçäo de pacientes com MPS. Nos dois índices a concentraçäo de GAG diminui com a idade. Os índices GAG/L e GAG/CREAT discriminaram todos os pacientes, com uma exceçäo em cada índice, em pacientes diferentes. Nossos resultados indicam que amostras ocasionais de urina säo adequadas para a dosagem de GAG desde que os índices de GAG/L e GAG/CREAT sejam avaliados simultanemante e que a idade do paciente seja considerada na interpretaçäo dos resultados, especialmente em crianças pequenas
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Lactente , Pré-Escolar , Criança , Humanos , Masculino , Feminino , Glicosaminoglicanos/urina , Mucopolissacaridoses/urina , Distribuição AleatóriaRESUMO
Se presenta la estandarización de un método para la determinación cuantitativa de glicosaminoglicanos (GAGs) urinarios, empleando una combinación de los métodos descriptos por Di Ferrante y Bitter y Muir, con algunas modificaciones que debieron ser introducidas para adecuarlo a nuestras condiciones experimentales. La determinación se basa en la precipitación de los GAGs por acción de bromuro de cetiltrimetilamonio, seguida de la hidrólisis del polímero y la posterior reacción colorimétrica con carbazol de los ácidos hexurónicos liberados. Se describen, detalladamente, los estudios de estandarización: determinación de la precisión de las distintas etapas del método, linealidad y carta de control de las pendientes de las curvas de calibración, ensayos de recuperación, investigación de interferencias y variaciones en las condiciones de trabajo. Esta metodología puede servir de base para establecer protocolos de control de cualquier procedimiento analítico
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Humanos , Masculino , Feminino , Glicosaminoglicanos/normas , Controle de Qualidade , Glicosaminoglicanos/urina , Padrões de ReferênciaRESUMO
Introducción. Las mucopolisacaridosis (MPS) son un grupo heterogéneo de enfermedades hereditarias, originadas por la deficiencia de enzimas lisosomales que catalizan la degradación de los glucosaminoglucanos (GAGs). Actualmente se conocen 11 deficiencias enzimáticas que originan 8 fenotipos distintos y expresan una variedad de síntomas clínicos. Material y métodos. Doce pacientes con diagnóstico clínico de MPS (4 con MPS I, 2 con MPS IIIB y 6 con MPS VI) dos fueron estudiados bioquímicamente mediante la cuantificación de GAGs urinarios, su identificación a través de electroforesis en acetato de celulosa y la correlación con la actividad enzimática en leucocitos. Resultados. En todos los casos la concentración de GAGs/creatinina estuvo elevada en comparación con un grupo control. La electroforesis reveló la presencia de los GAGs esperados en cada tipo de MPS y la actividad enzimática fue deficiente en los 12 pacientes estudiados. Conclusiones. La aplicación de los métodos anteriores en pacientes con MPS, es una poderosa herramienta a utilizar como diagnóstico.
Assuntos
Humanos , Masculino , Feminino , Pré-Escolar , Glicosaminoglicanos/urina , Mucopolissacaridose III/enzimologia , Mucopolissacaridose I/enzimologia , Mucopolissacaridose VI/enzimologia , Ativação Enzimática , Doenças Genéticas Inatas/enzimologia , LisossomosRESUMO
El objetivo de la investigación fue la obtención de un método que permitiera la determinación de la heparina y otros glicosaminoglicanos (GAG) naturales en las cantidades pequeñas en que se los encuentra en los líquidos biológicos. El método debía ser sencillo y de la mayor especificidad posible. Se ha logrado poner a punto la reacción de los hidratos de carbono con el indol en medio ácido, de manera tal que, dependiendo de las condiciones de una hidrólisis previa también en medio ácido, sea específica, bien para la heparina y el dermatán sulfato, o bien para el condroitín 4-sulfato o el condroitín 6-sulfato. La albúmina humana y las sales inorgánicas no interfieren con la reacción, lo que valoriza el método para su aplicación a material biológica. La sencillez de la técnica, pues no requiere ninguna precipitación previa, acrecienta en mayor medida su valor potencial para la Bioquímica analítica
Assuntos
Humanos , Sulfatos de Condroitina/análise , Glicosaminoglicanos/urina , Heparina/análise , Técnicas In Vitro , Sulfatos de Condroitina/sangue , Sulfatos de Condroitina/urina , Heparina/sangue , Heparina/urina , IndóisRESUMO
Os glicosaminoglicanos excretados na urina foram estudados por DIETRICH e col (1993) por meio de eletroforese em gel, degradaçao enzimática e cromatografia, em indivíduos adultos sadios e em portadores de neoplasias diversas. Os autores demonstraram que esses compostos, em especial o condroitim sulfato (CS) e o heparam sulfato (HS), estavam alterados nos portadores de neoplasias. No presente trabalho, estudamos o comportamento dos glicosaminoglicanos urinários de 14 pacientes adultos portadores de neoplasias pertencentes à área de abrangência da cirurgia de cabeça e pescoço, comparando-o ao de 27 indivíduos sadios. As amostras isoladas de urina dos 14 pacientes, sendo dez carcinomas espinocelulares, três adenomas e um cordoma, foram colhidas nos períodos pré- e pós-operatórios precoce e tardio. Os seguintes parâmetros foram estudados: a relaçao CS/HS e a porcentagem dos dissacarídeos nao sulfatados, componentes do condroitim sulfato. No período pré-opetatório o primeiro encontrou-se diminuído e o segundo elevado, em relaçao aos valores dos indivíduos normais. No pós-operatório tardio, a porcentagem dos dissacarídeos nao-sulfatados caiu a valores próximos aos dos indivíduos normais nos casos clinicamente sem tumor residual ou recidivado, caracterizando um potencial marcador tumoral útil no seguimento.
Assuntos
Humanos , Masculino , Adulto , Pessoa de Meia-Idade , Adenoma/urina , Carcinoma de Células Escamosas/urina , Cordoma/urina , Glicosaminoglicanos/urina , Neoplasias de Cabeça e Pescoço/urina , Sulfatos de Condroitina/metabolismo , Cromatografia em Papel , Seguimentos , Glicosaminoglicanos/metabolismo , Período Pós-OperatórioRESUMO
The glycosaminoglycans of the tumor mass and from the urine of patients with a nephroblastoma of embryonic origin (Wilms' tumor) and hypernephroma were analyzed. The urine of patients with Wilms/ tumors prior to treatment, and two patients with metastasis contained high levels of hyaluronic acid (2-5 mg/l of urine) when compared to patients after surgery or chemotherapy where the content of hyaluronic acid was less than 0.1 mg/l. Urine of patients with hypernephroma and normal individuals contained even smaller amounts of hyaluronic acid. Normal kidneys contain mainly dermatan sulfate and heparan sulfate, while the hypernephroma and Wilms' tumor contain substantial amounts of chondroitin sulfate. The amount of glycosaminoglycans isolated from Wilms' tumor and hypernephroma were 10 times and 3 times, respectively, greater than normal kidneys. The amonunts of hyaluronic acid in Wilms' tumor varied from 56 to 73 per cent whereas normal kidneys contained about 13 per cent. Chondroitin sulfate was also increased in Wilms' tumor and hypernephroma. It corresponded to 11 per cent and 42 per cent, respectively, of the total glycosaminoglycans. These and other findings indicate that the glycosaminoglycans of Wilms' tumors resemble those present during embryonic development of normal tissues whereas those in hypernephroma are typical of other carinomas of different origins
Assuntos
Humanos , Carcinoma de Células Renais/urina , Glicosaminoglicanos/química , Neoplasias Renais/urina , Tumor de Wilms/urina , Ácido Hialurônico/urina , Dermatan Sulfato/urina , Dissacarídeos/química , Dissacarídeos/urina , Glicosaminoglicanos/urina , Heparitina Sulfato/urinaRESUMO
Five patients presenting Hunter's syndrome were biochemically studied. Quantification of urinary glycosaminoglycans (GAGs), electrophoretic characterizatio and correlation with ensymatic activity in leucocytes were carried out. In all cases, urinary GAGs/creatinine ratio was increased. Electrophoresis revealed the presence of heparan sulfate (HS) and dermatan sulfate (DS) in four cases (80 perecent), but in the remaining patient, only DS was present. In all patients, deficient enzymatic activity was demonstrated. These results show evidences of biochemical differences in thys syndrome