RESUMO
Os monócitos/macrófagos representam alvos importantes da replicação do vírus Dengue (DENV), com a produção de mediadores inflamatórios e disseminação viral na fase inicial da doença. A apoptose é um processo ativo de autodestruição celular geneticamente regulado, no qual é ativada uma cadeia enzimática complexa podendo ocorrer durante processos celulares desencadeados por várias infecções virais. Uma vez que os mecanismos de apoptose em células-alvo infectadas por DENV ainda não estão totalmente esclarecidos, torna-se de extrema relevância desenvolver este conhecimento. Neste estudo, investigamos a interação vírus-célula utilizando como modelo a infecção de monócitos humanos primários com vírus DENV-2 (16681), enfatizando os mecanismos de apoptose. Uma cinética de infecção demonstrou, por citometria de fluxo, um pico de detecção viral no segundo dia, onde 60por cento de células CD14(mais) são DENV-2, sendo que a presença de vírus no citoplasma das células foi demonstrada por microscopia confocal. Um aumento significativo (P(menor que)0,01) na expressão da molécula de ativação CD16 foi detectado em monócitos CD14(mais) na presença de DENV-2, em comparação ao controle e ao vírus inativado por calor. Como esperado, foi observada influência da infecção viral na indução de morte celular programada em monócitos humanos, devido ao aumento significativo (P(menor que)0,05) na expressão de fosfatidilserina, confirmada pela marcação com Anexina-V em células infectadas, em comparação ao controle e ao vírus inativado. Monócitos apresentaram um aumento significativo (P(menor que)0,05) na expressão de fas (receptor de morte celular programada) 2 dias após infecção, comparado com o controle e o vírus inativado. Entretanto, não houve alteração aparente na expressão da proteína anti-apoptótica Bcl-2 em culturas infectadas avaliadas durante 5 dias. Monócitos infectados apresentaram, em resultados preliminares, uma alteração no potencial de membrana mitocondrial, medida...células.(AU)
Assuntos
Estudo Comparativo , Humanos , Dengue , Monócitos , ApoptoseRESUMO
Os monócitos/macrófagos representam alvos importantes da replicação do vírus Dengue (DENV), com a produção de mediadores inflamatórios e disseminação viral na fase inicial da doença. A apoptose é um processo ativo de autodestruição celular geneticamente regulado, no qual é ativada uma cadeia enzimática complexa podendo ocorrer durante processos celulares desencadeados por várias infecções virais. Uma vez que os mecanismos de apoptose em células-alvo infectadas por DENV ainda não estão totalmente esclarecidos, torna-se de extrema relevância desenvolver este conhecimento. Neste estudo, investigamos a interação vírus-célula utilizando como modelo a infecção de monócitos humanos primários com vírus DENV-2 (16681), enfatizando os mecanismos de apoptose. Uma cinética de infecção demonstrou, por citometria de fluxo, um pico de detecção viral no segundo dia, onde 60por cento de células CD14(mais) são DENV-2, sendo que a presença de vírus no citoplasma das células foi demonstrada por microscopia confocal. Um aumento significativo (P(menor que)0,01) na expressão da molécula de ativação CD16 foi detectado em monócitos CD14(mais) na presença de DENV-2, em comparação ao controle e ao vírus inativado por calor. Como esperado, foi observada influência da infecção viral na indução de morte celular programada em monócitos humanos, devido ao aumento significativo (P(menor que)0,05) na expressão de fosfatidilserina, confirmada pela marcação com Anexina-V em células infectadas, em comparação ao controle e ao vírus inativado. Monócitos apresentaram um aumento significativo (P(menor que)0,05) na expressão de fas (receptor de morte celular programada) 2 dias após infecção, comparado com o controle e o vírus inativado. Entretanto, não houve alteração aparente na expressão da proteína anti-apoptótica Bcl-2 em culturas infectadas avaliadas durante 5 dias. Monócitos infectados apresentaram, em resultados preliminares, uma alteração no potencial de membrana mitocondrial, medida...células.(AU)
Assuntos
Estudo Comparativo , Humanos , Dengue , Monócitos , ApoptoseRESUMO
Os monócitos/macrófagos representam alvos importantes da replicação do vírus Dengue (DENV), com a produção de mediadores inflamatórios e disseminação viral na fase inicial da doença. A apoptose é um processo ativo de autodestruição celular geneticamente regulado, no qual é ativada uma cadeia enzimática complexa podendo ocorrer durante processos celulares desencadeados por várias infecções virais. Uma vez que os mecanismos de apoptose em células-alvo infectadas por DENV ainda não estão totalmente esclarecidos, torna-se de extrema relevância desenvolver este conhecimento. Neste estudo, investigamos a interação vírus-célula utilizando como modelo a infecção de monócitos humanos primários com vírus DENV-2 (16681), enfatizando os mecanismos de apoptose. Uma cinética de infecção demonstrou, por citometria de fluxo, um pico de detecção viral no segundo dia, onde 60por cento de células CD14(mais) são DENV-2, sendo que a presença de vírus no citoplasma das células foi demonstrada por microscopia confocal. Um aumento significativo (P(menor que)0,01) na expressão da molécula de ativação CD16 foi detectado em monócitos CD14(mais) na presença de DENV-2, em comparação ao controle e ao vírus inativado por calor. Como esperado, foi observada influência da infecção viral na indução de morte celular programada em monócitos humanos, devido ao aumento significativo (P(menor que)0,05) na expressão de fosfatidilserina, confirmada pela marcação com Anexina-V em células infectadas, em comparação ao controle e ao vírus inativado. Monócitos apresentaram um aumento significativo (P(menor que)0,05) na expressão de fas (receptor de morte celular programada) 2 dias após infecção, comparado com o controle e o vírus inativado. Entretanto, não houve alteração aparente na expressão da proteína anti-apoptótica Bcl-2 em culturas infectadas avaliadas durante 5 dias. Monócitos infectados apresentaram, em resultados preliminares, uma alteração no potencial de membrana mitocondrial, medida...células.(AU)
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Estudo Comparativo , Humanos , Dengue , Monócitos , ApoptoseRESUMO
Os monócitos/macrófagos representam alvos importantes da replicação do vírus Dengue (DENV), com a produção de mediadores inflamatórios e disseminação viral na fase inicial da doença. A apoptose é um processo ativo de autodestruição celular geneticamente regulado, no qual é ativada uma cadeia enzimática complexa podendo ocorrer durante processos celulares desencadeados por várias infecções virais. Uma vez que os mecanismos de apoptose em células-alvo infectadas por DENV ainda não estão totalmente esclarecidos, torna-se de extrema relevância desenvolver este conhecimento. Neste estudo, investigamos a interação vírus-célula utilizando como modelo a infecção de monócitos humanos primários com vírus DENV-2 (16681), enfatizando os mecanismos de apoptose. Uma cinética de infecção demonstrou, por citometria de fluxo, um pico de detecção viral no segundo dia, onde 60por cento de células CD14(mais) são DENV-2, sendo que a presença de vírus no citoplasma das células foi demonstrada por microscopia confocal. Um aumento significativo (P(menor que)0,01) na expressão da molécula de ativação CD16 foi detectado em monócitos CD14(mais) na presença de DENV-2, em comparação ao controle e ao vírus inativado por calor. Como esperado, foi observada influência da infecção viral na indução de morte celular programada em monócitos humanos, devido ao aumento significativo (P(menor que)0,05) na expressão de fosfatidilserina, confirmada pela marcação com Anexina-V em células infectadas, em comparação ao controle e ao vírus inativado. Monócitos apresentaram um aumento significativo (P(menor que)0,05) na expressão de fas (receptor de morte celular programada) 2 dias após infecção, comparado com o controle e o vírus inativado. Entretanto, não houve alteração aparente na expressão da proteína anti-apoptótica Bcl-2 em culturas infectadas avaliadas durante 5 dias. Monócitos infectados apresentaram, em resultados preliminares, uma alteração no potencial de membrana mitocondrial, medida...células.