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Nucleic Acids Res ; 46(5): e30, 2018 03 16.
Artigo em Inglês | MEDLINE | ID: mdl-29294098

RESUMO

CRISPR/dCas9-based labeling has allowed direct visualization of genomic regions in living cells. However, poor labeling efficiency and signal-to-background ratio have limited its application to visualize genome organization using super-resolution microscopy. We developed (Po)STAC (Polycistronic SunTAg modified CRISPR) by combining CRISPR/dCas9 with SunTag labeling and polycistronic vectors. (Po)STAC enhances both labeling efficiency and fluorescence signal detected from labeled loci enabling live cell imaging as well as super-resolution fixed-cell imaging of multiple genes with high spatiotemporal resolution.


Assuntos
Sistemas CRISPR-Cas/genética , Genes/genética , Vetores Genéticos/genética , Medições Luminescentes/métodos , Imagem com Lapso de Tempo/métodos , Animais , Linhagem Celular , Células Cultivadas , Células HEK293 , Células HeLa , Humanos , Hibridização in Situ Fluorescente/métodos , Proteínas Luminescentes/genética , Proteínas Luminescentes/metabolismo , Camundongos , Reprodutibilidade dos Testes , Telômero/genética , Telômero/metabolismo
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