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Prikl Biokhim Mikrobiol ; 50(1): 52-8, 2014.
Artigo em Russo | MEDLINE | ID: mdl-25272752

RESUMO

The recombinant Escherichia coli strain pET35b-ARG, which overexpresses arginase I fused to a cellulose-binding domain (CBD), was developed. After preparing cellulose microspheres, arginase I was immobilized via the CBD of the fusion protein. Under optimal reaction conditions (40 degrees C, pH 9.5, 1 mM of Mn2+, 30 microl/ml of immobilized enzyme, 30 g/l of L-Arg, and for I h), the conversion rate of L-Arg was 98.7%. After 7 reuses of 30 microl of immobilized enzyme in 1 ml of catalytic solution, 153 mg of L-Orn with 97.3% purity was obtained. This indicated that the immobilization method was effective, feasible and could be used for the industrial production of L-Orn in the future.


Assuntos
Arginase/química , Proteínas de Bactérias/química , Escherichia coli/enzimologia , Ornitina/química , Proteínas Recombinantes de Fusão/química , Arginase/genética , Arginase/isolamento & purificação , Arginina/química , Proteínas de Bactérias/genética , Proteínas de Bactérias/isolamento & purificação , Celulose/química , Clonagem Molecular , Estabilidade Enzimática , Enzimas Imobilizadas/química , Enzimas Imobilizadas/genética , Enzimas Imobilizadas/isolamento & purificação , Reutilização de Equipamento , Escherichia coli/genética , Cinética , Estrutura Terciária de Proteína , Proteínas Recombinantes de Fusão/genética , Proteínas Recombinantes de Fusão/isolamento & purificação
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