One-step real-time PCR assay for detection and quantification of RNA HCV to monitor patients under treatment in Brazil

ABSTRACT

O Serviço de Saúde Pública do Brasil fornece αPEG-IFN gratuitamente para tratar pacientes infectados pelo HCV. O objetivo principal da terapia com HCV é a eliminação a longo prazo do HCV do sangue para reduzir o risco de complicações e morte associadas ao HCV. A viremia do paciente afeta a duração e a resposta do tratamento, influenciando assim as decisões clínicas. Desenvolvemos um método de alto rendimento para realizar a quantificação da carga do vírus do RNA da hepatite C (HCV) em amostras de plasma para monitorar pacientes em tratamento. O método baseia-se na detecção duplex, em um teste de RT-PCR em tempo real de uma etapa, e foi validado de acordo com as regras estabelecidas pela agência reguladora oficial do Brasil (ANVISA). Esse novo método foi comparado a um kit comercial (Teste Cobas / Taqman HCV v2.0 - Roche), mostrando resultados de carga de vírus com correlação significativa entre eles (p = 0,012) usando painéis comerciais e clínicos. Além disso, foram analisadas 611 amostras de pacientes tratados com interferon alfa peguilado (αPEG-IFN) de diferentes regiões do Brasil. Nosso teste de RT-PCR em tempo real de uma etapa demonstrou bom desempenho na medição da carga viral e no monitoramento do curso do tratamento, com valores aceitáveis ​​de sensibilidade e especificidade.