Improved synthesis of the antifungal isobutyl o-coumarate catalyzed by the Aspergillus terreus type B feruloyl esterase

BACKGROUND Hydroxycinnamic acids and some of their derivatives are molecules with interesting biological activities; for instance, hydroxylated hydroxycinnamic esters have proved to have antifungal properties, and thus the generation of these molecules is of industrial importance. In this study, the direct esterification capacity of the pure recombinant type B feruloyl esterase from Aspergillus terreus (AtFAE B) was evaluated by its ability to catalyze the synthesis of isobutyl o-coumarate, an interesting antifungal molecule. A ternary solvent system (isooctane/isobutanol/water) was employed to improve the synthesis of isobutyl o-coumarate, assessing different substrate concentrations, enzyme load, water percentages and pH and temperature values. RESULTS AtFAE B showed the highest initial rate at 18% (v/v) isobutanol and 50 mM o-coumaric acid, 0.04 mg/ml of enzyme, 4% (v/v) water without buffer and 40C. AtFAE B half-lives at 30C, 40C and 50C were 16.5 h, 1.75 h and 3.5 min, respectively. Thus, we decided to evaluate the bioconversion yield at 30C, where the enzyme showed the highest operational stability. At this temperature, we obtained a yield of ~80% after only 8 h of reaction, using a 78:18:4 isooctane:isobutanol:water ternary solvent system, with 50 mM of o-coumaric acid.CONCLUSIONS Under these improved conditions, the productivity was 1.06 g isobutyl o-coumarate/L*h with a biocatalyst yield of 209.6 kg isobutyl o-coumarate/kg free AtFAE B, demonstrating the promising potential of AtFAE B to accept the non-canonical o-coumaric acid as the substrate and to achieve the synthesis of isobutyl o-coum

Aneurismas coronarios no asociados a estenosis en las arterias coronarias: Tratamiento conservador y evolución en un registro de 6 casos / Coronary aneurysms not associated to stenosis of coronary arteries: conservative treatment and evolution in six patients

Los aneurismas coronarios son una patología relativamente infrecuente, con una incidencia anual del 1-2%. La causa más frecuente es la ateroesclerosis coronaria y en este caso se suelen asociar a estenosis en las arterias coronarias. Revisamos todos los estudios angiográficos realizados en los últimos 7 años y recogimos los casos de 6 pacientes ingresados por síndrome coronario agudo a los que se realizó coronariografía, demostrando dilataciones aneurismáticas en las arterias coronarias sin relación con estenosis proximales o distales. A pesar de la ausencia de estenosis coronarias, pensamos que la enfermedad ateroesclerótica podría ser la causa mediante: lesión del endotelio y la elástica interna con el depósito de lípidos, células musculares lisas, colágeno, macrófagos y linfocitos T, con afectación final de las capas media y adventicia, y neoformación de vasa-vasorum. Se desconoce la evolución de los aneurismas coronarios sin estenosis significativas asociadas y sin otra causa etiológica tratable. A tenor de la escasa literatura publicada al respecto y con nuestra experiencia creemos que el tratamiento médico conservador podría ser una buena opción en estos casos. En el seguimiento a medio-largo plazo no se registraron eventos cardíacos mayores en ningún paciente.

Coronary artery aneurysms are a relatively infrequent finding with an incidence of 1-2% per year. The most frequent cause is atherosclerosis and, in that case, they are always associated to stenosis of coronary arteries. We reviewed the coronary angiographic studies performed in the past seven years and we identified six patients that were admitted with an acute coronary syndrome, whose angiographic studies showed the presence of aneurysms in, at least, one of the coronary arteries. In these patients, we found no relation between aneurysms and distal or proximal stenosis. Although there was no angiographic evidence of classical coronary atherosclerosis, we think that atherosclerotic disease could have been the etiological cause, due to injury of the endothelium and media by deposits of lipids, smooth muscle cells, collagen, macrophages, and T-lymphocytes that would have damaged the adventitia layers of the vessel wall, stimulating "vasa-vasorum" neovascularization. The evolution of coronary aneurysms without associated stenosis in the same coronary artery and without another potentially treatable cause is unknown. Due to the limited literature regarding this issue and, taking into account our experience, we feel that, in these cases, medical treatment might be a good option as we detected no major cardiac events in any patient at mid and long-term follow up.

Linfedema: aspectos clínicos, diagnósticos y terapéuticos / Lymphedema: clinical, diagnostic and therapeutic aspects

El linfedema se produce por retención de las proteínas de alto peso molecular en el intersticio. Su principal causa en las extremidades superiores son las secuelas de la cirugía y/o de la radioterapia utilizadas en el tratamiento del cáncer de mama. En las extremidades inferiores, en las que es mucho más frecuente, el linfedema es de tipo primario o secundario a procesos bacterianos recurrentes. Es una patología cuya frecuencia va en aumento sea por iatrogenia, por síndrome post-flebítico o por mejor conocimiento y preocupación por pesquisarlo más precozmente. Si bien es una patología que no tiene tratamiento curativo radical existen numerosos recursos que aplicados a tiempo y bien manejados son capaces de detener su evolución y evitar sus complicaciones.

Paresia bilateral assimétrica de nervo troclear associada a trombose de seio transverso pós-otite: relato de caso / Asymmetric bilateral paresia of trochlear nerv associated the post-otitis transverse sinus thrombosis: case report

Os autores descrevem um caso de otite média aguda pós-perfuraçäo de membrana timpânica, que evoluiu com trombose de seio transverso esquerdo, paresia facial central à direita e paresia troclear bilateral assimétrica. O exame oftalmológico mostrou hipofunçäo do OS e hiperfunçäo do OI nos dois olhos, mais intensas no olho direito. O sinal de Bielchowsky era positivo à direita e negativo à esquerda. A acuidade visual estava preservada, além de ausência de papiledema à fundoscopia. A arteriografia cerebral revelou unicamente trombose do seio transverso à esquerda. O tratamento institui do foi antibioticoterapia via oral e cumarínico. Após seis meses de evoluçäo a diplopia persistia apenas em infralevoversäo, porém persistia a paresia facial central à direita. Näo se encontrou na literatura relato semelhante ao descrito.

Efecto en el ciclo celular de líneas de adenocarcinoma pulmonar por cumarina y 7-hidroxicumarina / Effects of cumarine and 7-hydroxicumarine on the cell cycle of pulmonary adenocarcinoma cell lines

Introducción: Las cumarinas son compuestos ampliamente distribuidos en la naturaleza. En el humano el principal metabolito de la cumarina es la 7-hidroxicumarina. Estos compuestos presentan actividad antitumoral in vitro e in vivo. Previamente reportamos que la cumarina y la 7-hidroxicumarina ejercen actividad citostática en líneas de adenocarcinoma; sin embargo, se desconocen los aspectos relacionados a la fase del ciclo celular en la que estos compuestos pueden actuar.Objetivo: Determinar el efecto de la cumarina y la 7-hidroxicumarina en la transición del ciclo celular en líneas de adenocarcinoma pulmonar.Material y métodos: Tres líneas de adenocarcinoma pulmonar (SK-LU-1, 1.3.15 y 3A5A) y células mononucleares de individuos sanos estimuladas con fitohemaglutinina, se incubaron por 24h y 40h respectivamente, con 100 µg/mL de cumarina o 7-hidroxicumarina. Las perturbaciones en el ciclo celular se evaluaron por medio de la determinación de contenido de DNA por citometría de flujo.Resultados: Posterior al tratamiento, las líneas celulares presentaron acumulación significativa de células en la fase G0/G1, disminuyendo proporcionalmente la población de células en la fase S. En cambio, las células mononucleares no presentaron cambios significativos después del tratamiento.Conclusiones: Estos resultados demuestran que los compuestos cumarínicos causan un arresto de las células tumorales en la fase G0/G1. El conocimiento de las perturbaciones en el ciclo celular, inducidas por estos productos, puede facilitar la elaboración de esquemas de tratamiento mediante combinaciones con otros fármacos que arresten en distinta(s) fase(s) del ciclo. Además, esta metodología permite evaluar la susceptibilidad de las células tumorales a los agentes quimioterapéuticos.

Cardiopatía, embarazo y tratamiento anticoagulante / Anticoagulant therapy in pregnant women with mechanical valve prosthesis and/or heart diseases

Pregnancy is a hypercoagulable state. Some women with cardiac disease and mechanical valve prosthesis are at increased risk of arterial thromboembolic phenomena. These women are maintained on oral anticoagulants and require effective permanent prophylaxis during pregnancy. The use of oral anticoagulants during pregnancy is controversial because of the risks of embriopathy (Chondrodysplasia punctata) in fetuses who are exposed to coumarin between the 6th and 9th week of gestation, the risk of neurological disorders all through pregnancy, and a higher incidence of abortion and stillbirths. The exact incidence of these complications is unknown. Most of this information comes from North American reports, when much higher mean daily doses of coumarin were administered, and they were probably overemphasised2. Reports from Europe, Asia and our own, show that both embriopathy and central nervous system malformations are probably dose-related and that the risks of abnormality to the fetus are small3-8. The ACC Antithrombotic Consensus (1998) recommends the use of subcutaneous heparin all through pregnancy or until the 13th week of gestation. Heparin does not cross the placenta, however there is a higher risk of maternal bleeding, abortion and stillbirths. With the use of small dose of heparin and of therapeutic heparin doses there is a risk of prosthesis thrombosis. Anticoagulant treatment of patients with prosthetic heart valves during pregnancy remains controversial. Subcutaneous heparin prophylaxis is feasible but the use of well controlled oral anticoagulants appear to offer lower risks of maternal and fetal complications

Evaluación química y biológica del efecto de extractos de plantas contra Plasmodium berghei / Biological and chemical evaluation of the effect of plant extracts on Plasmodium berghei

Extracts from thirteen species of plants were evaluated by(r)in vivo(r)antimalarial test against plasmodium berghei effects. Significant activities were observed in the ethyl acetate and aqueous extracts, elaborated of Cedrela tonduzii leaves, Trichilia havanensis and Trichilia americana barks, Neurolaena lobata and liricidia sepium leaves and Duranta repens fruits. Compounds identified include flavanoids, coumarins, mellilotic acid and iridoids which some kind of biodynamic activity has previously been reported. The flavone uercetin 1 purified from C. tonduzii gave strong antimalarial activity, however, its respective glucosides (quercetin 3-glucoside 2 y robinine 7) showed little significant activity

Trombolisis y betabloqueo en el infarto agudo del miocardio: efectos sobre la función ventricular izquierda / Thrombolisis plus beta blocking in acute myocardial infarction: effect on left ventricular function

Se comparó el efecto del metoprolol, la estreptocinasa y la combinación de ambos fármacos sobre la función ventricular izquierda y el rescate del miocardio amenazado en pacientes con infarto agudo del miocardio (IAM). Treinta y siete pacientes con IAM se dividieron en 3 grupos: 19 recibieron 15 mg de metoprolol iv en 15 minutos, 7 recibieron 1.5 millones de UI de estreptocinasa iv en 30 minutos y 11 recibieron ambos fármacos. Las siguientes variables se estudiaron antes del tratamiento y a la hora y 24 horas después: presión arterial, frecuencia cardiaca, "doble producto", intervalos sistólicos, tiempo diastólico y sumatorias del segmento ST y onda R en el ECG. La presión arterial, frecuencia cardiaca y "doble producto" disminuyeron significativamente en los sujetos tratados con metoprolol. El índice expulsivo: periodo pre-esfígmico/periodo expulsivo, no se modificó en ningún grupo. El tiempo diastólico aumentó en los grupos con metoprolol. La sumatoria del ST se redujo más en el grupo de tratamiento combinado y en este grupo la sumatoria de R no disminuyó como en los otros grupos. Se concluye que la combinación extreptocinasa-metoprolol es más eficaz en el rescate del miocardio amenazado que las drogas usadas individualmente