miR-218-5p regulates glycolysis in human non-small cell lung cancer A549 cells by targeting PDE7A / 中国肿瘤生物治疗杂志

@#[摘 要] 目的：探究miR-218-5p靶向磷酸二酯酶7A（PDE7A）调节人非小细胞肺癌（NSCLC）A549细胞糖酵解过程的机制。方法：常规培养A549细胞，用Lipo3000将miR-218-5p mimic、mimic-NC、PDE7A过表达质粒（PDE7A-oe）和PDE7A对照质粒（PDE7A-NC）转染A549细胞，记为miR-218-5p mimic组、mimic-NC组、PDE7A-oe组和PDE7A-NC组。qPCR法验证转染效率，WB法检测糖酵解关键酶蛋白的表达，葡萄糖测定法和乳酸生成测定法检测各转染组A549细胞中2脱氧葡萄糖和乳酸含量，双萤光素酶报告基因实验验证miR-218-5p与PDE7A靶向结合关系，用TCGA数据库数据分析PDE7A mRNA在肺癌组织中的表达水平。结果：在A549细胞中成功地过表达了miR-218-5p（P<0.01）。过表达miR-218-5p均能显著抑制A549细胞中PDE7A、HK2、PKM2蛋白的表达（均P<0.01）、葡萄糖摄取量和乳酸生成量（均P<0.01）。过表达PDE7A均可显著促进A549细胞中PDE7A、HK2、PKM2蛋白的表达（均P<0.01），以及葡萄糖摄取量和乳酸生成量（均P<0.01）。A549细胞中miR-218-5p可与PDE7A mRNA的3´-UTR直接结合。数据库数据分析结果显示，PDE7A mRNA在肺鳞状细胞癌组织中呈高表达（P<0.01）。结论： miR-218-5p靶向PDE7A调控A549细胞中HK2和PKM2的表达水平，进而抑制糖酵解过程，miR-218-5p/PDE7A可能是NSCLC临床诊断和治疗的潜在靶点。