Résumé
A atividade de glicosidases durante a degradação do polissacarídeo extracelular (EPS) produzido por Anabaena spiroides foi detectada e quantificada utilizando-se MUF-substratos (MUF-monossacarídeos). O consumo total do polissacarídeo efetuou-se em duas fases, uma primeira de alta atividade enzimática que rapidamente consumiu 41 per center do polissacarídeo e uma segunda, mais lenta, que consumiu o polissacarídeo restante (59 per center). A mudança de fase coincidiu com a sucessão de uma população de bactérias cocóides por outra de bacilos. A biomassa bacteriana, quantificada por contagens de células, aumentou com a degradação do EPS. As atividades registradas através dos substratos 4-MUF-a-D- e 4-MUF-b-D- glicosídeo foram mais altas quando comparadas aos demais substratos testados que foram: MUF-a-L-ramnopiranosídeo, MUF-b-D-galactosídeo, MUF-a-D-manopiranosídeo, MUF-b-D-fucosídeo, MUF-b-D-manopiranosídeo, MUF-a-L-arabinopiranosídeo, e MUF-b-L-fucosídeo. A fluorescência emitida a partir de cada um dos diferentes MUF-substratos foi, de modo geral, proporcional à concentração dos monossacarídeos correspondentes constituintes do polissacarídeo, um indício da susceptibilidade ao ataque enzimático microbiano do EPS produzido por A. spiroides.
Sujets)
Anabaena , Tests enzymatiques en clinique , Glycosidases/analyse , Polysaccharide-lyases/analyse , Dégradation des Déchets ChimiquesRésumé
The activity of specific glycosidases during the degradation of the extracellular polysaccharide (EPS) produced by Anabaena spiroides was determined using MUF-substrates (MUF-monosaccharides). Polysaccharide degradation was found to occur in a two-phase process. The first consisted of high enzymatic activity that consumed 41% of the EPS at a relatively high rate, while the second consumed the remaining polysaccharide (59%) at a slower rate. A transition phase from the higher to the slower degradation rates was marked by a replacement of bacterial populations from coccoid to bacillus cells. During the degradation process, the bacterial biomass increased with the decrease of EPS, as revealed by bacterial cell counts. The enzymatic activity detected through the substrates MUF-alpha-D- and MUF-beta-D-glucoside was higher than that detected by other substrates tested. The remaining glycosides were MUF-alpha-L-rhamnopyranoside, MUF-beta-D-galactoside, MUF-alpha-D-mannopyranoside, MUF-beta-D-fucoside, MUF-beta-D-mannopyranoside, MUF-alpha-L-arabinopyranoside, and MUF-beta-L-fucoside. The fluorescence emitted by each MUF-substrate was proportional to the concentration of the corresponding monosaccharide in A. spiroides EPS. This demonstrates the susceptibility of EPS produced by A. spiroides to enzymatic attack by bacterial populations.
A atividade de glicosidases durante a degradação do polissacarídeo extracelular (EPS) produzido por Anabaena spiroides foi detectada e quantificada utilizando-se MUF-substratos (MUF-monossacarídeos). O consumo total do polissacarídeo efetuou-se em duas fases, uma primeira de alta atividade enzimática que rapidamente consumiu 41% do polissacarídeo e uma segunda, mais lenta, que consumiu o polissacarídeo restante (59%). A mudança de fase coincidiu com a sucessão de uma população de bactérias cocóides por outra de bacilos. A biomassa bacteriana, quantificada por contagens de células, aumentou com a degradação do EPS. As atividades registradas através dos substratos 4-MUF-alfa-D- e 4-MUF-beta-D- glicosídeo foram mais altas quando comparadas aos demais substratos testados que foram: MUF-alfa-L-ramnopiranosídeo, MUF-beta-D-galactosídeo, MUF-alfa-D-manopiranosídeo, MUF-beta-D-fucosídeo, MUF-beta-D-manopiranosídeo, MUF-alfa-L-arabinopiranosídeo, e MUF-beta-L-fucosídeo. A fluorescência emitida a partir de cada um dos diferentes MUF-substratos foi, de modo geral, proporcional à concentração dos monossacarídeos correspondentes constituintes do polissacarídeo, um indício da susceptibilidade ao ataque enzimático microbiano do EPS produzido por A. spiroides.