Stereological quantification of extraocular muscles in humans / Cuantificación estereológica de músculos extraoculares en humanos

SUMMARY: The aim of this study is to quantify muscular and connective tissue volumes of extraocular muscles (EOM) in humans with no ophthalmological disease using stereology. EOM from five cadaveric non-strabismic humans were obtained. The number of muscle fibers in 5,000 µm2 and volume density (Vv) of muscle and collagen were measured using stereology. Comparisons between antagonist EOM were conducted using Wilcoxon signed rank test for paired samples. A secondary analysis examining differences between pairs of EOM was also conducted. Bilateral tests were performed, and significance was set at 0.05. The horizontal rectus muscles (medial and lateral rectus) had the highest Vv of muscle and the lowest Vv of collagen. The inferior rectus muscle tended to have a fewer number of fibers per 5,000 µm2 than the rest of the EOM. However, these differences did not reach statistical significance. This is the first published study describing the normal histology of human EOM using stereology. Our investigation, through the quantification of the proportion of muscle and collagen tissue, as well as the number of muscle fibers in 5,000 µ2, establishes normal stereological parameters for EOM of humans without ophthalmological disease.

RESUMEN: El objetivo de este estudio es cuantificar el volumen de tejido muscular y conectivo de los músculos extraoculares en humanos sin enfermedad oftalmológica conocida utilizando estereología. Los músculos extraoculares fueron obtenidos de cinco cadáveres humanos sin estrabismo. El número de fibras musculares en 5.000 µm2 y la densidad de volumen (Vv) de músculo y colágeno fueron medidas usando estereología. Las comparaciones entre músculos extraoculares antagonistas se realizaron a través de la prueba de los rangos con signo de Wilcoxon para muestras pareadas. Un análisis secundario examinando diferencias entre pares de músculos extraoculares también fue llevado a cabo. Se realizaron pruebas bilaterales y la significancia fue fijada en 0,05. Los músculos rectos horizontales (recto medial y lateral) tuvieron el mayor Vv de músculo y el menor Vv de colágeno. El músculo recto inferior tuvo la tendencia a poseer menos número de fibras por 5.000 µm2 que el resto de los músculos extraoculares. No obstante, estas diferencias no llegaron a ser estadísticamente significativas. Este es el primer estudio publicado describiendo la histología normal de los músculos extraoculares usando estereología. Nuestra investigación, a través de la cuantificación de la proporción de tejido de músculo y colágeno, así como el número de fibras musculares en µm2, establece parámetros estereológicos normales para músculos extraoculares en humanos sin enfermedad oftalmológica.

Megacolon tóxico en una paciente con colitis seudomembranosa / Toxic megacolon in a patient with colitis pseudomembranous

La colitis seudomembranosa es una patología relacionada con el uso de antibióticos. En raras ocasiones, evoluciona a megacolon tóxico que podría requerir resolución quirúrgica. Comunicamos el caso de una mujer de 22 años, que recibió amoxicilina/ácido clavulánico unos días antes de la consulta. Presentó diarrea, fiebre y vómitos. Radiografía y tomografía computarizada de abdomen: distensión de colon derecho >6 cm. Toxina para Clostridium: positiva. Comienza con el tratamiento médico y requiere cirugía por megacolon tóxico. El megacolon tóxico es una complicación infrecuente de la colitis seudomembranosa. Es rara en pacientes jóvenes y sin comorbilidades. Se llega al diagnóstico mediante los criterios de Jalan. La tasa de mortalidad se aproxima al 70%. Se debe mantener alto nivel de alerta ante signos de toxicidad sistémica y la dilatación colónica es diagnóstica de la entidad. El uso indiscriminado de antibióticos constituye un serio factor de riesgo.(AU)

Pseudomembranous colitis is a condition associated with the use of antibiotics. On rare occasions, it evolves to toxic megacolon which may require surgical resolution. We report the case of a 22-year-old woman who received amoxicillin/clavulanic acid a few days before the consultation. She referred diarrhea, fever and vomiting. Radiography and computed tomography of abdomen: distension of the right colon >6 cm. Clostridium toxin: positive. Medical treatment is administered and surgery is needed for toxic megacolon. Toxic megacolon is an infrequent complication of pseudomembranous colitis. It is rare in young patients without comorbidities. The diagnosis is reached using the Jalan criteria. The mortality rate approaches 70%. A high level of alertness should be maintained for signs of systemic toxicity and colonic dilation is diagnostic of the entity. Indiscriminate use of antibiotics is a serious risk factor.(AU)

Adventitious Bud Formation and Plantlet Regeneration of Achyrocline satureoides-A Multipurpose Medicinal Plant.

Adventitious bud regeneration was achieved from hypocotyls, cotyledons and leaf explants of Achyrocline satureioides. Organogenesis was induced from every explant cultured on Murashige and Skoog semisolid medium (plus sucrose 30g·L-1) containing different combinations of 6-benzyladenine (BA) and -naphtalenacetic acid (NAA) under 116mol·m2·s-1 photosynthetic photon flux density (PPFD), photoperiod 14 h and at 272ºC. The regeneration was similar for every tested explant and varied between 64 and 83%. The number of buds formed per regenerative explants was similar in every treatment (5-8 shoots/explant). In order to stimulate In vitro rooting, regenerative leaves were sub cultured from the best induction medium in MS lacking plant growth regulators for the same periods. Every plantlet raised In vitro was phenotypically normal and successfully hardened to ex vitro conditions. An experimental field plot with 60-day-old in vitro regenerated plants was established.

A cryopreservation protocol for immature zygotic embryos of species of Ilex (Aquifoliaceae)

Tropical Ilex species have recalcitrant seeds. This work describes experiments demonstrating the feasibility of long-term conservation of Ilex brasiliensis, I. brevicuspis, I. dumosa, I. intergerrima, I. paraguariensis, I. pseudoboxus, I. taubertiana, and I. theezans through cryopreservation of zygotic rudimentary embryos at the heart developmental stage. The embryos were aseptically removed from the seeds and precultured (7 days) in the dark, at 27 +/- 2 degrees C on solidified (0.8% agar) 1/4MS medium, [consisting of quarter-strength salts and vitamins of Murashige and Skoog (1962) medium] with 3% sucrose and 0.1 mg/l Zeatin.The embryos were then encapsulated in 3% calcium alginate beads and pretreated at 24 h intervals in liquid medium supplemented with progressively increasing sucrose concentrations (0.5, 0.7 5 and 1 M). Beads were dehydrated for 5 h with silicagel to 25% water content (fresh weight basis) and then placed in sterile 5 ml cryovials. Then the beads were either plunged rapidly in liquid nitrogen were they were kept for 1 h (rapid cooling) or cooled at 1 degrees C min(-1) to -30 degrees C. Then the beads were immersed in liquid nitrogen for 1 h (slow cooling). The beads were rewarmed by immersion of the cryovials for 1 min in a water bath thermostated at 30 degrees C. Finally, beads were transferred onto culture medium (1/4MS, 3% sucrose, 0.1 mg/l zeatin, solidified with 0.8% agar) and incubated in a growth room at 27 +/- 2 degrees C under a 14 h light (116 micromol. m(-2) x s(-1))/ 10 h dark photoperiod. Maximum recovery percentages between 15 and 83% (depending on de the species and the treatment) were obtained with the cryopreserved embryos.

Detección sensible y específica de mycobacterium tuberculosis a partir de muestras clínicas, mediante la amplificación de un elemento repetitivo de la familia rep13e12 / Sensitive and specific detection of Mycobacterium tuberculosis from clinical samples by amplification of a repeated sequence of the REP13E12 family

Objetivos: Diseñar e implementar un método de PCR para la detección sensible y específica de M. tuberculosis, orientado al oportuno diagnóstico de la tuberculosis mediante su adecuada aplicación en muestras clínicas. Materiales y métodos: Se diseñaron oligonucleótidos específicos para la amplificación de un fragmento de 318pb luego de una alineación múltiple de secuencias REP13E12 de M. tuberculosis. Se realizó la estandarización del método de PCR y se evaluó la sensibilidad y especificidad diagnóstica utilizando muestras clínicas con diagnóstico baciloscópico y cultivo. Resultados: El REP13E12-PCR detectó hasta 100 fg de ADN genómico, fue específico para la detección del complejo M. tuberculosis y capaz de distinguirlos de micobacterias atípicas. Esta evaluación preliminar proporcionó 100% de sensibilidad y especificidad en muestras clínicas de pacientes con diagnóstico de TB. Conclusiones: La amplificación de REP13E12 mediante PCR es una alternativa para el diagnóstico rápido de pacientes con TB, especialmente en casos cuyo diagnóstico pueda ser dificultoso o poco claro mediante el uso de los métodos convencionales..

Objectives: To design and implement of PCR method for sensitivity and specific detection of M. tuberculosis oriented to opportune and correctly diagnosis of tuberculosis by the application on clinical specimens. Material an methods: Specific oligonucleotides for the amplification of a fragment of 318pb after a multiple alignment of sequences REP13E12 were designed. The PCR method was standarize and also the analytical and diagnostic sensibility and specifity was evaluate; using clinical samples with smear or culture diagnosis positive and negative. Results: The REP13E12-PCR detected up to 100 fg of genomic DNA. It was specific for the detection of complex M. tuberculosis and able to distinguish them of non-tuberculous mycobacteria. This preliminary evaluation provided 100% of sensitivity and specificity in sputum samples of patients with TB diagnosis. Conclusions: The REP13E12 amplification by PCR is an alternative method for the rapid diagnosis of patients with TB, especially for cases which difficult or unclear diagnosis by the gold standard technique.

Neumonia por Legionella pneumophila. Experiencia en un Hospital Universitario de Buenos Aires / Pneumonia due to Legionella pneumophila. Experience gathered in a University Hospital in Buenos Aires

Legionnaires' disease is a well recognized cause of community acquired pneumonia (CAP) all around the world. In Latin America its incidence remains unknown. This study analyzed a cohort of 9 patients with CAP due to Legionella pneumophila observed from 1997 to 2001, in the Hospital de Clínicas José de San Martin, University of Buenos Aires. Clinical history included recent illnesses, work exposure, physical exam, prior antibiotic use and severity of illness criteria. None of the 9 patients had a history of recent travels, and 4 of them required admission in intensive care unit (ICU). Seven patients had a cigarette smoking history, four of them also had COPD, and one patient had a non-Hodgkin lymphoma. This study confirms the low specificity of clinical and general laboratory criteria to predict this etiology. Legionella isolation is difficult, and serological testing allows retrospective diagnosis but takes several weeks, while urinary antigen test gives a bed-side diagnosis. When Legionella appears in isolated cases, as happens in Argentina, it should be necessary to have a high index of suspicion to successfully arrive at an etiological diagnosis. Legionella pneumophila is a pathogen causing CAP in our area. A surveillance should be established preferably focused on selected populations including severe CAP, immunocompromised hosts and patients with chronic obstructive pulmonary disease.

La enfermedad de los legionarios es una causa de neumonía adquirida en la comunidad (NAC)reconocida en todo el mundo. En Latinoamérica su incidencia es desconocida. En este estudiose analizó a 9 pacientes con NAC por Legionella pneumophila atendidos entre 1997 y 2001 en el Hospital deClínicas José de San Martín de la Universidad de Buenos Aires. Se registraron datos de antecedentes, enfermedad actual, contactos, exposición laboral, examen físico, pruebas de laboratorio y uso previo de antibióticos, y se tomó en cuenta la presencia de criterios de gravedad. Nueve pacientes presentaron diagnóstico de NAC por Legionella, ninguno refirió antecedentes de viajes recientes; cuatro de ellos debieron ser internados en unidades de cuidado intensivo. Siete pacientes tenían antecedentes de tabaquismo, 4 tenían EPOC y un paciente linfoma no-Hodgkin. Nuestra casuística corrobora la baja especificidad de la clínica y estudios complementarios para predecir esta etiología. El aislamiento de Legionella es dificultoso, la seroconversión permite eldiagnóstico retrospectivo y requiere plazos prolongados y el antígeno urinario aporta un diagnóstico inmediato.Cuando la legionelosis aparece en casos aislados, como ocurriría en Argentina, si no se piensa en esta etiologíano se llegará al diagnóstico. Legionella pneumophila es un patógeno de NAC en nuestro medio, debe buscarsemejor, particularmente en pacientes graves, inmunodeprimidos y en fumadores con enfermedad pulmonarobstructiva crónica (EPOC).

Micropropagation of Ilex dumosa (Aquifoliaceae) from nodal segments in a tissue culture system

Micropropagation of Ilex dumosa var. dumosa R. ("yerba señorita") from nodal segments containing one axillary bud was investigated. Shoot regeneration from explants of six-year-old plants was readily achieved in 1/4 strength Murashige and Skoog medium (1/4 MS) plus 30 gr x L(-1) sucrose and supplemented with 4.4 microM BA. Further multiplication and elongation of the regenerated shoots were obtained by subculture in a fresh medium of similar composition with 1.5 gr x L(-1) sucrose. Rooting induction from shoots were achieved in two steps: 1) 7 days in 1/4 MS (30 gr x L(-1) sucrose, 0.25% Phytagel) with 7.3 microM IBA and 2) 21 days in the same medium without IBA and 20 microM of cadaverine added. Regenerated plants were successfully transferred to soil. This micropropagation schedule can be implemented in breeding programs of Ilex dumosa.

Predictive capacity of risk indices in pulmonary resections

Pulmonary and cardiac complications are known to be the most frequent causes of morbidity and mortality after thoracic surgery. We attempted to correlate the relationship between the complications with preoperatively cardiac, pulmonary and cardiopulmonary risk indices in patients undergoing pulmonary resections. Complicatiosn in 15 consecutive patients with high cardiac (GoldmanÝs index); pulmonary (TorringtonÝs index) or cardiopulmonary (exercise capacity less than 3 METS) risk indices were compared with 31 consecutive patients without that risk factores. Nineteen complications developed in 15 patients in the high risk group and 4 complications occurred in 31 patients in the low risk group (p<0.0001). Death occurred in 8 patients in the high risk group, there were no deaths in the low risk group. Causes of death were: Pneumonia 4; Contralateral bronchial obstruction 1; Cardiac death 1; Pulmonary Embolism 1 and Sepsis 1 patient. Patients assigned to Goldman cardiac index = 3 or 4; Torrington pulmonary index = 3 and maximal exercise capacity tower than 3 METS correlated well with high morbidity and mortality. Using together the three indices, sensitivity was similar but specificity was better: all the patients who eventually died postoperatively had been preoperatively assigned to the high risk group. Our findings suggest that outcome and severity of complications after resective pulmonary surgery correlate with high risk cardiac, pulmonary and/or cardiopulmonary predictive indices.

Alteraciones citologicas en el lavado broncoalveolar de los pacientes en tratamiento con amiodarona / Cytologic alterations in bronchoalveolar lavage in amiodarone treated patients

Once pacientes en trtamiento con amiodarona por presentar arritmias ventriculares severas fueron evaluados clínica y radiológicamente y considerados exentos de toxicidad pulmonar por la droga. Se efectuó fibrobroncoscopía y lavado broncoalveolar (BAL) realizando el estudio citológico del material obtenido y se continuó la administración de amiodarona independientemente de los resultados del mismo. Los hallazgos del BAL mostraron la presencia de depósitos lipídicos en los macrófagops alveolares, expresados como células espumosas en la microscopía óptica y como cuerpos de inclusión lamelares en la microscopía electrónica. En la mitad de los pacientes se detectó la existencia de alteraciones en el recuento celular diferencial del líquido de BAL, indicativas de alveolitis. En este grupo de pacientes la PaO2 y la relación PaO2/PAO2 fueron significativamente menores al resto (76 ñ 9 vs 89 ñ 5 mmHg y 0,72 ñ 0,1 vs 0,85 ñ 0,08, respectivamente; p < 0,05). Al cabo de un año 5 de los pacientes (2 pertenecientes al grupo com "alveolitis") continuaban tomando la droga sin presentar evidencias clínicas de toxicidad pulmonar. Estos resultados muestran que la presencia de macrófagos espumosos o cuerpos lamelares en el BAL de pacientes en tratamiento con amiodarona es un dato inespecífico que carece de valor para el diagnóstico de toxicidad pulmonar por la droga. Simismo se advierte que un alto porcentaje de pacientes puede presentar alveolitis detectable por hipoxemia y alteraciones citológicas en el BAL, que aparentemente no progresa hacia formas clínicamente manifiestas de toxicidad

Linfangiomiomatosis pulmonar asociada con esclerosis tuberosa / Lung lyphangiomyomatosis associated with tuberous sclerosis

Se comunica el caso de una mujer de 44 años con cuadro clínico-histopatológico de una linfangiomiomatosis. Presentaba además lesiones cutáneas y estigmas neurológicos de esclerosis tuberosa. Desarrolló quilotorax recurrente y peoría progresiva que no pudieron ser controladas mediante tratamiento con dieta, broncodilatadores, corticoides y progesterona. La búsqueda de receptores estrogénicos en una biopsia pulmonar a cielo abierto fue positiva. Tal hallazgo representa una evidencia importante para establecer una asociación entre esclerosis tuberosa y linfangiomiomatosis. El tratamiento con tamoxifeno y la pleurodesis con tetraciclina fueron medidas terapéuticas satisfactorias para detener el curso progresivo de la enfermedad y controlar el quilotorax

Riesgo del cateterismo Swan-Ganz en la hipertensión pulmonar primaria / Risk of the Swan-Ganz catheterization in primary pulmonary hypertension

Se describen 2 pacientes portadores de hipertensión pulmonar primaria, comprobada por autopsia. Ambas presentaron un colapso hemodinámico, en un caso fatal, después del enclavamiento espontáneo de un catéter de Swan-Ganz en ramas periféricas de arterias pulmonares. En la paciente que falleció pocas horas después de ocurrida la complicación, no se apreciaron alteraciones morfológicas que explicaran el trastorno hemofinámico observado. La migración y enclavamiento espontáneos del catéter parecerían constituir una complicación más frecuente y sus consecuencias particularmente peligrosas (a diferencia de lo que ocurre habitualmente) en estos pacientes, por lo cual sería recomendable retirar el dispositivo en cuestión a una posición bien proximal en el tronco de la arteria pulmonar luego de registrar en forma basal y por única vez la presión capilar pulmonar mediante el inflado del balón, ya que en enfermedades cuya terapéutica es de eficacia discutida es preferible no ahondar el estudio cuando éste importa un riesgo para el enfermo