RÉSUMÉ
Abstract Leishmaniasis are neglected diseases transmitted by vectors that affect domestic and wild animals, including humans. Due to its incidence and lethality, this zoonosis is a worrying public health problem, making it essential to identify all links in the transmission chain. Infection of wild mammals by Leishmania spp. remains poorly understood, especially in southern Brazil. Therefore, the objective was to research, using the PCR technique, the presence of Leishmania spp. DNA in road-killed wild mammals in Southern Brazil. Carcasses of 96 animals were collected from highways in the Pelotas microregion, Rio Grande do Sul, southern Brazil and subjected to necropsies. Tissue fragments (spleen, skin, liver, kidney, heart, lung, lymph nodes, bone marrow and blood) were collected and genomic DNA was extracted. PCR protocols targeting the ITS1, kDNA and 18S genes were tested. We found no evidence of Leishmania spp. circulation in the studied population. However, epidemiological studies like this one are of great relevance, as they allow monitoring of the occurrence of pathogens and help identify possible risk areas. As these animals act as epidemiological markers for the presence of the microorganism, studies must be carried out continuously to understand whether there are sources of infection in the region.
Resumo As leishmanioses são doenças negligenciadas, transmitidas por vetores que acometem animais domésticos e silvestres, incluindo os humanos. Devido a sua incidência e letalidade, essa zoonose consiste em um problema de saúde pública preocupante, sendo fundamental a identificação de todos os elos da cadeia de transmissão. A infecção de mamíferos silvestres por Leishmania spp. permanece pouco compreendida, especialmente no sul do Brasil. Portanto, objetivou-se pesquisar, por meio da técnica de PCR, a presença de DNA de Leishmania spp. em mamíferos silvestres atropelados no Sul do Brasil. Carcaças de 96 animais foram coletadas, em rodovias da microrregião de Pelotas, Rio Grande do Sul, sul do Brasil e submetidas a necropsias. Fragmentos de tecidos (baço, pele, fígado, rim, coração, pulmão, linfonodos, medula óssea e sangue) foram coletados e o DNA genômico foi extraído. Protocolos de PCR visando os genes ITS1, kDNA e 18S foram testados. Não foram encontradas evidências de circulação de Leishmania spp. na população estudada. Porém, estudos epidemiológicos como este são de grande relevância, pois permitem monitorar a ocorrência de patógenos e auxiliam na identificação de possíveis áreas de risco. Como esses animais atuam como marcadores epidemiológicos da presença do microrganismo, estudos devem ser realizados continuamente, para entender se existem fontes de infecção na região.
RÉSUMÉ
Abstract Neospora caninum is an obligate intracellular protozoan with canids (Canis domesticus, Canis lupus dingo, Canis latrans, Canis lupus) as its definitive hosts. The objective of this study was to detect anti-N. caninum antibodies in pregnant women seen at referral center for prenatal screening in the state of state Mato Grosso do Sul, Brazil. A total of 188 serum samples from pregnant women provided by the Instituto de Pesquisa, Ensino e Diagnósticos da APAE de Campo Grande (IPED/ APAE) were subjected to IFA test and western blot analysis. The samples were divided into three groups: 23/99 samples from the seropositive group for toxoplasmosis were positive for anti-N. caninum IgG antibodies, and 9/99 positive for IgM; in the HIV group, 7/33 were positive for IgG; and in the HIV+toxoplasmosis group, 13/56 were positive for IgG and two positive for IgM. The seropositivity for IgG was assessed by western blot by testing 43 IFA test positive samples using rNcSRS2 (Nc-p43) as antigen. The serological results of the present study suggest that exposure of these pregnant women to the parasite N. caninum and presence of IgM antibodies are indicative of recent infection. Further studies are needed to establish the possibility of active infection.
Resumo Neospora caninum é um protozoário intracelular obrigatório que possui os canídeos (Canis domesticus, Canis lupus dingo, Canis latrans, Canis lupus) como seus hospedeiros definitivos. O objetivo deste trabalho foi detectar anticorpos anti-N. caninum em gestantes, atendidas em centro de referência para triagem pré-natal, em Mato Grosso do Sul, Brasil. Um total de 188 amostras de soro de gestantes, cedidas pelo Instituto de Pesquisa, Ensino e Diagnósticos da APAE de Campo Grande (IPED/ APAE), foram submetidas ao teste de RIFI e western blot para a detecção de anticorpos anti-N. caninum. As amostras foram divididas em três grupos: 23/99 amostras do grupo soropositivo para toxoplasmose demonstraram positividade para anticorpos IgG anti-N. caninum e 9/99 positivos para IgM. No grupo HIV 7/33 apresentaram positividade para IgG. No grupo HIV+Toxoplasmose 13/56 apresentaram positividade para IgG e duas para IgM. A soropositividade para IgG foi avaliada por western blot, testando 43 amostras positivas para RIFI, usando-se rNcSRS2 (Nc-p43) como antígeno. Os resultados sorológicos do presente estudo sugerem exposição dessas gestantes ao parasita N. caninum e a positividade para anticorpos IgM são indicativos de infecção recente. Mais estudos na área são necessários para estabelecer a possibilidade de infecção ativa.