Allogenic platelet-rich plasma in induced ulcers in rat's cornea / [Plasma rico em plaquetas alogênico em úlceras de córnea induzidas em ratos]

The objective in this study was to evaluate the clinic effect of applying allogenic platelet-rich plasma (PRP) heated or not, for treating cornea ulcers, including the dosage of PDGF-BB in the cornea. The ulcers were induced, standardizing the left eye from 81 rats (Ratus norvegicus, albinus variety), assigned randomly into three groups (N=27): control group (CG) which did not receive any topic treatment; heated PRP group (GA) and PRP group (GP), which received topical treatment every eight hours for five days. Each group underwent evaluation at 24 hours (M1), three days (M3) and five days (M5). The clinical exam evaluated the opacity, vascularization and corneal repair. The corneal PDGF-BB was dosed through the ELISA method. The corneal opacity was decreased in PRP-treated animals (GA and GP) and corneal repair time reduced when compared to CG at M1 and M5. Furthermore, GP showed greater vascularization at M3 compared to M1. Applied allogenic PRP eye drops, heated or not, speed up corneal healing, and reduce corneal repair time. However, the corneal PDGF concentration was not altered in any of the treatments.(AU)

Objetivou-se avaliar o efeito clínico da aplicação de plasma rico em plaquetas alogênico (PRP) aquecido ou não, no tratamento de úlceras de córnea, como a dosagem de PDGF-BB na córnea. As úlceras foram induzidas, padronizando-se o olho esquerdo de 81 ratos (Rattus norvegicus, variedade albinus), aleatoriamente, nos três grupos (N = 27): grupo controle (CG), que não recebeu nenhum tratamento tópico; grupo PRP aquecido (GA) e grupo PRP (GP), que receberam tratamento tópico a cada oito horas, durante cinco dias. Cada grupo foi subdividido em 24 horas (M1), três dias (M3) e cinco dias (M5). O exame clínico avaliou a opacidade, a vascularização e o reparo corneano. O PDGF-BB corneano foi dosado pelo método Elisa. Houve diminuição da opacidade da córnea nos animais tratados com PRP (GA e GP) e diminuição do tempo de reparo da córnea em comparação com CG, M1 e M5. Além disso, foi observada maior vascularização no GP no momento M3 em relação ao M1. A aplicação de colírios de PRP alogênico, aquecidos ou não, acelera a cicatrização da córnea, além de reduzir o tempo de reparo da córnea. No entanto, a concentração de PDGF na córnea não se alterou em nenhum dos tratamentos.(AU)

Mensurações do bulbo ocular e cálculo do poder dióptrico da lente intraocular em miniporcos / Ocular bulb measurements and diopter power calculation of the lens in minipigs

Objetivou-se com este trabalho determinar o poder dióptrico da lente intraocular (LIO) em miniporco e as dimensões do bulbo do olho. Foram utilizados 17 miniporcos, sadios, adultos, machos e fêmeas, com peso médio de 70kg. Em todos os olhos foram realizadas a ultrassonografia modo A, a ceratometria e a medida da distância limbo a limbo. O cálculo do poder dióptrico da LIO foi obtido utilizando-se as fórmulas Haigis, Hoffer Q, SRK/T, Holladay I e Holladay II e o software Holladay IOL Consultant(r). Na comparação entre o sexo e a lateralidade do olho, não houve diferença nas variáveis biométricas e poder da LIO. A aplicação das fórmulas (Haigis, Holladay II, Holladay I, SRK/T e Hoffer Q) possibilitou o cálculo do poder da LIO. A Holladay II, fórmula que melhor individualiza o bulbo do olho do miniporco, estima valor dióptrico ao redor de 41 D. Os miniporcos têm potencial como modelo experimental em oftalmologia, relacionado ao seu menor porte e à facilidade no manejo, especialmente em experimentos de longa duração.

The aim of this study was to determine the refractive power of intraocular lens (IOL) of mini pigs and the dimensions of the eyeball. A total of 17 (34 eyes) healthy, adult, males and female animals, with average weight of 70kg were used. For every eye, A-mode ultrasound, keratometry and the measurement of limbo-to-limbo distance were conducted, all variables for calculating the refractive power of the IOL. The value was obtained using different formulas and Holladay IOL Consultant(r) Software. Additionally, the ocular measurements were compared per sex, laterality of the eye and the different formulas used in this study (Haigis, Hoffer Q, SRK / T, Holladay I and Holladay II). In the comparison between sex and laterality of the eye, there was no difference in biometric variables and power of the IOL. The application of the employed formulas (Haigis, Holladay II, Holladay I, SRK / T and Hoffer Q) allowed the IOL power calculation for this specie, and the observed value ranged between 39.58±2.15 and 46.60±2.81 diopters. Mini pigs play an important and growing role as an experimental model for study and practice of ophthalmic procedures, specially related to their smaller size and easy management in long-term experiments.

Avaliação histomorfométrica e da proliferação celular em úlceras de córnea superficiais, induzidas em coelhos, após o uso de colírio de Citrus lemon / Histomorphometry evaluation and cellular proliferation in superficial corneal ulcer, induced in rabbits, after using eyedrops of Citrus lemon

O objetivo do presente estudo foi avaliar e comparar, por meio de histomorfometria e imuno-histoquímica para PCNA (Antígeno Nuclear de Proliferação Celular), o processo de reparação corneal de úlceras superficiais induzidas em coelhos e tratadas com colírios de óleo essencial de Citrus lemon (CL). Foram utilizadas 40 fêmeas da espécie leporina, constituindo-se quatro grupos experimentais de 10 animais cada. Todos os animais foram submetidos à indução da úlcera superficial experimental por meio da aplicação tópica de n-heptanol. Em dois grupos foram instilados colírios à base de óleo essencial de Citrus lemon, em diferentes concentrações, sendo 3% (GL3) e 5% (GL5). Outro grupo foi tratado com Tween 80 8% (GT), que é o diluente utilizado na produção dos colírios de CL; o grupo controle (GC) recebeu apenas substituto da lágrima. Todos os colírios foram aplicados quatro vezes ao dia. Os grupos experimentais foram distribuídos em dois subgrupos, com cinco animais cada, de acordo com os períodos finais de avaliação. O primeiro subgrupo (M1) foi avaliado após 24 horas e o segundo (M2), após cinco dias. Nas comparações entre os momentos iniciais e finais, os grupos tratados com substituto da lágrima, Tween 80 8% e colírio à base de óleo essencial de Citrus lemon 5% promoveram aumento na espessura epitelial na periferia da córnea e maior percentual de proliferação celular. Não houve diferença de celularidade entre os tratamentos. Os colírios à base de óleo essencial de Citrus lemon, nas diferentes concentrações, promoveram a reepitelização corneal, sem causar lesões adicionais ao epitélio ou estroma corneal, podendo ser utilizado na superfície ocular.

The aim of this study was to evaluate and compare through histomorphometry and immunohistochemistry for PCNA (Proliferating Cell Nuclear Antigen), the repair process in superficial corneal ulcers induced in rabbits and treated with eyedrops of Citrus lemon (CL) essential oil. Fifty female rabbits were used and divided into 4 experimental groups of 10 animals each one. Every animal underwent induction of experimental superficial ulcer by topical application of n-heptanol. Three groups were treated with eyedrops of Citrus lemon essential oil in two different concentrations: 3% (GL3) and 5% (GL5). Another group was treated with Tween 80 8% (GT), which is the solvent used in the production of eyedrops of CL; the control group (CG) received only tear substitute. All eyedrops were applied four times daily. The experimental groups were divided into two subgroups with five animals in each one, according to the final evaluation periods. The first subgroup (M1) was evaluated after 24 hours and the second (M2) after 5 days. In the comparison between the initial and final moments, the groups treated with tear substitute, Tween 80 8% and eyedrops of Citrus lemon essential oil 5% had an increase in epithelial thickness at the periphery of the cornea and a higher percentage of cell proliferation. There was no difference in cellularity between treatments. The eyedrops of Citrus lemon essential oil, at different concentrations, promoted corneal reepithelialization without causing further injury to the epithelium and corneal stroma, so they can be used on the ocular surface.

Expressão de metaloproteinases de matriz e PCNA em úlceras de córnea profundas, induzidas em coelhos, tratadas com plasma rico em plaquetas / Expression of matrix metalloproteinases and PCNA in deep corneal ulcers induced in rabbits, treated with platelet-rich plasma

O objetivo deste estudo foi avaliar a influência do plasma rico (PRP) e pobre (PPP) em plaquetas na proliferação celular e expressão de metaloproteinases de matriz (MMPs), durante a reparação de úlceras corneais profundas. Foram utilizadas 45 coelhas, distribuídas em 3 grupos (G) experimentais (n=15), designados como grupos PRP (GR), PPP (GP) e Controle (GC), de acordo com o tratamento. Todos os animais foram submetidos à indução cirúrgica unilateral de úlcera corneal. No GR e GP, o sangue autólogo foi centrifugado, utilizando-se protocolo padronizado, e foram confeccionados os colírios de PRP e PPP, e instilados cinco vezes ao dia. No GC, foi utilizado colírio lubrificante. Cada grupo foi subdividido (n=5), segundo o momento final de avaliação, sendo 4 (M4), 7 (M7) e 30 dias (M30). As córneas dos animais foram processadas para avaliação morfológica e imuno-histoquímica para PCNA, MMP1, MMP2, MMP9, MT1-MMP e TIMP1. No M4, os níveis de MMP2 foram maiores no GP e GR, sendo que, no M7, esse comportamento foi observado apenas no GP. No M30, no GR, verificou-se maior número de células epiteliais e marcação para MMP1 que o GP. No GR, a proliferação celular foi maior no M4 que nos demais momentos, e a marcação para MMP2 foi maior no M4 que no M30. O PRP estimula a proliferação celular na fase inicial (M4) do tratamento quando comparado aos demais momentos, diferentemente dos demais tratamentos. O uso de colírios de plasma rico e pobre em plaquetas influencia a expressão de metaloproteinases de matriz envolvidas no processo de reparação corneal.

The aim of this study was to evaluate the influence of platelet-rich (PRP) and poor (PPP) plasma in cell proliferation and matrix metalloproteinases (MMPs) expression during the repair of deep corneal ulcers. Forty-five female rabbits were distributed in 3 experimental groups (G) (n = 15), referred to as PRP (GR), PPP (GP) and Control (GC) groups, in accordance with the treatment. All animals underwent surgical induction of unilateral corneal ulcer. PRP and PPP eye drops were made by using centrifuged blood through standardized protocol, and instilled five times a day. In GC, lubricant eye drops were used. Each group was subdivided (n = 5) according to the final time point, 4 (M4), 7 (M7) and 30 days (M30). The animals' corneas were processed for morphological and immunohistochemical analysis for PCNA, MMP1, MMP2, MMP9, MT1-MMP and TIMP1. In M4, the levels of MMP2 were higher in GP and GR, and in M7, this behavior was only observed in the GP. In M30, more epithelial cells and MMP1 expression were found in GR than GP. In GR, cell proliferation was higher in M4 than at other time points and MMP2 expression was higher in M4 than M30. The PRP stimulates cell proliferation in the early phase (M4) of treatment when compared to other time points, different from other treatments. The use of eye drops of platelet-rich and poor plasma influences the expression of matrix metalloproteinases involved in the corneal repair process.

Hemangiossarcoma corneal em cão / Corneal hemangiosarcoma in a dog

O hemangiossarcoma é uma neoplasia maligna e sua apresentação corneal é rara em cães. Relata-se um caso de hemangiossarcoma corneal primário, em uma fêmea canina, sem raça definida, de 20kg, nove anos de idade e com histórico de crescimento progressivo de massa em bulbo ocular direito há dois meses. Ao exame oftálmico do olho direito, foram observados blefarospasmo, hiperemia conjuntival moderada e presença de nódulo avermelhado, irregular em região dorsal de córnea direita, ocupando cerca de 60% dela. A ultrassonografia ocular foi realizada, e constatou-se que a neoplasia acometia apenas a córnea. Por meio do exame citológico, foi diagnosticada neoplasia mesenquimal maligna. O paciente foi submetido à ceratectomia seguida de flap de terceira pálpebra. Encaminhou-se o material excisado para análise histopatológica, e foi diagnosticado hemangiossarcoma. Após 15 dias, o flap de terceira pálpebra foi retirado, e, ao exame oftálmico, notou-se a recidiva da neoplasia, que recobria toda a córnea e parte da conjuntiva bulbar, procedendo-se à enucleação. O paciente foi submetido à ultrassonografia abdominal e à radiografia torácica sem nenhuma alteração evidente, o que caracterizou o caráter primário da afecção. Após dois anos do procedimento cirúrgico, o paciente encontra-se bem clinicamente, sem qualquer sinal de recidiva ou metástase. Apesar da exérese cirúrgica da neoplasia com margens limpas, em casos de hemangiossarcoma com comportamento agressivo, a enucleação deve ser considerada uma opção viável para um protocolo terapêutico de sucesso e melhor prognóstico do paciente.(AU)

Hemangiosarcoma is a malignant neoplasm and its corneal presentation is uncommon in the dog. The present work reports a case of primary corneal hemangiosarcoma on a mongrel female dog, 20kg, nine years old with a 2 month history of a mass with progressive growth in the right eye. The ophthalmic examination of the right eye showed blepharospasm, moderated conjunctival hyperemia and the presence of a reddish irregular nodule on the dorsal region of the cornea, occupying approximately 60% of the cornea. The ocular ultrasound revealed that the neoplasm affected only the cornea and the cytological examination diagnosed a malignant mesenchymal neoplasm. The patient was submitted to keratectomy followed by a third eyelid flap. The excised material was sent for histopathological analysis that diagnosed hemangiosarcoma. Fifteen days after surgery the third eyelid flap was removed and the ophthalmic examination revealed recurrence of the tumor, with the mass occupying the entire cornea and part of the bulbar conjunctiva. The patient was submitted to enucleation. No alterations were observed on the abdominal ultrasound and thoracic radiography, showing the primary characteristics of the disease. Two years after surgery the patient is clinically healthy, without any signs of recurrence or metastasis. Despite the surgical excision of the tumor with free margins, in cases of hemangiosarcoma with aggressive behavior, the enucleation should be considered as a viable option for a successfull therapeutic protocol and better prognosis of the patient.(AU)

Uso de plasma rico em plaquetas em úlceras de córnea em cães / Use of platelet rich plasma on corneal ulcers in dogs

Este trabalho teve por objetivo avaliar, clínica e macroscopicamente, o tratamento adjuvante com plasma rico em plaquetas na forma de colírio ou tampão, em úlceras de córnea de cães atendidos no Serviço de Oftalmologia Veterinária. Foram analisados 20 olhos com diagnóstico de ceratite ulcerativa, distribuídos em dois grupos experimentais. O grupo colírio (GC) foi constituído por olhos tratados topicamente com colírio autólogo de plasma rico em plaquetas (PRP), e o grupo tampão (GT) por olhos submetidos ao tratamento à base de tampão sólido de PRP, associado ao recobrimento com terceira pálpebra para retenção deste. Os grupos foram avaliados, por meio de avaliação clínica, macroscópica e análise da redução do defeito epitelial, em diferentes momentos, aos três, cinco, dez, 15 e 30 dias, com exceção do terceiro dia no GT. O recobrimento da terceira pálpebra foi removido no quinto dia no GT. Em ambos os grupos, houve redução dos sinais de inflamação, melhora na sensibilidade ocular e adequada reparação do defeito epitelial. Todos os olhos do GT apresentaram completa cicatrização no quinto dia e 70% no GC, atingindo a totalidade no 10º dia. O PRP na forma de colírio ou tampão é uma excelente terapia adjuvante a ser instituída no tratamento clínico da úlcera de córnea em cães, pois atua na diminuição dos sinais inflamatórios, da dor ocular e auxilia potencialmente na cicatrização do defeito epitelial...

This study aims to clinically and macroscopically evaluate the adjuvant therapy with platelet-rich plasma in the form of eyedrops or clot, for corneal ulcers in dogs treated at the Veterinary Ophthalmology Service. We analyzed 20 eyes diagnosed with ulcerative keratitis, divided into two experimental groups. The eyedrop group (GC) was composed of eyes treated topically with eyedrops of autologous platelet-rich plasma (PRP), and the clot group (GT) was composed of eyes treated with a platelet-rich clot and covered with a third eyelid for retention of the clot. The groups were evaluated by clinical and macroscopic analysis and by the analysis of epithelial defect reduction, at different times, at three, five, ten, 15 and 30 days, except for the third day in GT. The coverage of the third eyelid was removed on the fifth day. In both groups the inflammation signs reduced, there was an improvement in ocular sensibility and proper repair of epithelial defect. All GT eyes and 70% GC eyes showed complete healing on the fifth day, the remainder of GC completed healing on the tenth day. PRP in the form of eyedrops and clot is an excellent adjuvant therapy to be instituted in the clinical treatment for corneal ulcer in dogs, because it decreases the inflammatory signs and the ocular pain and it potentially assists in healing epithelial defects...