Pediatric tuberculosis under six years old: an 18-year experience of a level II hospital

Background: Tuberculosis disease under six years is an indicator of recent transmission within the community. We aim to characterize tuberculosis disease in children under six years in a pediatric department of a level II hospital in the Lisbon metropolitan area, which serves a high percentage of immigrants from Portuguese-speaking African countries. Methods: Retrospective and descriptive study of tuberculosis disease cases treated in our Department between January 2004 and December 2021 (18 years). Descriptive analysis of the collected data was performed using SPSS Statistics® 25. Results: 25 patients were included, 60% diagnosed between 2016 and 2021. Five patients were born in countries with high TB incidence and 11 other patients had immigrant families from such countries. Ten out of 13 patients not immunized with BCG had the recommendation to do so. A close contact with tuberculosis was known in 15 patients, and in seven of those the system for TB prevention failed. At diagnosis: 4/25 patients had disseminated tuberculosis (three miliary and one congenital). Conclusions: The increase in tuberculosis disease cases under six years in the last three years points to some pitfalls in tuberculosis surveillance and transmission prevention. New studies and institutional protocols are needed to improve the effectiveness of the network involved in TB prevention and treatment.

Abdominal ultrasound in amazonian manatee (Trichechus inunguis) (Natterer, 1883) / Ultrassonografia abdominal em peixe boi amazônico (Trichechus inunguis (Natterer, 1883)

Morphophysiological species researches are fundamental, and diagnostic imaging is an excellent technique, already used in wild animals, with great application, not invasive and provide real-time information of each body. Amazonian manatees are on the list of endangered animals classified in the vulnerable category and knowledge of the normal pattern of ultrasound anatomy of organs and tissues is important for the maintenance and well-being of captive specimens contributing to reintroduction actions. The objective of the study was to standardize the examination technique and describe the ultrasound findings of the liver, gallbladder, stomach, urinary bladder and the subcutaneous tissue of the abdominal region in Trichechus inunguis, in order to contribute with the anatomical and sonographic knowledge and assist in the diagnosis and prognosis diseases. The study used 18 animals to describe the normal sonographic anatomy in the abdominal cavity of the Amazonian manatee. During abdominal scan, it was possible to visualize the features of the liver, gallbladder, stomach, urinary bladder obtained satisfactory results in this study. Therefore, other structures were not primarily identified by the reduced time, lots of fat and gases in intestines of animals.

Pesquisas morfofisiológicas em espécies selvagens são fundamentais, e o diagnóstico por imagem é uma excelente técnica, já usada e com grande aplicação, não invasiva e que fornece informações em tempo real de cada órgão. Peixes-boi-amazônico encontram-se na lista de animais ameaçados de extinção classificados na categoria vulnerável e o conhecimento do padrão normal da anatomia ultrassonográfica de órgãos e tecidos é importante para a manutenção e bem-estar de espécimes em cativeiro contribuindo para ações de reintrodução. O objetivo deste estudo foi padronizar a técnica de exame e descrever os achados ultrassonográficos do fígado, vesícula biliar, estômago, vesícula urinária e o tecido subcutâneo da região abdominal em Trichechus inunguis, de modo a contribuir com o conhecimento anátomo-sonográfico e auxiliar no diagnóstico e prognóstico de doenças. O estudo utilizou 18 animais para descrever a anatomia ultrassonográfica normal na cavidade abdominal de peixe-boi amazônico. Durante a varredura abdominal foi possível visualizar as características dos órgãos obtendo resultados satisfatórios neste estudo, concluindo ser uma técnica eficiente para avaliação de determinados órgãos abdominais em peixe-boi amazônico. Entretanto, outras estruturas não foram identificadas principalmente pelo tempo reduzido, muita gordura e gases nos intestinos dos animais.

Abdominal ultrasound in amazonian manatee (Trichechus inunguis) (Natterer, 1883)

Abstract Morphophysiological species researches are fundamental, and diagnostic imaging is an excellent technique, already used in wild animals, with great application, not invasive and provide real-time information of each body. Amazonian manatees are on the list of endangered animals classified in the vulnerable category and knowledge of the normal pattern of ultrasound anatomy of organs and tissues is important for the maintenance and well-being of captive specimens contributing to reintroduction actions. The objective of the study was to standardize the examination technique and describe the ultrasound findings of the liver, gallbladder, stomach, urinary bladder and the subcutaneous tissue of the abdominal region in Trichechus inunguis, in order to contribute with the anatomical and sonographic knowledge and assist in the diagnosis and prognosis diseases. The study used 18 animals to describe the normal sonographic anatomy in the abdominal cavity of the Amazonian manatee. During abdominal scan, it was possible to visualize the features of the liver, gallbladder, stomach, urinary bladder obtained satisfactory results in this study. Therefore, other structures were not primarily identified by the reduced time, lots of fat and gases in intestines of animals.

Resumo Pesquisas morfofisiológicas em espécies selvagens são fundamentais, e o diagnóstico por imagem é uma excelente técnica, já usada e com grande aplicação, não invasiva e que fornece informações em tempo real de cada órgão. Peixes-boi-amazônico encontram-se na lista de animais ameaçados de extinção classificados na categoria vulnerável e o conhecimento do padrão normal da anatomia ultrassonográfica de órgãos e tecidos é importante para a manutenção e bem-estar de espécimes em cativeiro contribuindo para ações de reintrodução. O objetivo deste estudo foi padronizar a técnica de exame e descrever os achados ultrassonográficos do fígado, vesícula biliar, estômago, vesícula urinária e o tecido subcutâneo da região abdominal em Trichechus inunguis, de modo a contribuir com o conhecimento anátomo-sonográfico e auxiliar no diagnóstico e prognóstico de doenças. O estudo utilizou 18 animais para descrever a anatomia ultrassonográfica normal na cavidade abdominal de peixe-boi amazônico. Durante a varredura abdominal foi possível visualizar as características dos órgãos obtendo resultados satisfatórios neste estudo, concluindo ser uma técnica eficiente para avaliação de determinados órgãos abdominais em peixe-boi amazônico. Entretanto, outras estruturas não foram identificadas principalmente pelo tempo reduzido, muita gordura e gases nos intestinos dos animais

Avaliação dos parâmetros de qualidade físico-químicos de creme-géis à base de ácido hialurônico adquiridos em farmácias magistrais do município de Campo Grande-MS / Evaluation of the physicochemical quality parameters of cream-gels based on hyaluronic acid purchased in compounding pharmacies in the city of Campo Grande-MS / Evaluación de parámetros de calidad fisicoquímica de geles-crema a base de ácido hialurónico adquiridos en farmacias magistrales de la ciudad de Campo Grande-MS

RESUMO Introdução: ao longo dos anos, a busca pela melhora do autocuidado estendeu-se às farmácias com manipulação, onde o cosmético pode ser manipulado de acordo com as preferências de cada indivíduo. Dessa forma, é necessário prover a estabilidade para cada produto manipulado, garantindo que um cosmético seguro e eficaz será dispensado. O ácido hialurônico é um ativo que tem se tornado popular devido à sua capacidade de realizar a manutenção da elasticidade da pele e exercer função hidratante, além de atuar na redução de linhas de expressão. Objetivo: analisar a qualidade de dermocosméticos manipulados a base de ácido hialurônico de diferentes farmácias com manipulação no município de Campo Grande-MS, através de análises laboratoriais físico-químicas e de rotulagem. Material e métodos: quatro amostras de creme-gel à base de ácido hialurônico 5% foram adquiridas em farmácias magistrais, e realizadas as seguintes análises de controle de qualidade: análise organoléptica, determinação de pH, densidade, teste de centrífuga, espalhabilidade e análise de rotulagem. Resultados: em relação às análises, os resultados obtidos foram satisfatórios. A análise organoléptica, o teste de centrifugação e de espalhabilidade se encontraram dentro dos padrões estipulados; porém, destaca-se o ensaio de densidade, em que duas amostras obtiveram valores abaixo do estipulado; e para a análise de rótulos, nenhum produto continha lista de componentes da formulação. Conclusão: ao final das análises, pode ser apontado que os produtos apresentaram desempenho satisfatório em grande parte dos testes propostos e são uma opção segura, de boa qualidade e custo acessível ao público.

SUMMARY Introduction: Over the years, the search for improving self-care has extended to compound pharmacy, where the cosmetic can be manipulated according to the preferences of each person. Thus, it is necessary to provide stability for each product handled, ensuring that a safe and effective cosmetic will be dispensed. Hyaluronic acid is an active that has become popular due to its ability to maintain skin elasticity and exert a moisturizing function, in addition to acting in the reduction of fine lines. Aim: To analyze the quality of cosmetics manipulated with the active ingredient of Hyaluronic Acid from different compound pharmacies in the city of Campo Grande-MS, through physical-chemical laboratory analysis and labeling. Material and methods: Four samples of 5% hyaluronic acid-based cream-gel were acquired from master pharmacies, and the following quality control analyzes were carried out: organoleptic analysis, pH determination, density, centrifuge test, spreadability and labeling analysis. Results: Regarding the analyses, the results obtained were satisfactory. The organoleptic analysis, the centrifugation test and the spreadability were within the stipulated standards; however, the density test stands out, in which two samples obtained results below the stipulated; and for label analysis, no product contained a list of formulation components. Conclusion: At the end of the analyses, it can be pointed out that the products presented satisfactory performance in most of the proposed tests and are a safe option, of good quality and accessible to the public.

RESUMEN Introducción: a lo largo de los años, la búsqueda por mejorar el autocuidado se ha extendido a las farmacias, donde los cosméticos pueden ser manipulados según las preferencias de cada individuo. Por lo tanto, es necesario proporcionar estabilidad a cada producto manipulado, asegurando que se dispensará un cosmético seguro y eficaz. El ácido hialurónico es un activo que se ha popularizado por su capacidad para mantener la elasticidad de la piel e hidratarla, además de actuar para reducir las líneas de expresión. Objetivo: analizar la calidad de los dermocosméticos manipulados a base de ácido hialurónico de diferentes farmacias en Campo Grande-MS, mediante análisis de laboratorio físico-químico y marcaje. Material y métodos: se adquirieron en farmacias magistrales cuatro muestras de crema-gel a base de ácido hialurónico al 5%, y se realizaron los siguientes análisis de control de calidad: análisis organoléptico, determinación de pH, densidad, prueba de centrifugación, untabilidad y análisis de marcaje. Resultados: en cuanto a los análisis, los resultados obtenidos fueron satisfactorios. Las pruebas de análisis organoléptico, centrifugado y untabilidad estuvieron dentro de los estándares estipulados, sin embargo, se destaca la prueba de densidad, en la que dos muestras obtuvieron valores por debajo del valor estipulado y para el análisis de etiquetas, ningún producto contenía una lista de componentes de la formulación. Conclusión: los productos se desempeñaron satisfactoriamente en la mayoría de las pruebas propuestas y son una opción segura, con buena calidad y su costo accesible al público.

Cutaneous mast cell tumor in a captive Bush dog (Speothos venaticus): pathological and immunophenotypical aspects - case report / Mastocitoma cutâneo em um cachorro-do-mato vinagre (Speothos venaticus) de cativeiro: aspectos patológicos e imunofenotípicos - relato de caso

A senile male captive bush dog (Speothos venaticus) presented a small perianal cutaneous nodule. Histologically, there was an ulcerated round cell tumor composed of well differentiated mast cells with abundant intracytoplasmic purple Giemsa-positive granules, with a diffuse eosinophilic infiltrate. Immunohistochemistry revealed that 30% of the neoplastic cells were positive for Kit in the cytoplasm and cell membrane, and all neoplastic cells were negative for MAC and CD3. Less than 10% of the neoplastic cells were positive for Ki67. At necropsy other primary tumors were identified in this animal, including an intestinal adenoma, an adrenal cortex adenoma and a testicular interstitial cell tumor.(AU)

Um cachorro-vinagre (Speothos venaticus) apresentou um nódulo cutâneo pequeno na região perianal. Histologicamente havia neoplasia cutânea de células redondas e ulcerada, constituída por mastócitos bem diferenciados, com abundantes grânulos citoplasmáticos metacromáticos na coloração de Giemsa e infiltrado eosinofílico difuso. A imuno-histoquímica demonstrou que 30% das células neoplásicas eram positivas para a proteína Kit no citoplasma e na membrana celular. As células foram negativas para MAC e CD3. Menos de 10% das células neoplásicas foram positivas para Ki67. Durante a necropsia, foram identificados outros tumores primários, como adenoma intestinal, adenoma cortical da adrenal e tumor de células intersticiais do testículo.(AU)

Intraocular pressure and pupil diameter in healthy cats anesthetized with isoflurane and pre-medicated with isolated acepromazine or in combination with tramadol / [Pressão intraocular e diâmetro pupilar em gatos saudáveis anestesiados com isoflurano e pré-medicados com acepromazina isolada ou em combinação com tramadol]

The objective of this study was to determine changes on intraocular pressure (IOP) and pupil diameter (PD) in healthy cats anesthetized with isoflurane, and premedicated with acepromazine alone or in combination with tramadol. Thirty cats were allocated in two groups (n=15/each) and were treated with acepromazine (AG) or acepromazine/tramadol (ATG). PD and IOP were assessed before and following 30 (PM1), and 40 minutes (PM2) of treatments. Anesthesia was induced with propofol, and IOP and DP were recorded (A10) at 10 minute intervals until the end of anesthesia (A40). IOP decreased in AG and ATG, when comparing baseline with PM1. IOP decreased only in AG, in comparisons between baseline and PM2. During anesthesia, IOP did not change within and between groups. Comparisons between baseline with those recorded at PM1 and 2 showed that PD increased in the ATG. During anesthesia, PD decreased significantly in AG and ATG. Both protocols maintained the IOP within the reference range to perform corneal or intraocular surgery in healthy cats but did not sustain pre-anesthetic pupil dilation observed in ATG.(AU)

O objetivo do presente artigo é determinar possíveis alterações na pressão intraocular (PIO) e no diâmetro pupilar (DP) em gatos saudáveis anestesiados com isoflurano e pré-medicados com acepromazina isolada ou em combinação com acepromazina/tramadol. Trinta gatos saudáveis foram distribuídos aleatoriamente em dois grupos (n=15/cada) e tratados com acepromazina (GA) ou acepromazina/tramadol (GAT). DP e PIO foram avaliadas antes (basal) e após 30 (PM1) e 40 minutos (PM2) dos tratamentos. A anestesia foi induzida com propofol, e a PIO e o DP foram registrados (A10) a cada 10 minutos até o final da anestesia com isoflurano (A40). Ao se compararem os valores obtidos no basal com PM1, a PIO diminuiu em GA e GAT; com PM2, a PIO reduziu apenas no GA. Durante a anestesia, a PIO não diferiu dentro e entre os grupos. Comparações entre os valores basais e os registrados em PM1 e em PM2 mostraram que a DP aumentou significativamente no GAT. Durante a anestesia, o DP diminuiu significativamente em GA e GAT. Ambos os protocolos mantêm a PIO dentro dos valores de referência para realizar cirurgias corneanas ou intraoculares em gatos saudáveis, mas não sustentam a dilatação pupilar pré-anestésica observada em GAT.(AU)

Diagnosis and treatment of HEp-2 cells contaminated with mycoplasma / Diagnóstico e tratamento de células HEp-2 contaminadas por micoplasma

Abstract Contamination of primary and cell cultures by mycoplasmas is one of the main economic and biological pitfalls in basic research, diagnosis and manufacture of biotechnological products. It is a common issue which may be difficult to conduct surveillance on. Mycoplasma presence may affect several physiological parameters of the cell, besides being considered an important source of inaccurate and/or non-reproducible scientific results. Each cell type presents characteristical symptoms, mainly morphological, that indicate a contamination by mycoplasma. HEp-2 cells originate from carcinoma of the larynx and are, therefore, part of the respiratory tract, which is one of mycoplasma habitats. Despite the importance these cells in several biological research (evaluation of cell proliferation and migration, apoptosis, antiviral and antitumor compounds), the alterations induced by mycoplasma contamination in HEp-2 cells have not yet been described. Here, we describe the progressive morphological alterations in culture of HEp-2 cells infected with mycoplasma, as well as the-diagnosis of the infection and its treatment. Mycoplasma contamination described within this work led to cytoplasm elongation, cell-to-cell spacing, thin plasma membrane projections, cytoplasmic vacuoles, fusion with neighboring cells, and, finally, cell death. Contamination was detected by fluorescence imaging (DAPI) and PCR reactions. The cultures were treated with BM-Cyclin antibiotic to eliminate contamination. The data presented here will be of relevance to researchers whose investigations involve cell culture, especially respiratory and HEp-2 cells.

Resumo A contaminação de culturas primárias e celulares por micoplasmas é uma das principais armadilhas econômicas e biológicas da pesquisa básica, diagnóstico e fabricação de produtos biotecnológicos. Trata-se de uma contaminação rotineira, mas de difícil acompanhamento. A presença de micoplasma pode afetar vários parâmetros fisiológicos da célula, além de ser considerada uma importante fonte de resultados científicos imprecisos e/ou não reprodutíveis. Cada tipo de célula apresenta sintomas característicos, principalmente morfológicos, que indicam uma contaminação por micoplasma. As células HEp-2 são originárias do carcinoma da laringe e, portanto, fazem parte do trato respiratório, um dos habitats do micoplasma. Apesar da importância destas células em diversas pesquisas biológicas (avaliação da proliferação e migração celular, apoptose, compostos antivirais e antitumorais), as alterações decorrentes da contaminação por micoplasma nestas células ainda não foi descrita. Aqui, descrevemos as alterações morfológicas progressivas na cultura de células HEp-2 infectadas por micoplasma, bem como o diagnóstico da infecção e seu tratamento. A contaminação por micoplasma descrita neste trabalho resultou em alongamento citoplasmático, espaçamento entre células, projeções delgadas da membrana plasmática, vacúolos citoplasmáticos, fusão de células vizinhas e, finalmente, morte celular. A contaminação foi detectada por imagens de fluorescência (DAPI) e reações de PCR. As culturas foram tratadas com antibiótico BM-Cyclin para eliminar a contaminação. Os dados aqui apresentados serão de relevância para pesquisadores cujas investigações envolvem cultura celular, principalmente células respiratórias e HEp-2.

Footwear designed to enhance energy return improves running economy compared to a minimalist footwear: does it matter for running performance?

The present study compared the effects of a footwear designed to enhance energy return (thermoplastic polyurethane, TPU) vs minimalist shoes on running economy (RE) and endurance performance. In this counterbalanced and crossover design study, 11 recreational male runners performed two submaximal constant-speed running tests and two 3-km time-trials with the two shoe models. Oxygen uptake was measured during submaximal constant-speed running tests in order to determine the RE at 12 km/h and oxygen cost of running (CTO2) at individual average speed sustained during the 3-km running time-trials wearing either of the two shoes. Our results revealed that RE was improved (2.4%) with TPU shoes compared with minimalist shoes (P=0.01). However, there was no significant difference for CTO2 (P=0.61) and running performance (P=0.52) comparing the TPU (710±60 s) and the minimalist (718±63 s) shoe models. These novel findings demonstrate that shoes with enhanced mechanical energy return (i.e. TPU) produced a lower energy cost of running at low (i.e., 12 km/h) but not at high speeds (i.e., average speed sustained during the 3-km running time-trial, ∼15 km/h), ultimately resulting in similar running performance compared to the minimalist shoe.

Concentração de minerais no tecido queratinizado podal de equinos jovens da raça Crioula em diferentes fases de crescimento / [Mineral concentrations in the keratinized tissue on the feet of young Crioulo horses at different stages of growth]

O presente estudo avaliou o perfil mineral de Cálcio (Ca), Cobre (Cu) e Zinco (Zn) no estojo córneo pré e pós-desmame e sua associação com pigmentação, gênero e idade de potros da raça Crioula criados em pastagens nativas no Rio Grande do Sul. Foram coletadas amostras do casco de potros da raça Crioula 41 dias pré e 28 dias pós-desmame. Os teores de Ca, Cu e Zn variaram no casco fetal (571,0±39,4; 14,5±7,6 e 130,0±30,5mg/kg, respectivamente; P<0,05) e no definitivo (653,0±169,2; 33,8±11,5 e 69,3±36,8mg/kg, respectivamente; P<0,05), no pré (620,0±184; 17,2±21,2 e 103,0±75,5mg/kg, respectivamente; P<0,05) e no pós-desmame (517,5±181; 0 e 79,0±41,7mg/kg, respectivamente; P<0,05). Houve associação positiva (P<0,05) com a faixa etária no pré-desmame para Ca (r=0,5) e Cu (r=0,57), e negativa para Zn (r=-0,69; P<0,05). No pós-desmame, houve associação positiva (P<0,05) para Ca (r=0,36) e Zn (r=0,64) e negativa para Cu (r=-0,39; P<0,05). Tanto a pigmentação quanto o gênero não afetaram o perfil mineral. Conclui-se que há diferenças nas concentrações de Ca, Cu e Zn na epiderme do casco de potros da raça Crioula no pré e pós-desmame, independentemente da pigmentação e do gênero, onde as concentrações de Ca e Cu aumentam com a idade, enquanto as de Zn diminuem.(AU)

The aim of this study was to evaluate the mineral profile of Ca, Cu and Zn in the hoof horny capsule at pre and post-weaning and its association with pigmentation, gender and age range of Crioulo foals raised in native pastures in RS. Samples were collected from the epidermis of the Crioulo foal's hoof at two times, 41 pre and 28 post-weaning. The contents of Ca, Cu, Zn Varied in the fetal hoof ( 571.0±139.4, 14.5±7.6 and 130.0±30.5mg/kg, respectively, P<0.05) and definitive (653.0±169.2, 33.8±11.5 and 69.3±36.8mg/kg, respectively, P<0.05), in the pre (620.0±184, 17.2±21.2 and103.0±75.5mg/kg, respectively, P<0.05) and post-weaning (517.5±181, 0.1 and 79.0±41.7mg/kg, respectively, P<0.05).There was a positive association (P<0.05) with a preweaning age for Ca (r=0.5) and Cu (r=0.57) and negative for Zn (r=-0.69, P<0.05). In the post weaning there was a positive association (P<0.05) for Ca (r=0.36) and Zn (r=0.64) and negative for Cu (r=-0.39; P<0.05). Neither pigmentation nor gender affected the mineral profile. It is concluded that there are differences in Ca, Cu, Zn concentrations in the epidermis of foals of the crioulo breed at the pre and post weaning, regardless of pigmentation and sex, where Ca and Cu concentrations increase with age, while Zn concentrations decrease.(AU)

Chronic osteomyelitis in canine penile bone: case report / Osteomielite crônica em osso peniano canino: relato de caso

A 10-year-old male mixed-breed dog was admitted for recurrent signs of urinary tract infection (UTI). Urinary bladder ultrasonography revealed decreased thickness of its wall with floating hyperopic particles within its lumen. Ultrasonography revealed a structure invading the dorsal wall of the penile urethral lumen, located in a segment distal to the bladder. Radiographies showed bone resorption with proliferation at the caudal aspect of the penile bone, stricture of the final aspect of the penile urethra, and no radiopaque images compatible with a urethrolith. Computed tomography showed bone proliferation causing stricture of the urethral lumen at two different sites. Presumptive diagnosis of penile neoplasia was considered more likely and the dog underwent penectomy along with orchiectomy and scrotal urethrostomy. Enterobacter spp. was cultured from the urine sample and antibiotic sensitivity tests revealed that the bacterium was susceptible to amikacin, imipenem, and meropenem. Histopathology revealed severe suppurative urethritis, bone resorption, and hyperostosis, suggestive of osteomyelitis of the penile bone. Neoplastic cells were not observed at any part of the examined tissue. The findings in the present case suggest that osteomyelitis of the penile bone should be included in differential diagnosis for partial and complete urethral obstruction in dogs with recurrent UTI.(AU)

Um cão mestiço, com 10 anos, foi admitido por sinais recorrentes de infecção do trato urinário (ITU). A ultrassonografia da bexiga urinária revelou diminuição da espessura de sua parede com partículas flutuantes dentro de seu lúmen. A ultrassonografia demonstrou estrutura invadindo a parede dorsal do lúmen da uretra peniana, localizada em segmento distal à bexiga. Radiografias evidenciaram reabsorção óssea com proliferação no aspecto caudal do osso peniano, estenose do aspecto final da uretra peniana e ausência de imagens radiopacas compatíveis com uretrólito. Pela tomografia computadorizada, observou-se proliferação óssea causando estreitamento da luz uretral em dois locais diferentes. Diagnóstico presuntivo de neoplasia peniana foi considerado mais provável e o cão foi submetido à penectomia, juntamente com orquiectomia e uretrostomia escrotal. Enterobacter spp. foi cultivada da amostra de urina e testes de sensibilidade revelaram susceptibilidade ao amicacina, imipenem e ao meropenem. A histopatologia revelou uretrite supurativa grave, reabsorção óssea e hiperostose compatível com osteomielite do osso peniano. Células neoplásicas não foram observadas em nenhuma parte do tecido examinado. Os achados do presente caso sugerem que a osteomielite do osso peniano deve ser incluída no diagnóstico diferencial de obstrução uretral parcial e completa em cães com ITU recorrente.(AU)

Effect of thyme essential oil on rumen parameters, nutrient digestibility, and nitrogen balance in wethers fed high concentrate diets / Efeito do óleo essencial de tomilho sobre os parâmetros ruminais, a digestibilidade dos nutrientes e o balanço de nitrogênio em borregos alimentados com elevado teor de concentrado

This trial aimed to evaluate the effects of thyme essential oils (EO) on rumen parameters, nutrient digestibility and nitrogen balance in wethers fed with high-concentrate diet. Twenty rumen-cannulated wethers were blocked according to body weight (BW= 64.0±2.1kg), and received one of the following treatments: 25mg of monensin/kg of dry matter (DM; MON) or doses of thyme EO (1.25, 2.50 or 3.75g/kg of DM). The diet was composed of 90% concentrate. Thyme EO was composed mainly by thymol (46.6% of DM) and p-cymene (38.9% of DM). The nutrient intake and apparent digestibility were similar among treatments. The inclusion of 3.75g of thyme EO tended (P= 0.07) to increase butyrate compared to MON and 1.25OE and wethers fed with 1.25g of thyme EO tended (P= 0.07) to decrease ruminal pH on the 14th day compared to MON. The treatments did not affect acetate:propionate ratio, total short chain fatty acids (SCFA) and nitrogen retention. Results from this study suggest that adding thyme EO to high-concentrate diets may be used as an alternative to monensin as feed additive in feedlot lambs.(AU)

O objetivo do estudo foi avaliar os efeitos do óleo essencial (OE) de tomilho nos parâmetros ruminais, na digestibilidade e no balanço de nitrogênio em borregos alimentados com elevado teor de concentrado. Vinte borregos providos de cânulas ruminais foram blocados de acordo com o peso corporal (PC=64,0±2,1kg) e receberam um dos tratamentos: 25mg de monensina/kg de matéria seca (MS; MON) ou doses de OE de tomilho (1,25; 2,50 ou 3,75g/kg de MS). A dieta foi composta por 90% de concentrado. A composição do OE de tomilho foi principalmente timol (46,6% da MS) e p-cimeno (38,9% da MS). A ingestão e a digestibilidade dos nutrientes foram semelhantes entre os tratamentos. A inclusão de 3,75g de OE de tomilho tendeu (P=0,07) a aumentar o butirato em relação aos tratamentos MON e 1,25OE. Os borregos alimentados com 1,25g de OE tenderam (P=0,07) a apresentar menor pH ruminal no 14º dia comparado a MON. No entanto, os tratamentos não afetaram a relação acetato:propionato, concentração total de ácidos graxos de cadeia curta e retenção de nitrogênio. Os resultados sugerem que a adição de OE de tomilho em dietas com elevado teor de concentrado pode ser uma alternativa à monensina como aditivo alimentar para cordeiros em confinamento.(AU)

Diagnostic performance of a commercial ELISA used as a complementary test for bovine tuberculosis in two bovine herds with different disease status / Desempenho diagnóstico de um ELISA comercial usado como teste complementar para tuberculose bovina em dois rebanhos bovinos com diferentes estágios de controle da doença

Bovine tuberculosis is a worldwide spread zoonotic disease. Intradermal tuberculinizations are the most used diagnostic tests in the world. Serological tests can be an ancillary diagnosis for bovine tuberculosis. The objective of this study was to evaluate the diagnostic performance of the ELISA Mycobacterium Bovis Antibody Test Kit IDEXX ™ in infected herds, which were in different disease control stages. One hundred and twenty animals from two dairy herds of Minas Gerais state, Brazil, were subjected to the ELISA serological test and the comparative cervical tuberculin test (CCT). Diagnostic test parameters were estimated using Bayesian latent class models and concordance between tests estimated by the frequentist approach. The ELISA test presented lower sensitivity than CCT in both herds. Its sensitivity was higher in the herd in sanitation process. Specificity estimates were above 95% in both herds. Kappa index indicated low concordance or even disagreement between tests. According to the results, the ELISA IDEXX should not be used as substitution for CCT. The tests must not be associated in series. Parallel association increased diagnostic sensitivity in the herd which was in the process of sanitation.(AU)

A tuberculose bovina é uma zoonose de distribuição mundial cujos testes mais utilizados para o diagnóstico são as tuberculinizações intradérmicas, simples e compartivas. Contudo, testes sorológicos podem constituir diagnósticos auxiliares. O objetivo deste estudo foi avaliar o desempenho diagnóstico do teste ELISA Mycobacterium Bovis Antibody Test Kit IDEXX ® em rebanhos bovinos infectados, que se encontravam em diferentes estágios de controle da doença. Cento e vinte animais de dois rebanhos leiteiros provenientes do estado de Minas Geais-Brasil foram submetidos ao ELISA e à tuberculinização cervical compartiva (TCC). Avaliou-se o desempenho dos testes por meio de modelos Bayesianos de classe latente e a concordância entre os eles, por meio de estatística frequentista. Uma maior sensibilidade do teste foi observada no rebanho previamente tuberculinizado. Em ambos os rebanhos o TCC foi mais sensível que o ELISA. Especificidade acima de 95% foi encontrada em ambos os rebanhos. Foram observadas baixa concordância ou mesmo discordância entre os testes. De acordo com os resultados obtidos, o teste ELISA-IDEXX não deve ser utilizado em substituição à TCC, tampouco devem ser associados em série. Houve aumento da sensibilidade quando os testes foram associados em paralelo no rebanho que já se encontrava em processo de saneamento.(AU)

Thyme essential oil for sheep: effect on rumen fermentation, nutrient digestibility, nitrogen metabolism, and growth / Óleo essencial de tomilho para ovinos: efeito na fermentação ruminal, na digestibilidade dos nutrientes, no metabolismo de nitrogênio e no crescimento

Two experiments were conducted to evaluate the effect of thyme (Thymus vulgaris) essential oil (EO) doses on rumen fermentation, nutrient digestibility, and nitrogen metabolism, as well as performance and coccidia oocyst discharge. In experiment I, 20 rumen-cannulated wethers received the experimental diets containing 80% dry matter (DM) of haylage and 20% DM of concentrate. Treatments were 25mg of monensin/kg DM or doses of 1.25, 2.50, or 3.75g of thyme EO/kg DM. In experiment II, 50 ewe lambs received the same diets from experiment I, including a diet without feed additives. Wethers fed with diets containing 1.25g/kg DM of thyme EO had higher molar proportion of propionate (P= 0.03) and butyrate (P< 0.01), and lower (P= 0.04) acetate to propionate ratio than other treatments. Adding thyme EO to diets increased (P= 0.02) nitrogen retention compared to monensin. The performance of ewe lambs was not affected (P≥ 0.05) by treatments. However, lambs fed monensin had a lower (P= 0.04) number of coccidia oocyst discharge than others. Adding 1.25g/kg DM of thyme EO in high-forage diet improved ruminal fermentation. Thyme EO enhanced nitrogen metabolism, however, it did not improve performance.(AU)

Dois experimentos foram conduzidos para avaliar o efeito de doses de óleo essencial (OE) de tomilho (Thymus vulgaris) sobre a fermentação ruminal, a digestibilidade de nutrientes e o metabolismo de nitrogênio, bem como sobre o desempenho e a descarga de oocistos de coccídeos. No experimento I, 20 ovinos canulados receberam dietas experimentais contendo 80% de matéria seca (MS) de pré-secado e 20% de MS de concentrado. Os tratamentos foram 25mg de monensina/kg de MS ou doses de 1,25, 2,50 ou 3,75g de OE de tomilho/kg de MS. No experimento II, 50 borregas receberam as mesmas dietas do experimento I, incluindo uma dieta sem aditivos. Os animais alimentados com dietas contendo 1,25g de OE de tomilho apresentaram maior proporção molar de propionato (P=0,03) e de butirato (P<0,01) e menor (P=0,04) relação acetato/propionato do que outros tratamentos. A adição de OE de tomilho nas dietas aumentou (P=0,02) a retenção de nitrogênio em comparação com a monensina. O desempenho de cordeiros não foi afetado (P≥0,05) pelos tratamentos. No entanto, cordeiros alimentados com monensina apresentaram menor (P=0,04) número de oocistos de coccídeos. A adição de 1,25g/kg de MS de OE de tomilho na dieta forrageira melhorou o perfil da fermentação ruminal. O OE de tomilho aumentou a retenção de nitrogênio, no entanto não melhorou o desempenho.(AU)

Comparison of ELISA and HPLC-MS methods for the determination of exenatide in biological and biotechnology-based formulation matrices / 药物分析学报

The development of biotechnology-based active pharmaceutical ingredients, such as GLP-1 analogs, brought changes in type 2 diabetes treatment options. For better therapeutic efficiency, these active pharmaceutical ingredients require appropriate administration, without the development of adverse effects or toxicity. Therefore, it is required to develop several quantification methods for GLP-1 analogs products, in order to achieve the therapeutic goals, among which ELISA and HPLC arise. These methods are developed, optimized and validated in order to determine GLP-1 analogs, not only in final formu-lation of the active pharmaceutical ingredient, but also during preclinical and clinical trials assessment. This review highlights the role of ELISA and HPLC methods that have been used during the assessment for GLP-1 analogs, especially for exenatide.

Relationship between heart rate variability and subclinical thyroid disorders of the Brazilian Longitudinal Study of Adult Health (ELSA-Brasil)

The association between subclinical thyroid dysfunctions and autonomic modulation changes has been described by many studies with conflicting results. We aimed to analyze the association between subclinical hyperthyroidism (SCHyper), subclinical hypothyroidism (SCHypo), and heart rate variability (HRV) using the baseline from ELSA-Brasil. SCHyper and SCHypo were classified by use of medication to treat thyroid disorders, thyrotropin levels respectively above and under the reference range, and normal free thyroxine levels. For HRV, the participants underwent 10 min in supine position and the R-R intervals of the final 5 min were selected for analysis. We first used linear regression models to report crude data and then, multivariate adjustment for sociodemographic (age, sex, and race) and cardiovascular risk factors (hypertension, dyslipidemia, diabetes, smoking, body mass index, use of alcohol, and leisure physical activity) using the euthyroid group as reference. From 9270 subjects (median age, 50; interquartile range: 44-56), 8623 (93.0%) were classified as euthyroid, 136 (1.5%) as SCHyper, and 511 (5.5%) as SCHypo. Compared to euthyroid subjects, SCHyper participants presented significantly higher heart rate (68.8 vs 66.5 for euthyroidism, P=0.007) and shorter R-R intervals (871.4 vs 901.6, P=0.007). Although SCHyper was associated with lower standard deviation of NN interval (SDNN) (β: -0.070; 95% confidence interval (95%CI): -0.014 to -0.009) and low-frequency (LF) (β: -0.242, 95%CI: -0.426 to -0.058) compared to the euthyroid group, these differences lost significance after multivariate adjustment for confounders. No significant differences were found for HRV in SCHypo. No association was found between HRV and SCHyper or SCHypo compared to euthyroid subjects in this sample of apparently healthy subjects.

Impacto do grau de uveíte em diferentes tipos de úlceras de córneas em cães submetidos ao enxerto pediculado de conjuntiva bulbar - 34 casos / Impact of uveitis score on different types of corneal ulcers in dogs subjected to the bulbar conjunctival pedicle graft - 34 cases

O presente trabalho objetivou avaliar os resultados de 34 olhos submetidos ao enxerto conjuntival pediculado (ECP) em ceratites ulcerativas profundas (n=5), em ceratites ulcerativas com colagenólise (n=2), descemetocele (n=7), perfuração corneal (n=15) e prolapso de íris (n=5). Os impactos do grau de uveíte e da integridade da córnea foram correlacionados com presença e ausência de visão por tabelas de contingência. Raças braquicefálicas foram acometidas em 91,11% dos casos. O número de córneas consideradas perfuradas [20/34 (58,82%)] foi maior que o de córneas íntegras [14/34 (41,17%)]. Ao 50º dia de pós-operatório, o número de olhos visuais que apresentavam córneas íntegras previamente às cirurgias (n=13) não diferiu significativamente dos olhos com córneas perfuradas (n=12) (P=0,05). Avaliações relativas ao grau de uveíte, revelaram que a metade dos casos foi considerada severa [17/34 (50%)] e na outra metade as uveítes foram consideradas discretas. Dos 17 casos que apresentaram uveíte severa, oito recuperaram a visão. Já nos 17 olhos onde a uveíte foi considerada leve, 15 mantiveram a visão ao final do período de avaliação. Apesar de a integridade da córnea não se correlacionar com a severidade da uveíte (P=0,48), constatou-se que o número de olhos visuais com uveíte discreta foi significativamente maior que os olhos com uveíte severa (P=0,006). Neste estudo, a taxa geral de sucesso visual após ECP foi de 73,52% e a integridade da córnea não exerceu impacto significativo sobre a manutenção da visão. Todavia, olhos acometidos por uveítes severas apresentaram menor chance de recuperar a visão.(AU)

The present study aimed to evaluate the results of 34 eyes of dogs presenting deep corneal ulcer (n=5), colagenolytic corneal ulcer (n=2), descemetocele (n=7), corneal perforation (n=15), and iris prolapse (n=5) that were corrected by the bulbar conjuntival pedicle graft (CPG). The uveitis score and the corneal integrity were correlated with the presence or absence of vision by contingency tables. Brachycephalic breeds accounted for 91.11% of all cases. The number of perforated corneas [20/34 (58.82%)] were higher than the non-perforated ones [14/34 (41.17%)]. At post-operative day 50, the number of visual eyes with non-perforated corneas before surgery (n=13) did not differ significantly from the eyes with perforated corneas (n=12) (P = 0.05). In half of the cases, uveitis score was considered severe [17/34 (50%)], and in the other half, mild. Eight out of 17 eyes classified with severe uveitis regained vision. In 17 eyes where uveitis score was considered mild, 16 regained vision at the end of the study. Although corneal integrity was non-correlated with the uveitis score (P = 0.48), the number of visual eyes scored with mild uveitis were significantly larger than the eyes with severe uveitis (P = 0.006). In this study, the overall success visual rate after CPG was 73,52% % and the corneal integrity did not play an important role regarding maintenance of vision. However, eyes presenting severe uveitis score had less chance to regain vision.(AU)

Effect of 0, 15% sodium hialuronate and 0, 5% carboxymethylcellulose on tear film breakup time in healthy dogs and in dogs with keratoconjunctivitis sicca / Efeito do hialuronato de sódio a 0, 15% e da carboximetilcelulose sódica a 0, 5% no tempo de ruptura do filme lacrimal de cães saudáveis e com ceratoconjuntivite seca

This study aimed to evaluate the effect of the 0.15% sodium hyaluronate (SH) and of 0.5% carboxymethylcellulose (CMC) on tear film breakup time (TFBUT) in 10 healthy dogs and in 32 eyes of dogs with keratoconjunctivis sicca (KCS). In addition, the goblet cell density (GCD) of this population was quantified. TFBUT was assessed at baseline and at different time points following the instillation of SH and CMC. KCS was graded as mild, moderate, and severe. GCD were quantified from conjunctival biopsies. The number of GCD differed significantly between patients with mild and moderate KCS (P<0.01). TFBUT of healthy dogs increased only for 1 minute after treatment with SH (P<0.01). Regarding baseline and treatments, SH significantly increased TFBUT for up to 30 minutes on the ocular surface, in comparison to CMC, in all categories of KCS (P<0.01). TFBUT and GCD correlated positively when the healthy and diseased eyes were grouped (r=0.41, P=0.006). It can be concluded that in dogs with KCS, SH lasts longer periods on the ocular surface than CMC, but such agents does not increase TFBUT in healthy dogs. Additionally, tear film stability tends to reduce in a linear fashion from the mild to severe form of KCS.(AU)

Objetivou-se avaliar os efeitos do hialuronato de sódio a 0,15% (HS) e da carboximetilcelulose a 0,5% (CMC) no teste de ruptura do filme lacrimal (TRFL) em 10 cães saudáveis e em 32 olhos de cães com ceratoconjuntivite seca (CCS). Ademais, quantificou-se a densidade de células caliciformes (DCC) deles. Mensurou-se o TRFL em momentos distintos antes e após a instilação do HS e da CMC. Graduou-se a CCS em leve, moderada e severa. Quantificou-se a DCC a partir de biópsias conjuntivais. A DCC diferiu apenas entre pacientes com CCS leve e severa (P<0,01). Em cães saudáveis, o TRFL se elevou apenas após um minuto do tratamento com HS (P<0,01). Relativamente ao período basal e entre os tratamentos, o HS elevou o TRFL de forma mais eficaz e permaneceu por até 30 minutos na superfície ocular, comparativamente à CMC, em todas as categorias de CCS (P<0,01). Ao se agruparem os olhos saudáveis e os com CCS, o TRFL se correlacionou com a DCC (r=0.41, P=0.006). Conclui-se que o HS permanece por maior tempo na superfície ocular que a CMC em cães com CCS, mas que tais substâncias não elevam o TRFL em cães saudáveis. Ademais, a estabilidade do filme lacrimal tende a se reduzir de modo linear da forma leve até à severa da CCS.(AU)

Ocular manifestations of leishmaniasis in a cat: first case report from Brazil / Manifestações oculares da leishmaniose em um gato: primeiro relato de caso do Brasil

An 8-year-old domestic short hair female cat initially presented with bilateral uveitis with pseudotumoral appearance. The patient tested negative for feline immunodeficiency virus (FIV), feline leukemia virus (FeLV) and Toxoplasma gondii. Histopathology of a granulomatous lesion on the upper left conjunctiva revealed amastigotes compatible with Leishmania spp. Aqueous humor was aspired and the diagnosis was confirmed after isolation of promastigotes cultivated in biphasic NNN medium and by positive polymerase chain reaction (PCR) for Leishmania infantum. Treatment with allopurinol (10mg/kg/ BID/PO) was commenced and a natural insect repellent was prescribed. Six months of treatment with allopurinol associated with the initial topical medications helped to improve ocular signs. Leishmaniasis should be considered as a differential diagnosis in cats presenting uveitis with pseudotumoral appearance. To our knowledge, this is the first report of feline leishmaniasis with ocular manifestation in Brazil, in which diagnosis was confirmed by aqueous humor analysis.(AU)

Uma gata, sem raça definida, de oito anos de idade, foi atendida inicialmente com uveíte bilateral, com aparência pseudotumoral em íris. Foi realizado teste para o vírus da imunodeficiência felina (FIV), da leucemia felina (FeLV) e de Toxoplasma gondii, obtendo-se resultados negativos. O exame histopatológico da conjuntiva superior do olho esquerdo revelou amastigotas compatíveis com Leishmania spp. Foi realizada paracentese, e promastigotas foram isoladas no humor aquoso, cultivadas em meio NNN bifásica. Reação em cadeia da polimerase (PCR) confirmou diagnóstico positivo para Leishmania infantum. Tratamento com alopurinol (10mg/kg/BID/PO) foi iniciado, e um repelente natural de insetos foi prescrito. Seis meses de tratamento com alopurinol associado aos medicamentos tópicos iniciais ajudaram a melhorar os sinais oculares. Leishmaniose deve ser considerada como um diagnóstico diferencial nos gatos que apresentam uveíte com aparência pseudotumoral de íris. Até o presente momento, este é o primeiro relato de leishmaniose felina com manifestação exclusivamente ocular da doença no Brasil cujo diagnóstico foi confirmado por meio de análise de humor aquoso.(AU)

Diagnosis and treatment of HEp-2 cells contaminated with mycoplasma

Abstract Contamination of primary and cell cultures by mycoplasmas is one of the main economic and biological pitfalls in basic research, diagnosis and manufacture of biotechnological products. It is a common issue which may be difficult to conduct surveillance on. Mycoplasma presence may affect several physiological parameters of the cell, besides being considered an important source of inaccurate and/or non-reproducible scientific results. Each cell type presents characteristical symptoms, mainly morphological, that indicate a contamination by mycoplasma. HEp-2 cells originate from carcinoma of the larynx and are, therefore, part of the respiratory tract, which is one of mycoplasma habitats. Despite the importance these cells in several biological research (evaluation of cell proliferation and migration, apoptosis, antiviral and antitumor compounds), the alterations induced by mycoplasma contamination in HEp-2 cells have not yet been described. Here, we describe the progressive morphological alterations in culture of HEp-2 cells infected with mycoplasma, as well as the-diagnosis of the infection and its treatment. Mycoplasma contamination described within this work led to cytoplasm elongation, cell-to-cell spacing, thin plasma membrane projections, cytoplasmic vacuoles, fusion with neighboring cells, and, finally, cell death. Contamination was detected by fluorescence imaging (DAPI) and PCR reactions. The cultures were treated with BM-Cyclin antibiotic to eliminate contamination. The data presented here will be of relevance to researchers whose investigations involve cell culture, especially respiratory and HEp-2 cells.

Resumo A contaminação de culturas primárias e celulares por micoplasmas é uma das principais armadilhas econômicas e biológicas da pesquisa básica, diagnóstico e fabricação de produtos biotecnológicos. Trata-se de uma contaminação rotineira, mas de difícil acompanhamento. A presença de micoplasma pode afetar vários parâmetros fisiológicos da célula, além de ser considerada uma importante fonte de resultados científicos imprecisos e/ou não reprodutíveis. Cada tipo de célula apresenta sintomas característicos, principalmente morfológicos, que indicam uma contaminação por micoplasma. As células HEp-2 são originárias do carcinoma da laringe e, portanto, fazem parte do trato respiratório, um dos habitats do micoplasma. Apesar da importância destas células em diversas pesquisas biológicas (avaliação da proliferação e migração celular, apoptose, compostos antivirais e antitumorais), as alterações decorrentes da contaminação por micoplasma nestas células ainda não foi descrita. Aqui, descrevemos as alterações morfológicas progressivas na cultura de células HEp-2 infectadas por micoplasma, bem como o diagnóstico da infecção e seu tratamento. A contaminação por micoplasma descrita neste trabalho resultou em alongamento citoplasmático, espaçamento entre células, projeções delgadas da membrana plasmática, vacúolos citoplasmáticos, fusão de células vizinhas e, finalmente, morte celular. A contaminação foi detectada por imagens de fluorescência (DAPI) e reações de PCR. As culturas foram tratadas com antibiótico BM-Cyclin para eliminar a contaminação. Os dados aqui apresentados serão de relevância para pesquisadores cujas investigações envolvem cultura celular, principalmente células respiratórias e HEp-2.