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Gamme d'année
1.
Article de Chinois | WPRIM | ID: wpr-977722

RÉSUMÉ

@#[摘 要] 目的:探究含硬化蛋白域蛋白1(SOSTDC1)对宫颈癌细胞恶性生物学行为的调控及其分子机制。方法:收集2020年8月至2022年5月间在福建省肿瘤医院活检或手术切除的53例宫颈癌组织和相应的癌旁组织标本,免疫组化法检测SOSTDC1蛋白在宫颈癌组织及相应癌旁组织中的表达,qPCR法检测正常宫颈细胞、宫颈癌细胞中SOSTDC1 mRNA表达;将SOSTDC1过表达慢病毒(OE-sostdc1)和对照空病毒(NC)感染宫颈癌细胞SiHa及CaSki,将其分为SiHa-OE-sostdc1、SiHa-NC、CaSki-OE-sostdc1、CaSki-NC组,采用WST-1法、细胞集落形成实验、Transwell实验和WB法检测转染各组SiHa及CaSki细胞的增殖、集落形成、迁移和侵袭能力和BMP、Wnt/β-catenin信号途径相关蛋白及上皮-间充质转化(EMT)相关蛋白的表达。用DNA甲基化酶抑制剂5-氮杂2'-脱氧胞苷(5'-Aza-CdR)处理宫颈癌细胞后采用qPCR和WB法检测SOSTDC1 mRNA及蛋白的表达变化,用甲基化特异性PCR(MSP)检测5例配对宫颈癌组织与癌旁组织中SOSTDC1基因启动子区甲基化水平,同时qPCR检测其SOSTDC1 mRNA水平。结果:与癌旁组织比较,SOSTDC1蛋白在宫颈癌组织中呈低表达(P<0.01),且与淋巴结转移与FIGO分期有关联(均P<0.05);与正常宫颈HUCEC细胞比较,SOSTDC1 mRNA在宫颈癌C33A、HeLa、SiHa、CaSki细胞中均呈低表达(均P<0.01)。过表达SOSTDC1显著抑制SiHa及CaSki细胞的增殖、迁移和侵袭能力(均P<0.05)。WB法结果检测显示,过表达SOSTDC1显著抑制SiHa及CaSki细胞中磷酸化Smad、Dvl2/3、β-catenin、VIM、N-cadherin、Snail蛋白的表达(均P<0.05),5'-Aza-CdR处理后的SiHa及CaSki细胞中SOSTDC1 mRNA和蛋白水平均显著增加(均P<0.05),MSP检测结果显示,相较于癌旁组织,宫颈癌组织中SOSTDC1基因启动子区呈高度甲基化,且SOSTDC1 mRNA水平降低(P<0.01)。结论:SOSTDC1在宫颈癌组织中呈低表达且与肿瘤的恶性进展关联,其表达下调与其基因启动子区高度甲基化有关,过表达SOSTDC1可能通过阻断BMP及Wnt/β-catenin信号通路从而抑制SiHa、CaSki细胞的增殖、侵袭和迁移能力。

2.
Article de Chinois | WPRIM | ID: wpr-920480

RÉSUMÉ

@#[摘 要] 目的:探讨lncRNA-Z38对胃癌细胞恶性生物学行为的影响及其可能的调控机制。方法:构建lncRNA-Z38稳定过表达的胃癌细胞系(AGS、MKN74细胞),通过细胞成球实验检测过表达lncRNA-Z38对胃癌细胞肿瘤特征的影响。对过表达lncRNA-Z38的AGS细胞及对照细胞进行高通量测序,对差异表达基因进行KEGG富集分析,筛选出可能参与调控胃癌发生发展的信号通路,采用WB等技术验证lncRNA-Z38通过调控该信号通路参与提高胃癌细胞的干性。结果:成功构建lncRNA-Z38过表达细胞株,细胞成球实验提示lncRNA-Z38过表达细胞的成球能力显著高于对照细胞(P<0.05)。通过测序筛选出lncRNA-Z38过表达胃癌细胞中的1 999个差异表达基因,其中上调基因1 238个、下调基因761个;经KEGG富集分析得到其中变化最显著的通路为TGF-β信号通路(P<0.05)。WB实验结果提示,lncRNA-Z38高表达胃癌细胞中TGF-β信号通路组成基因编码蛋白ID3、BMP6显著上调(均P<0.05)、GDF-5、WNT8B显著下调(P<0.05)。结论:在胃癌中高度表达的lncRNA-Z38通过调控TGF-β信号通路提高胃癌细胞的干性。

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