Serum-Free Suspension Adaptation of HEK-293T Cells: Basis for Large-Scale Biopharmaceutical Production

Abstract Human Embryonic Kidney 293T cells (HEK-293T) are the most common host for viral vector production and are also widely employed for recombinant protein production. These cells are typically cultured in monolayer (adherent culture) using culture medium containing fetal bovine serum (FBS), which impairs batch-to-batch reproducibility and scale-up. The adaptation of adherent cell culture to suspension culture in chemically defined serum-free culture medium is an attractive approach for large-scale bioprocess implementation while aiming for a Good Manufacturing Practice (GMP) compliant production process. Therefore, in the present study, our goal was to adapt HEK-293T cells to serum-free suspension culture conditions and evaluate the feasibility of adapted cells to be transfected using different plasmid vectors for recombinant protein production. Firstly, the cells were efficiently adapted to serum-free conditions by sequential adaptation (FBS-containing medium weaning). During the whole process, parameters such as cell growth, viability and doubling time were evaluated and compared to the control (adherent serum-supplemented HEK-293T cell culture). Afterwards, these cells were adapted to suspension culture by using Erlenmeyer flasks in an orbital shaker platform, being able to achieve meaningful cell density with high viability. Adapted cells presented a transfection efficiency of approximately 50% for all vector constructs used (1054-GFP, Factor-VIII and Factor-IX). Overall, it was possible to successfully adapt HEK-293T cells to suspension and serum-free conditions, which represents an important step towards the development of a scalable and GMP-compliant production process. In addition, adapted cells efficiently expressed the different transgene tested, opening up possibilities for its use in recombinant protein production.

Atención de enfermería a un adulto con cardiopatía congénita basada en el modelo de adaptación de Callista Roy / Nursing care to an adult with congenital heart disease based on the model of adaptation from Callista Roy", "_e": "n

Introducción: es de vital importancia promover la adaptación en las personas que padecen una cardiopatía congénita con el fin de contrarrestar el deterioro de la calidad de vida. Objetivo: aplicar el proceso de atención de enfermería a un adulto con cardiopatía congénita basado en el modelo de adaptación de Callista Roy. Material y métodos: estudio de caso con enfoque cualitativo, bajo directrices del proceso de atención de enfermería y el modelo de Callista Roy, aplicado a persona con cardiopatía congénita compleja que reingresó por trombosis de vena yugular y cava superior, a una institución de alta especialidad. Los datos se obtuvieron mediante entrevista semiestructurada, analizada en su contenido para la construcción de categorías, enriquecida con la exploración física y los registros clínicos. Formulación de diagnósticos basados en la NANDA Internacional (NANDA-I); se plantearon metas conforme a la Clasificación de Resultados de Enfermería; y la Clasificación de Intervenciones de Enfermería. Resultados: en el autoconcepto y el desempeño del rol se identificaron conductas ineficaces de adaptación con las etiquetas de: temor, trastorno de la imagen corporal, disposición para mejorar el afrontamiento. En la evaluación de las intervenciones se observó que la persona disminuyó el miedo al asimilar la necesidad de los procesos invasivos; así como ausencia de manifestaciones físicas de ansiedad y la mejora de su autoestima. Conclusiones: el modelo de adaptación de Callista Roy resulta ser útil y aplicable en la práctica de enfermería, al permitir brindar un cuidado holístico que modifica las respuestas ineficaces de afrontamiento ante los estímulos del ambiente para la adaptación.

Introduction: it is vitally important to promote the adaptation in people with congenital heart disease with the purpose of counteract the deterioration of the quality of life. Objective: apply the nursing care process to an adult with congenital heart disease based on the model of adaptation from Callista Roy. Material and methods: case study with qualitative approach, under guidelines of the nursing care prcess and model of Callista Roy, applied to people with complex congenital heart disease, who was readmitted for thrombosis in the jugular vein and superior vena cava to a highly specialized institution. The data was obtained through semi-structured interviews, analyzed in its content for the construction of categories, enriched with physical examination and clinical records. Formulation of diagnosis based in NANDA International (NANDA-I). Goals have been raised according to the Nursing Outcomes Classification; and Nursing Interventions Classification. Results: in self-concept and role performance, ineffective adaptive behaviors were identified with the labels of: fear, body image disorder and willingness to face the disease. In the evaluation of interventions was observed that the person decreased the fear by assimilating the need for invasive procedures as well as lack of physical manifestations of anxiety and improving his self-esteem. Conclusions: the model of adaptation from Callista Roy found to be useful and applicable in nursing practice because it allows to provide holistic care that modifies the ineffective responses of facing the environmental stimuli for the adaptation.

Afrontamiento cognitivo y adaptación de padres o madres con hijos en post-operatorio de cardiopatía congénita en la fundación Cardioinfantil de Bogotá / Cognitive coping and adaptation of fathers or mothers with children in the postoperative period of congenital heart disease in the Fundación Cardioinfantil de Bogotá

Dentro de los defectos congénitos, las cardiopatías congénitas se encuentran en el grupo con mayor riesgo de mortalidad a nivel mundial y teniendo en cuenta que la Fundación CardioInfantil se encuentra entre las primeras instituciones que ofrece un programa de tratamiento de estos, se decidió medir el proceso de afrontamiento y adaptación en un grupo de padres que se encuentren solos o acompañados por su pareja durante el postoperatorio de cardiopatía congénita de su hijo. Como herramienta principal, se utilizó la escala de medición del proceso de afrontamiento y adaptación, versión en español (ECAPS), diseñada por Callista Roy y se concluyó que la pareja, como apoyo social favorece el proceso de afrontamiento de estos padres, promoviendo la adaptación a la situación. (AU)

Asociación entre la capacidad del proceso de afrontamiento y adaptación y los grados de riesgo para la adherencia a los tratamientos farmacológicos y no farmacológicos en personas que presentan hipertensión arterial / Association between coping capacity and adaptation process and the degree of risk for adherence to pharmacological and nonpharmacological treatments in people with hypertension

Introducción. La falta de adherencia constituye uno de los más grandes retos para el sector salud; especialmente para la práctica de Enfermería. El objetivo general de este estudio de investigación consiste precisamente en determinar si existe asociación entre la capacidad del proceso de afrontamiento y adaptación y los grados de riesgo para la adherencia a los tratamientos farmacológicos y no farmacológicos en personas con hipertensión arterial de una E.S.E de primer nivel de atención en salud de Bogotá D.C. Metodología. Para determinar la asociación entre los fenómenos de investigación, se elaboró un estudio correlacional de abordaje cuantitativo, de tipo descriptivo; en el cual se realizó un muestreo probabilístico aleatorio simple en 242 personas con hipertensión arterial de la ESE Hospital Chapinero del Distrito capital de Bogotá en el periodo comprendido de Junio a Diciembre del 2010. Resultados. La edad de la población en este estudio oscilo entre los 29 a 90 años con una media de 64 años, con una mediana y moda de 63 años. En cuanto a la distribución general de la población por género, el mayor porcentaje corresponde al género femenino con un 71.1% y el 28.9 % para el sexo masculino. En este estudio se observó que la mayor proporción de la población tienen una alta capacidad para el proceso de afrontamiento y adaptación (n=219) representando el 90% de la población. Mientras el 10% de las personas con hipertensión arterial (n= 23) presentan una baja capacidad en el proceso de afrontamiento y adaptación. El reporte de los grados de riesgo para la adherencia en las personas con hipertensión arterial indican que el 48,% de la muestra se encuentra en riesgo para responder con comportamientos de adherencia, es decir presentan un riesgo medio de no adherencia a sus tratamientos farmacológicos y no farmacológicos, el 42% de la muestra tiene un riesgo bajo de no adherencia, es decir, tienen elementos suficientes para responder a las recomendaciones prescritas por su proveedor de salud y sólo el 10% de la muestra presenta un riesgo alto de no adherencia, es decir que este grupo de personas no pueden responder a la adherencia terapéutica prescrita. Los hallazgos de esta investigación reportan que el coeficiente de correlación de Pearson en la muestra de estudio obtuvo un valor r = 0, 253232. Lo cual significa que hay una asociación positiva entre los fenómenos de estudio, pero al mismo tiempo, el valor del coeficiente de correlación en la muestra clasificó esta asociación como débil. Conclusiones. Se puede decir que la adherencia no solo depende de la capacidad de afrontamiento y adaptación que un individuo tenga para poder responder de manera efectiva en las diferentes situaciones y momentos críticos de la vida, por tanto, la disposición para adherirse o no a las recomendaciones de un proveedor de salud con relación a los tratamientos farmacológicos y no farmacológicos, no dependen exclusivamente de los recursos psicológicos que las personas posean, o su capacidad para afrontar las situaciones dadas, sino también de las características del entorno donde se circunscriben estos acontecimientos.

Introduction. Lack of adherence is one of the biggest challenges for the health sector, especially for the practice of nursing. The overall objective of this research study is precisely to determine the association between the ability of coping and adaptation process and the degree of risk for adherence to pharmacological and nonpharmacological treatments in people with hypertension in an ESE first class health care in Bogotá DC. Methodology. To determine the association between the phenomena of research, a correlational study of quantitative approach of a descriptive kind was conducted, in which was chosen a simple random probability sample of 242 people with hypertension at The ESE Chapinero Hospital in Bogotá DC, over the period from June to December 2010. Results. The age of the population in this study ranged from 29 to 90 years with an average of 64 years, with a median and mode of 63 years old. Regarding the general distribution of population by gender, the highest share belongs to female with 71.1% and 28.9% for males. In this study was observed that the largest proportion of the population have a high capacity for coping and adaptation process (n = 219) representing 90% of the population. While 10% of people with hypertension (n = 23) have a low capacity in the process of coping and adaptation. The report of the degrees of risk for adherence in people with hypertension indicate that 48% of the population has an average risk of non-adherence to pharmacological and nonpharmacological treatments, the 42% of the population has a low risk of non-adherence, it means, they have sufficient elements to respond to the recommendations prescribed by their health care provider and only 10% of the sample presents a high risk of nonadherence, meaning that this group of people cannot respond to the adherence prescribed by their therapist. The findings of this research report that the Pearson correlation coefficient in the study sample obtained a value r = 0, 253232. Which means that there is a positive association between the phenomena of study, but at the same time, the value of the correlation coefficient in the sample classified this association as weak. Conclusions. One might say that the adherence depends not only on the ability of coping and adaptation that an individual has to respond effectively in different situations and critical moments of life, therefore, the willingness to join or not the recommendations of a health care provider in relation to pharmacological and nonpharmacological treatments do not depend exclusively on the people psychological resources or ability to cope with given situations, but also on the characteristics of the environment where these events occur.

Revascularização do miocárdio: processo de adaptação do indivíduo nas relações familiares e no trabalho / Myocardial revascularization: the individual's adaptation process in family relationships and at work

Trata-se de um estudo exploratório de natureza qualitativa, descritiva, com base na Teoria de Adaptação de Sister Callista Roy, desenvolvida com 14 pessoas submetidas a cirurgia de Revascularização do Miocárdio, sendo 09 do sexo masculino e 05 do sexo feminino que, consentiram participar do estudo, considerando o Parecer 196/96 do Conselho Nacional de Saúde, que versa sobre pesquisa com seres humanos. Seu principal objetivo foi o de analisar como se processa a adaptação familiar e profissional desses indivíduos. Para tanto, utilizamos um roteiro de entrevista semi-estruturada, cuja primeira parte constou de dados pessoais e sócio-demográficos e a segunda de questões referentes ao seu processo de adaptação. As entrevistas foram realizadas em domicílio após seleção prévia dos sujeitos no hospital em que foram submetidos à referente cirurgia. A análise empreendida considerou os modos de adaptação fisiológico, autoconceito, função de papel e interdependência em relação aos estímulos focais, contextuais e residuais. Seus resultados apontaram para um processo de adaptação gradativo e eficiente, proveniente da interação desses fatores, nos casos onde a cirurgia evoluiu sem complicações. Dessa maneira alguns achados foram relevantes, para uma adaptação eficaz dos sujeitos deste estudo, a exemplo do apoio familiar e de amigos, confiabilidade e a abordagem da equipe médica na realização ao procedimento cirúrgico, orientações da equipe multi profissional, força de vontade e o suporte religioso. Entretanto, encontramos alguns aspectos limitantes do processo como a hospitalização, em especial, o internamento na Unidade de Terapia Intensiva, restrição da mobilidade física, alterações cognitivas e do autoconceito, dificuldades financeiras dentre outras. Sobressaiu, também, mudança na qualidade de vida dessas pessoas após o tratamento cirúrgico.(AU)