Role of the IL8 rs4073 polymorphism in central nervous system toxicity in patients receiving multidrug-resistant tuberculosis treatment / Papel do polimorfismo rs4073 do gene IL8 na toxicidade do sistema nervoso central em pacientes em tratamento para tuberculose multirresistente

ABSTRACT Objective: To determine the role of the IL8 rs4073 polymorphism in predicting the risk of central nervous system (CNS) toxicity in patients receiving standard pharmacological treatment for multidrug-resistant tuberculosis (MDR-TB). Methods: A cohort of 85 consenting MDR-TB patients receiving treatment with second-line antituberculosis drugs had their blood samples amplified for the IL8 (rs4073) gene and genotyped. All patients were clinically screened for evidence of treatment toxicity and categorized accordingly. Crude and adjusted associations were assessed. Results: The chief complaints fell into the following categories: CNS toxicity; gastrointestinal toxicity; skin toxicity; and eye and ear toxicities. Symptoms of gastrointestinal toxicity were reported by 59% of the patients, and symptoms of CNS toxicity were reported by 42.7%. With regard to the genotypes of IL8 (rs4073), the following were identified: AA, in 64 of the study participants; AT, in 7; and TT, in 11. A significant association was found between the dominant model of inheritance and CNS toxicity for the crude model (p = 0.024; OR = 3.57; 95% CI, 1.18-10.76) and the adjusted model (p = 0.031; OR = 3.92; 95% CI, 1.13-13.58). The AT+TT genotype of IL8 (rs4073) showed a 3.92 times increased risk of CNS toxicity when compared with the AA genotype. Conclusions: The AT+TT genotype has a tendency to be associated with an increased risk of adverse clinical features during MDR-TB treatment.

RESUMO Objetivo: Determinar o papel do polimorfismo rs4073 do gene IL8 na previsão do risco de toxicidade do sistema nervoso central (SNC) em pacientes em tratamento farmacológico padrão para tuberculose multirresistente (TBMR). Métodos: Amostras de sangue de uma coorte de 85 pacientes com TBMR que assinaram um termo de consentimento livre e esclarecido e que estavam recebendo tratamento com medicamentos antituberculosos de segunda linha foram amplificadas para o gene IL8 (rs4073) e genotipadas. Todos os pacientes foram avaliados clinicamente quanto a evidências de toxicidade do tratamento e categorizados de acordo com os achados. Foram avaliadas as associações brutas e ajustadas. Resultados: As principais queixas enquadraram-se nas seguintes categorias: toxicidade do SNC; toxicidade gastrointestinal; toxicidade cutânea; e toxicidade ocular e ototoxicidade. Sintomas de toxicidade gastrointestinal foram relatados por 59% dos pacientes, e sintomas de toxicidade do SNC foram relatados por 42,7%. Foram identificados os seguintes genótipos de IL8 (rs4073): AA, em 64 dos participantes; AT, em 7; TT, em 11. Houve associação significativa entre o modelo dominante de herança e toxicidade do SNC no modelo bruto (p = 0,024; OR = 3,57; IC95%: 1,18-10,76) e no ajustado (p = 0,031; OR = 3,92; IC95%: 1,13-13,58). O genótipo AT+TT do gene IL8 (rs4073) apresentou risco 3,92 vezes maior de toxicidade do SNC que o genótipo AA. Conclusões: O genótipo AT+TT tende a se associar a um maior risco de características clínicas adversas durante o tratamento da TBMR.

Revisão de literatura sobre os aspectos fisiológicos e nutricionais em bezerros alimentados com colostro acidificado / Literature review on physiological and nutritional aspects in calves fed acidified colostrum / Revisión de la literatura sobre aspectos fisiológicos y nutricionales en terneros alimentados con calostro acidificado

A colostragem é essencial para a saúde dos bezerros neonatos, uma vez que não há a transferência de imunidade através da placenta, ou seja, o contato inicial do organismo com anticorpos se dá através da primeira mamada, onde há transferência da imunidade passiva. Sendo assim, o objetivo do trabalho é revisar os benefícios da acidificação ou silagem do colostro para otimizar a conservação da dieta líquida em fazendas; analisar o impacto no desempenho de bezerros em comparação com o colostro tradicional refrigerado em aleitamentos convencionais. O volume ideal preconizado é, no mínimo, 10% do peso vivo do animal nas primeiras duas horas e mais 5% do peso vivo nas seis a oito horas seguintes a primeira ingestão, para que se obtenha um bom desenvolvimento durante o crescimento, caso contrário, a falta da administração do colostro nas primeiras horas de vida predispõe enfermidades, tais como pneumonia e diarreia, prejudicando assim a saúde e consequentemente o desempenho em relação a outros animais que receberam uma colostragem adequada. Problemas com a qualidade do colostro surgem devido ao armazenamento inadequado, especialmente em propriedades sem refrigeração. A falta de sistemas de congelamento resulta em administração de leite em temperatura ambiente por períodos prolongados, prejudicando assim a imunidade e nutrição dos bezerros durante a colostragem. Todavia, há alternativas para o problema tal como o fornecimento de silagem de colostro. Em alguns casos, o processo de acidificação demanda a adição de ácidos no leite, a fim de evitar o crescimento de microrganismos patogênicos. O principal aspecto positivo do leite acidificado é a manutenção em temperatura ambiente, ou seja, não há a necessidade de passar por processos de refrigeração.

Colostrum is essential for the health of newborn calves, since there is no transfer of immunity through the placenta, that is, the body's initial contact with antibodies occurs through the first feeding, where there is a transfer of passive immunity. Therefore, the objective of the work is to review the benefits of acidifying or colostrum silage to optimize the conservation of liquid diets on farms; analyze the impact on calf performance compared to traditional refrigerated colostrum in conventional sucklers. The recommended ideal volume is at least 10% of the animal's live weight in the first two hours and a further 5% of its live weight in the six to eight hours following the first ingestion, so that good development is achieved during growth, otherwise, the lack of colostrum administration in the first hours of life predisposes diseases, such as pneumonia and diarrhea, thus harming health and consequently performance in relation to other animals that received adequate colostrum. Problems with colostrum quality arise due to inadequate storage, especially in unrefrigerated properties. The lack of freezing systems results in milk being administered at room temperature for prolonged periods, thus damaging the calves immunity and nutrition during colostrum. However, there are alternatives to the problem such as the supply of colostrum silage. In some cases, the acidification process requires the addition of acids to the milk in order to prevent the growth of pathogenic microorganisms. The main positive aspect of acidified milk is that it remains at room temperature, that is, there is no need to undergo refrigeration processes.

El calostro es esencial para la salud de los terneros recién nacidos, ya que no existe transferencia de inmunidad a través de la placenta, es decir, el contacto inicial del cuerpo con los anticuerpos ocurre a través de la primera alimentación, donde existe una transferencia de inmunidad pasiva. Por lo tanto, el objetivo del trabajo es revisar los beneficios de acidificar o ensilar el calostro para optimizar la conservación de dietas líquidas en granjas; analizar el impacto en el rendimiento de los terneros en comparación con el calostro refrigerado tradicional en lechones convencionales. El volumen ideal recomendado es al menos el 10% del peso vivo del animal en las dos primeras horas y otro 5% de su peso vivo en las seis a ocho horas siguientes a la primera ingesta, para que se consiga un buen desarrollo durante el crecimiento, en caso contrario. la falta de administración de calostro en las primeras horas de vida predispone a enfermedades, como neumonía y diarrea, perjudicando la salud y consecuentemente el rendimiento en relación a otros animales que recibieron el calostro adecuado. Los problemas con la calidad del calostro surgen debido a un almacenamiento inadecuado, especialmente en propiedades no refrigeradas. La falta de sistemas de congelación provoca que la leche se administre a temperatura ambiente durante períodos prolongados, dañando así la inmunidad y la nutrición de los terneros durante el calostro. Sin embargo, existen alternativas al problema como el suministro de ensilaje de calostro. En algunos casos, el proceso de acidificación requiere la adición de ácidos a la leche para evitar el crecimiento de microorganismos patógenos. El principal aspecto positivo de la leche acidificada es que se mantiene a temperatura ambiente, es decir, no es necesario someterse a procesos de refrigeración.

Corneal transplantation and concomitant SARS-CoV-2 infection: a case report / Transplante de córnea e infecção concomitante por SARS-CoV-2: relato de caso

ABSTRACT This report was aimed at presenting a case of neurotrophic keratitis and concomitant SARS-CoV-2 infection in a patient who has recently undergone a corneal DALK transplant. One month after corneal transplantation with adequate corneal epithelialization, the patient presented neurotrophic keratitis with a torpid course of the corneal transplant coinciding with a SARS-CoV-2 infection, with an excessive host immune response. In addition, the patient presented a re-positivization of nasopharyngeal polymerase chain reaction of SARS-CoV-2 with past disease after starting treatment with autologous serum eye drops. The implications at the ophthalmological level of SARS-CoV-2 infection may be clarified as the time the illness progresses and we learn more about how it acts. In this case, the disparity of signs and symptoms, the antecedent of corneal surgery, and the possibility of a herpetic infection as a cause of the primary leukoma suggested neurotrophic keratitis. Nonetheless, the involvement of systemic SARS-CoV-2 infection in the process, triggering an excessive host immune response at the corneal level with an increase in inflammatory cytokines must be taken into account. No relationship was found between treatment with autologous serum and re-positivization of nasopharyngeal polymerase chain reaction, presenting the patient a favorable response to treatment.

RESUMO O objetivo deste relato foi apresentar um caso de ceratite neurotrófica e infecção concomitante por SARS-CoV-2 em paciente submetido recentemente a transplante de córnea DALK. Um mês após o transplante de córnea com adequada epitelização da córnea, o paciente apresentou ceratite neurotrófica com curso tórpido do transplante de córnea, coincidindo com infecção por SARS-CoV-2, com resposta imune excessiva do hospedeiro. Além disso, o paciente apresentou repositivização da reação em cadeia da polimerase nasofaríngeo de SARS-CoV-2, com doença pregressa após iniciar tratamento com colírio de soro autólogo. As implicações a nível oftalmológico da infecção por SARS-CoV-2, podem ser esclarecidas à medida que a doença progride e aprendemos mais sobre sua forma de atuação. Neste caso, a disparidade de sinais e sintomas, o antecedente de cirurgia de córnea e a possibilidade de infecção herpética como causa do leucoma primário sugeriram ceratite neurotrófica. No entanto, deve-se levar em consideração o envolvimento da infecção sistêmica por SARS-CoV-2 no processo, desencadeando uma resposta imune excessiva do hospedeiro no nível da córnea, com aumento de citocinas inflamatórias. Não foi encontrada relação entre o tratamento com soro autólogo e a repositivização da reação em cadeia da polimerase nasofaríngea, apresentando ao paciente uma resposta favorável ao tratamento.

The "pharmakon" of prevention: artificial immunity in the covid-19 pandemic / O "pharmakon" da prevenção: imunidade artificial na pandemia de covid-19

Abstract The concept of pharmakon encapsulates the paradoxical ambivalence of any therapeutic intervention's harmful as well as beneficial effects; within the context of immunological practices related to covid-19, this ambivalence has been successfully exploited by anti-vaccination movements and is also evident in widespread vaccine hesitancy in wealthy countries where vaccines for this virus are widely available. Here we engage with the theoretical apparatus of the pharmakon to examine how care, harm, risk, and prevention are enacted in covid-19 prevention measures and mobilize the transdisciplinary methodologies of science and technology studies to investigate how anticipatory imaginaries drive cutting-edge research on covid-19 vaccines and the clinical and social practices they have elicited.

Resumo O conceito de pharmakon abrange a ambivalência paradoxal dos efeitos nocivos e benéficos de qualquer intervenção terapêutica. No contexto das práticas imunológicas relacionadas à covid-19, essa ambivalência tem sido explorada com sucesso pelo movimento antivacina e também é evidente na hesitação vacinal generalizada em países ricos, onde vacinas contra essa doença estão amplamente disponíveis. Aqui, examinamos o aparato teórico do pharmakon para verificar como o cuidado, o dano, o risco e a prevenção são implementados nas medidas de prevenção da covid-19 e mobilizamos metodologias transdisciplinares dos estudos de ciência e tecnologia para investigar como imaginários antecipatórios impulsionam a pesquisa de ponta sobre as vacinas contra a covid-19 e as práticas clínicas e sociais que elas suscitaram.

Avaliação do perfil de citocinas séricas e óxido nítrico na hanseníase experimental murina / Evaluation of the serum cytokines profile and nitric oxide in experimental murine leprosy

Introdução: a hanseníase é uma do-ença infecciosa crônica causada pelo Mycobacterium leprae (M. leprae), um para-sita intracelular obrigatório. Assim, a resis-tência do hospedeiro a esse patógeno depen-de da imunidade celular. O uso de modelos experimentais tem permitido o estudo da hanseníase do ponto de vista imunológico, microbiológico e terapêutico, entretanto, as diferenças na progressão da infecção entre os modelos mais empregados (camundongos imunocompetentes, BALB/c, e camundongos congenitamente atímicos, nude) são pouco estudadas. Objetivo: comparar a evolução da infecção pelo M. leprae em camundongos BALB/c e nude quanto à multi-plicação bacilar e avaliação do perfil inflamatório sistêmico pela quantificação sérica de citocinas e óxido nítrico (NO). Métodos: os camundongos foram inoculados com M. leprae nos coxins plantares e avaliados aos 3, 5 e 8 meses após a infecção. Resultados: camundongos nude apresentaram multiplicação bacilar progressiva nos coxins plantares. Em camundongos BALB/c, o número de bacilos foi maior aos 5 meses. Em relação à quantificação de citocinas, nos camundongos BALB/c houve aumento de IL-2 e IL-17A e diminuição de IL-6 e NO aos 8 meses de inoculação. Nos camundongos nude, verificou-se o aumento do TNF aos 8 meses de inoculação e manutenção dos níveis de NO. Conclusão: os resultados encontrados sugerem que em camundongos BALB/c ocorre a ativação de uma resposta imune capaz de controlar a multiplicação do M. leprae, em contrapartida em camundongos nude a infecção é progressiva a despeito de altos níveis de TNF. (AU)

Introduction: leprosy is a chronic infectious disease caused by Mycobacterium leprae (M. leprae), an obligate intracellular parasite. Thus, host resistance to this pathogen depends on cellular immunity. The use of experimental models has made it possible to study leprosy from an immunological, microbiological, and therapeutic point of view. However, the differences in the progression of the infection between the most used models (immunocompetent mice, BALB/c, and congenitally athymic mice, nude) have been little studied. Objective: to compare the evolution of M. leprae infection in BALB/c and nude mice in terms of bacillary multiplication and evaluation of the systemic inflammatory profile by quantifying serum cytokines and nitric oxide (NO). Methods: the mice were inoculated with M. leprae in the footpads and evaluated at 3, 5, and 8 months after infection. Results: nude mice showed progressive bacillary multiplication in the footpads. In BALB/c mice, the number of bacilli was higher at 5 months. In terms of cytokine quantification, BALB/c mice showed an increase in IL-2 and IL-17A and a decrease in IL-6 and NO at 8 months of inoculation. In the nude mice, there was an increase in TNF at 8 months of inoculation and maintenance of NO levels. Conclusion: the results suggest that BALB/c mice activate an immune response capable of controlling the multiplication of M. leprae, whereas in nude mice the infection is progressive despite high levels of TNF. (AU)

Effect of dietary nano α-tocopherol acetate plus selenium on productivity, immune status, intestinal morphometry, and carcass traits of broiler chickens / Efecto del nano acetato de α-tocoferol dietético más selenio sobre la productividad, estado inmunitario, morfometría intestinal y características de la canal en pollos de engorde / Efeito do acetato de nano α-tocoferol mais selênio na produtividade, estado imunológico, morfometria intestinal e características de carcaça de frangos de corte

Abstract Background: Nano-vitamins and minerals are used in animal nutrition to improve performance and health of broiler chickens as a potential alternative to antibiotic growth promoters. Objective: To evaluate the effect of several levels of a dietary nano α-tocopherol acetate plus selenium compound (NTS) on growth, intestinal histomorphometry, carcass traits, and immune status of broiler chickens. Methods: A total of 240 one-day-old Ross 308 chickens were randomly divided into four groups, each one with three pens (n=20 per pen). Four doses of nano α-tocopherol acetate and selenium (0, 5, 7, and 10 mg/kg) were included in the basal diet for 42 days. Results: Final body weight, cumulative body weight gain, and final conversion ratio significantly improved with increasing NTS levels (p<0.05). Carcass traits and weight of internal organs increased in the groups fed 7 and 10 mg/kg NTS. High NTS doses significantly increased immune vaccine titers against Newcastle disease, avian influenza virus, infectious bursal disease, and infectious bronchitis. Moreover, dietary addition of NTS improved intestinal morphometry. Conclusion: Thus, NTS (7 and 10 mg/kg) can be added to poultry rations to improve production, carcass characteristics, and immune status of broilers. Further studies are needed to evaluate NTS residues in meat.

Resumen Antecedentes: Las nano-vitaminas y minerales se utilizan en nutrición animal para mejorar el rendimiento y la salud de los pollos de engorde como una posible alternativa al uso de antibióticos promotores del crecimiento. Objetivo: Evaluar el efecto de varios niveles dietarios de un acetato de nano α-tocoferol más un compuesto de selenio (NTS) en el crecimiento, histomorfometría intestinal, características de la canal y estado inmunológico de pollos de engorde. Métodos: Un total de 240 pollos Ross 308 de un día de edad se dividieron aleatoriamente en cuatro tratamientos, cada grupo con tres corrales (n=20 por corral). Se incluyeron cuatro dosis de nano α-tocoferol acetato y selenio (0, 5, 7 y 10 mg/kg) en la dieta basal durante 42 días. Resultados: El peso corporal total, la ganancia de peso acumulada y la tasa de conversión alimenticia final mejoraron significativamente al aumentar el nivel de NTS (p<0,05). Las características de la canal y el peso de los órganos internos mejoraron en los grupos alimentados con 7 y 10 mg/kg de NTS. El incremento del nivel de NTS aumentó significativamente los títulos de vacunas inmunitarias contra la enfermedad de Newcastle, el virus de la influenza aviar, la enfermedad infecciosa de la bursa y la bronquitis infecciosa. Además, la adición dietaria de NTS mejoró algunas características morfométricas intestinales. Conclusión: Es viable agregar NTS (7 y 10 mg/kg) en la ración para mejorar la producción, las características de la canal y el estado inmunológico de pollos de engorde. Se necesitan más estudios para evaluar los residuos de NTS en la carne.

Resumo Antecedentes: Nanovitaminas e minerais são utilizados na nutrição animal para melhorar o desempenho e a saúde de frangos de corte como uma possível alternativa ao uso de antibióticos promotores de crescimento. Objetivo: Avaliar o efeito de vários níveis dietéticos de um acetato de nano α-tocoferol mais um composto de selênio (NTS) no crescimento, histomorfometria intestinal, características de carcaça e estado imunológico de frangos de corte. Métodos: Um total de 240 pintos Ross 308 de um dia de idade foram divididos aleatoriamente em quatro tratamentos, cada grupo com três baias (n=20 em cada baia). Quatro doses de acetato de nano α-tocoferol e selênio (0, 5, 7 e 10 mg/kg) foram incluídas na dieta basal por 42 dias. Resultados: O peso corporal total, ganho de peso cumulativo e a conversão alimentar final melhoraram significativamente com o aumento do nível de NTS (p<0,05). As características da carcaça e o peso dos órgãos internos melhoraram nos grupos alimentados com 7 e 10 mg/kg de NTS. O incremento do nível de NTS aumentou significativamente os títulos de vacinas imunes contra a doença de Newcastle, vírus da gripe aviária, doença infecciosa da bolsa e bronquite infecciosa. Além disso, a adição dietética de NTS melhorou algumas propriedades morfométricas intestinais. Conclusão: É viável a adição de NTS (7 e 10 mg/kg) na ração para melhorar a produção, as características de carcaça e o estado imunológico de frangos de corte. Mais estudos são necessários para avaliar os resíduos de NTS em carnes.

Effects of ivermectin on cytokine and immunoglobulin levels in sheep / Efectos de la ivermectina en los niveles de citoquinas e inmunoglobulinas en ovejas / Efeitos da ivermectina nos níveis de citocinas e imunoglobulinas em ovinos

Abstract Background: Ivermectin may affect the levels of cytokines and immunoglobulins in sheep, considering that avermectins have an effect on the immune system. Objective: To determine whether ivermectin has an effect on cytokines and immunoglobulins in sheep. Methods: After administration of ivermectin to 10 healthy sheep, sheep-specific interferon-α, tumor necrosis factor-α, interleukin-2, interleukin-6, interleukin-10, immunoglobulin G, immunoglobulin M, and immunoglobulin E levels were measured with an ELISA reader. Results: Significant (p<0.05) fluctuations were detected in interleukin-2 and interleukin-10 levels. Transient increases (p<0.05) were measured in tumor necrosis factor-α and immunoglobulin E levels (p<0.05). Conclusion: Ivermectin may affect immune system parameters in healthy sheep; however, the effects of ivermectin administration on infected sheep should be investigated.

Resumen Antecedentes: La ivermectina puede alterar los niveles de citocinas e inmunoglobulinas en ovinos, dado que las avermectinas afectan el sistema inmunológico. Objetivo: Determinar si la ivermectina tiene algún efecto sobre las citocinas e inmunoglobulinas en ovinos. Métodos: Después de la administración de ivermectina a 10 ovejas sanas los niveles de interferón-α específico de oveja, factor de necrosis tumoral-α, interleucina-2, interleucina-6, interleucina-10, inmunoglobulina G, inmunoglobulina M, e inmunoglobulina E se midieron con un lector ELISA. Resultados: Se detectaron fluctuaciones significativas (p<0,05) en los niveles de interleucina-2 e interleucina-10. También se encontraron aumentos transitorios (p<0,05) en los niveles de factor de necrosis tumoral-α e inmunoglobulina E (p<0,05). Conclusión: la ivermectina puede afectar los parámetros del sistema inmunitario en ovejas sanas.

Resumo Antecedentes: A ivermectina pode alterar os níveis de citocinas e imunoglobulinas em ovinos, visto que as avermectinas afetam o sistema imunológico. Objetivo: Determinar o efeito da ivermectina nas citocinas e imunoglobulinas em ovinos. Métodos: Após a administração de ivermectina a 10 ovelhas saudáveis, interferon-α específico de ovelha, fator de necrose tumoral-α, interleucina-2, interleucina-6 e interleucina-10, os níveis de imunoglobulina G, imunoglobulina M e imunoglobulina E foram medidos com Leitor de ELISA. Resultados: Flutuações estatisticamente significativas (p<0,05) foram detectadas nos níveis de interkeukin-2 e interkeukin-10. Aumentos transitórios (p<0,05) foram medidos nos níveis de fator de necrose tumoral-α e imunoglobulina E (p<0,05). Conclusão: A ivermectina pode afetar parâmetros do sistema imunológico em ovinos saudáveis, entretanto, os efeitos da administração de ivermectina em ovinos infectados devem ser investigados.

Identificação, caracterização e determinação de padrões da resposta imune de epítopos imunogênicos de Plasmodium vivax / Identification, characterization and determination of immune response patterns of immunogenic epitopes of Plasmodium vivax

O Plasmodium vivax representa um grande desafio no controle da malária devido a sua vasta distribuição ao redor do globo, grande frequência de infecções sub microscópicas e habilidade de induzir recaídas em consequência das formas evolutivas que podem ficar latentes no fígado por longos períodos (hipnozoítos). O recente aumento de cepas de P. vivax resistentes aos fármacos disponíveis, a evolução de formas mais virulentas do parasito e a produção precoce de gametócitos, característica desta espécie, contribuem para classificar a malária vivax como um problema de saúde pública que merece atenção. Ainda que reconhecido por suas características biológicas peculiares e pelo agravamento recente de sua virulência, poucos investimentos têm sido feitos no desenvolvimento de ferramentas de controle para vivax. Portanto, o presente estudo teve como objetivo identificar e caracterizar novos alvos potenciais utilizando amostras de diferentes áreas endêmicas ao redor do mundo (Brasil, Mali, Camboja e Estados Unidos da América). Para tanto, investigamos e caracterizamos uma proteína recém descoberta na urina de pacientes naturalmente infectados (PvVir14); e descrevemos o potencial imunogênico de epítopos de células B de uma das proteínas mais bem caracterizadas de P. vivax, a PvAMA-1. Anti-IgG circulantes contra PvVir14 apareceram em 61% e 34.5% dos indivíduos do Brasil e Camboja, respectivamente, enquanto que indivíduos de Mali (infectados com falciparum e não expostos a vivax), tiveram 0% de reconhecimento. Ainda, os níveis de anti-PvVir14 correlacionaram-se com aqueles contra outros antígenos de vivax já bem caracterizados, como a PvCSP e a PvDBP, que foram reconhecidos por 7.6% e 42% dos indivíduos respectivamente. Com relação ao perfil celular, indivíduos sororreativos para PvVir14 apresentaram níveis significativamente maiores de células B atípicas circulantes (CD 21- CD 27-), sugerindo que tal tipo celular possa estar ligado à resposta anti-PvVir14. Entre as células T, os níveis de CD4+ e CD8+ diferiram entre indivíduos com e sem anticorpos contra PvVir14 (menor e maior expressão, respectivamente), enquanto que os níveis de células NKT foram mais expressivos em indivíduos sem anti-PvVir14. Se tratando da PvAMA-1, a antigenicidade dos peptídeos com epítopos para células B previamente selecionados foi avaliada através de múltiplos ensaios sorológicos utilizando amostras de indivíduos com infecção aguda por P.vivax do norte do Brasil. Os peptídeos sintéticos foram reconhecidos por 45.5%, 48.7% e 31.2% (PI, PII e PII, respectivamente) dos indivíduos selecionados para o estudo. Quando sintetizados em conjunto (tripeptídeo), a reatividade aumentou para 62%, porcentagem comparável àquela obtida pela proteína em sua forma e tamanho originais (57%). Além disso, a reatividade anti-IgG conta o tripeptídeo foi reduzida em 42% pós-depleção, indicando que tais epítopos podem ser responsáveis por parte considerável da imunogenicidade da proteína. Esses resultados representam uma excelente perspectiva na identificação de novos alvos com potencial imunogênico para compor uma vacina, ou auxiliar no desenvolvimento de outras medidas de controle, como testes diagnósticos, já que contemplar diversos alvos do ciclo de vida do parasito parece ser a chave para alcançar a resposta robusta e protetora que uma vacina contra a malária vivax precisa para ter sucesso.

Plasmodium vivax is a major challenge for malaria control due to its wide geographic distribution, high frequency of submicroscopic infections, and ability to induce relapses due to the latent forms present in the liver (hypnozoites). The recent increase in drug-resistant P. vivax strains, the evolution toward more virulent forms and the early production of gametocytes adds up to make P. vivax malaria a public health issue of increasing importance. Besides its tricky biological features and new awareness of its virulence, minimal investments have been made in vaccine discovery for P. vivax. Given that, this study aimed to discover and characterize potential new targets for future vaccine development using samples from different endemic areas around the world (Brazil, Mali, Cambodia and United States of America). For this purpose, we investigated and characterized a novel protein recently discovered in the urine of naturally infected subjects (PvVir14) and described the immunogenic potential of peptides from a well-known vivax protein (PvAMA-1), which has been proved to have important B cell epitopes that can induce specific immune response. Circulating antibodies against PvVir14 appeared in 61% and 34.5% of subjects from Brazil and Cambodia, respectively, versus none (0%) of the P. falciparum-infected subjects from Mali who have no exposure to P. vivax. PvVir14 antibody levels correlated with those against other well-characterized sporozoite/liver (PvCSP) and blood stage (PvDBP-RII) antigens, which were recognized by 7.6% and 42% of Brazilians, respectively. Concerning the cellular immune profiling of Brazilian subjects, PvVir14 seroreactive individuals displayed significantly higher levels of circulating atypical (CD21− CD27−) B cells, raising the possibility that atypical B cells may be contribute to the PvVir14 antibody response. Among T cells, CD4+ and CD8+ levels differed (lower and higher, respectively) between subjects with versus without antibodies to PvVir14, while NKT cell levels were higher in those without antibodies. As for PvAMA-1, the antigenicity of the selected B-cell peptides was assessed by multiple serological assays using sera from acute P.vivax infected subjects. The synthetic peptides were recognized by 45.5%, 48.7% and 32.2% of infected subjects for peptides I, II and III respectively. Moreover, when synthetized together (tripeptide), the reactivity increases up to 62%, which is comparable to the reactivity found against the whole protein PvAMA-1 (57%). Furthermore, IgG reactivity against the tripeptide after depletion was reduced by 42%, indicating that these epitopes may be responsible for a considerable part of the protein immunogenicity. These results represent an excellent perspective on discovering new targets with immunogenic potential to compose a vaccine, or even to assist the development of other control measures, such as diagnostic tools, since contemplating several targets seems to be the key to achieving a robust and protective response that a malaria vaccine needs to be successful.

Effects of dietary supplementation on the training of female tennis players in hot climates / Efeitos da suplementação dietética sobre o treino das atletas tenistas em climas quentes / Efectos de la suplementación dietética en el entrenamiento de las atletas tenistas en climas cálidos

ABSTRACT Introduction A tennis match may last up to four hours with long intervals between moves of medium to high exercise intensity for 10 minutes and aerobic characteristic that requires specific sources of energy. Inappropriate diets can negatively impact sports performance and delay the recovery phase. Fortified wheat germ protein powder has the supplementation characteristics required in aerobic activities, although there are no practical studies on its impacts on the work performance of female tennis athletes. Objective Explore the influence of two weeks of training in a warm environment combined with nutritional intervention on the performance of female tennis players. Methods It was observed by testing the immunological indices of elite female tennis players while training their changes and their effects on nutritional intervention. Results The increase in serum CK activity was closely related to the amount of exercise. Many studies have shown that serum CK activity increased significantly after strenuous exercise, and the serum CK value of subjects in the test group was significantly lower than that of the control group, showing better adaptability to exercise. Compared with before the nutritional intervention, the athletes' weight decreased slightly, and the body fat percentage decreased significantly after the nutritional intervention. Compared with before nutritional intervention, sugar and salt supplements in athletes were significantly increased (P<0.05). Sweating rate, hydration rate, and hydration/sudden rate were also significantly increased (P<0.05). Conclusion Strengthening wheat germ protein supplementation may improve the nutritional albumin level in female tennis players, manifested in blood levels and immune function performance. Level of evidence II; Therapeutic studies - investigation of treatment outcomes.

RESUMO Introdução Partidas de tênis podem durar até quatro horas com intervalos longos entre jogadas de intensidade de exercício média a alta por 10 minutos, características aeróbicas que requerem fontes específicas de energia. Dietas inapropriadas podem impactar negativamente o desempenho esportivo e retardar o período de recuperação. O pó de proteína de germe de trigo fortificado apresenta as características de suplementação requeridas nas atividades aeróbicas, embora não haja estudos práticos sobre seus impactos no desempenho profissional de atletas do tênis feminino. Objetivo Explorar a influência no treinamento de duas semanas em ambiente quente combinado com a intervenção nutricional sobre o desempenho das atletas tenistas. Métodos Ao testar os índices imunológicos das tenistas de elite durante o treinamento, observamos suas mudanças e seus efeitos na intervenção nutricional. Resultados O aumento da atividade de CK sérico esteve intimamente relacionado à quantidade de exercício. Muitos estudos mostraram que a atividade do soro CK aumentou significativamente após o exercício extenuante, e o valor sérico CK dos sujeitos no grupo de teste foi significativamente menor do que o do grupo controle, mostrando melhor adaptabilidade ao exercício. Em comparação com antes da intervenção nutricional, o peso dos atletas diminuiu ligeiramente e o percentual de gordura corporal diminuiu significativamente após a intervenção nutricional. Em comparação com antes da intervenção nutricional, os suplementos de açúcar e sal em atletas foram significativamente incrementados (P<0,05). A taxa de sudorese, a taxa de hidratação e a taxa de hidratação/sudorese também aumentaram significativamente (P<0,05). Conclusão Fortalecer a suplementação com proteína de germe de trigo pode melhorar o nível nutricional de albumina nas tenistas, manifestadamente nos níveis sanguíneos e desempenho da função imunológica. Nível de evidência II; Estudos terapêuticos - investigação dos resultados do tratamento.

RESUMEN Introducción Los partidos de tenis pueden durar hasta cuatro horas con largos intervalos entre jugadas de intensidad de ejercicio media a alta durante 10 minutos, características aeróbicas que requieren fuentes de energía específicas. Las dietas inadecuadas pueden afectar negativamente al rendimiento deportivo y retrasar el periodo de recuperación. La proteína de germen de trigo en polvo enriquecida presenta las características de suplementación requeridas en las actividades aeróbicas, aunque no existen estudios prácticos sobre sus impactos en el rendimiento profesional de las atletas de tenis. Objetivo Explorar la influencia de dos semanas de entrenamiento en un ambiente cálido combinado con una intervención nutricional en el rendimiento de las atletas de tenis. Métodos Mediante el análisis de los índices inmunológicos de las tenistas de élite durante el entrenamiento, observamos sus cambios y sus efectos en la intervención nutricional. Resultados El aumento de la actividad de la CK en suero estaba estrechamente relacionado con la cantidad de ejercicio. Muchos estudios han demostrado que la actividad de la CK en suero aumenta significativamente después de un ejercicio extenuante, y el valor de la CK en suero de los sujetos del grupo de prueba fue significativamente menor que el del grupo de control, lo que demuestra una mejor adaptabilidad al ejercicio. En comparación con antes de la intervención nutricional, el peso de los atletas disminuyó ligeramente y el porcentaje de grasa corporal se redujo significativamente después de la intervención nutricional. En comparación con antes de la intervención nutricional, los suplementos de azúcar y sal en las atletas aumentaron significativamente (P<0,05). La tasa de sudoración, la tasa de hidratación y la tasa de hidratación/sudoración también aumentaron significativamente (P<0,05). Conclusión El refuerzo de la suplementación con proteínas de germen de trigo puede mejorar el nivel nutricional de albúmina en las jugadoras de tenis, manifestándose en los niveles sanguíneos y en el rendimiento de la función inmunitaria. Nivel de evidencia II; Estudios terapéuticos - investigación de los resultados del tratamiento.

Effects of neutrophil extracellular traps during human respiratory syncytial virus infection in vitro / Efeitos das redes extracelulares dos neutrófilos durante a infecção in vitro pelo vírus sincicial respiratório

Abstract The human respiratory syncytial virus (hRSV) is the most common cause of severe lower respiratory tract diseases in young children worldwide, leading to a high number of hospitalizations and significant expenditures for health systems. Neutrophils are massively recruited to the lung tissue of patients with acute respiratory diseases. At the infection site, they release neutrophil extracellular traps (NETs) that can capture and/or inactivate different types of microorganisms, including viruses. Evidence has shown that the accumulation of NETs results in direct cytotoxic effects on endothelial and epithelial cells. Neutrophils stimulated by the hRSV-F protein generate NETs that are able to capture hRSV particles, thus reducing their transmission. However, the massive production of NETs obstructs the airways and increases disease severity. Therefore, further knowledge about the effects of NETs during hRSV infections is essential for the development of new specific and effective treatments. This study evaluated the effects of NETs on the previous or posterior contact with hRSV-infected Hep-2 cells. Hep-2 cells were infected with different hRSV multiplicity of infection (MOI 0.5 or 1.0), either before or after incubation with NETs (0.5-16 μg/mL). Infected and untreated cells showed decreased cellular viability and intense staining with trypan blue, which was accompanied by the formation of many large syncytia. Previous contact between NETs and cells did not result in a protective effect. Cells in monolayers showed a reduced number and area of syncytia, but cell death was similar in infected and non-treated cells. The addition of NETs to infected tissues maintained a similar virus-induced cell death rate and an increased syncytial area, indicating cytotoxic and deleterious damages. Our results corroborate previously reported findings that NETs contribute to the immunopathology developed by patients infected with hRSV.

Resumo O vírus sincicial respiratório humano (hRSV) é a causa mais comum de doenças graves do trato respiratório inferior em crianças pequenas em todo o mundo, resultando em grande número de hospitalizações e gastos significativos para os sistemas de saúde. Neutrófilos são recrutados em massa para o tecido pulmonar de pacientes com doenças respiratórias agudas. No local da infecção, eles liberam armadilhas extracelulares de neutrófilos (NETs) que podem capturar e/ou inativar diferentes tipos de microrganismos, incluindo vírus. Evidências demonstraram que o acúmulo de NETs resulta em efeitos citotóxicos diretos nas células endoteliais e epiteliais. Os neutrófilos estimulados pela proteína F do vírus sincicial respiratório (hRSV-F) geram NETs que são capazes de capturar partículas virais, reduzindo assim sua transmissão. No entanto, a produção maciça de NETs obstrui as vias aéreas e aumenta a gravidade da doença. Assim, um maior conhecimento sobre os efeitos das NETs durante as infecções por hRSV é essencial para o desenvolvimento de novos tratamentos específicos e eficazes. Este estudo avaliou os efeitos das NETs no contato prévio ou posterior à infecção de células Hep-2 com hRSV. As células Hep-2 foram infectadas com diferentes quantidades de hRSV (multiplicidade de infecção ou MOI 0,5 ou 1,0), antes ou após a incubação com NETs (0,5-16 μg/mL). Células infectadas e não tratadas mostraram redução da viabilidade celular e intensa coloração com azul de tripano, que foi acompanhada pela formação de sincícios numerosos e grandes. O contato prévio entre as NETs e as células não resultou em efeito protetor. As células em monocamadas mostraram um número e área de sincícios reduzidos, mas a morte celular foi semelhante àquela apresentada por células infectadas e não tratadas. A adição de NETs aos tecidos infectados manteve taxa de morte celular e formação de sincícios semelhantes àqueles induzidos pelo vírus em células não tratadas, indicando danos citotóxicos e deletérios. Nossos resultados corroboram achados relatados anteriormente de que as NETs contribuem para a imunopatologia desenvolvida por pacientes infectados com hRSV.

Impact of dietary leaf extracts of Black pepper Piper nigrum L. on the growth, hematological and immunological parameters of Labeo rohita (Hamilton, 1822) cultured in glass aquaria / Impacto de extratos de folhas da dieta de pimenta-do-reino Piper nigrum L. sobre o crescimento, parâmetros hematológicos e imunológicos de Labeo rohita (Hamilton, 1822) cultivado em aquários de vidro

Abstract A study was conducted to evaluate the effect of Piper nigrum (black pepper) leaf extract on on the growth performance, proximate composition, hematological parameters, and immune response of Labeo rohita fingerlings with an average weight of 22.14 ± 0.98g. Aftrer acclimation for two weeks, fish (n=25) were randomly selected and placed in four glass aquaria (T0, T1, T2 and T3) at constant water temperature (30.0 ± 1.0 °C), pH (7.50 ± 0.5) and total hardness (200 ± 2.0 mgL,-1) for a period of 12 weeks, with three replicates each. Fish were fed with P. nigrum leaf extract supplemented feed @ 0.0%, 1.0%, 2.0% and 3.0% in T0, T1,T2 and T3, respectively. At the end of experiment, five fish were randomly selected from each aquaria for proximate composition, gut and skin microbial load, hematological parameters. Total proteins, albumins, and globulins were also recorded to evaluate immunological memory. The result revealed that fish in T2 showed better growth performance with an average weight gain of 56.11 ± 0.51 g. Thus, it had been concluded that Piper nigrum, a medicinal plant, can also be used to enhance the growth performance and immune response of Labeo rohita as attractive alternatives against antibiotics and vaccines and has shown no negative side effects on fish health as well as on its environment.

Resumo Um estudo foi conduzido para avaliar o efeito do extrato da folha de Piper nigrum (pimenta-do-reino) sobre o desempenho de crescimento, composição centesimal, parâmetros hematológicos e resposta imune de alevinos de Labeo rohita com peso médio de 22,14 ± 0,98g. Após aclimatação por duas semanas, os peixes (n = 25) foram selecionados aleatoriamente e colocados em quatro aquários de vidro (T0, T1, T2 e T3) em temperatura constante da água (30,0 ± 1,0 °C), pH (7,50 ± 0,5) e dureza total (200 ± 2,0 mgL-1) por um período de 12 semanas, com três repetições cada. Os peixes foram alimentados com ração suplementada com extrato de folha de P. nigrum @ 0,0%, 1,0%, 2,0% e 3,0% em T0, T1, T2 e T3, respectivamente. Ao final do experimento, cinco peixes foram selecionados aleatoriamente de cada aquário para composição centesimal, carga microbiana intestinal e cutânea e parâmetros hematológicos. Proteínas totais, albuminas e globulinas também foram registradas para avaliar a memória imunológica. O resultado revelou que os peixes em T2 apresentaram melhor desempenho de crescimento com ganho de peso médio de 56,11 ± 0,51 g. Assim, concluiu-se que Piper nigrum, uma planta medicinal, também pode ser usado para melhorar o desempenho de crescimento e resposta imunológica de Labeo rohita como alternativas atraentes contra antibióticos e vacinas e não mostrou efeitos colaterais negativos na saúde dos peixes, bem como sobre seu ambiente.

Impact of dietary leaf extracts of Black pepper Piper nigrum L on the growth, hematological and immunological parameters of Labeo rohita (Hamilton, 1822) cultured in glass aquaria / Impacto de extratos de folhas da dieta de pimenta-do-reino Piper nigrum L sobre o crescimento, parâmetros hematológicos e imunológicos de Labeo rohita (Hamilton, 1822) cultivado em aquários de vidro

A study was conducted to evaluate the effect of Piper nigrum (black pepper) leaf extract on on the growth performance, proximate composition, hematological parameters, and immune response of Labeo rohita fingerlings with an average weight of 22.14 ± 0.98g. After acclimation for two weeks, fish (n=25) were randomly selected and placed in four glass aquaria (T0, T1, T2 and T3) at constant water temperature (30.0 ± 1.0 °C), pH (7.50 ± 0.5) and total hardness (200 ± 2.0 mgL,-¹) for a period of 12 weeks, with three replicates each. Fish were fed with P. nigrum leaf extract supplemented feed @ 0.0%, 1.0%, 2.0% and 3.0% in T0, T1, T2 and T3, respectively. At the end of experiment, five fish were randomly selected from each aquaria for proximate composition, gut and skin microbial load, hematological parameters. Total proteins, albumins, and globulins were also recorded to evaluate immunological memory. The result revealed that fish in T2 showed better growth performance with an average weight gain of 56.11 ± 0.51 g. Thus, it had been concluded that Piper nigrum, a medicinal plant, can also be used to enhance the growth performance and immune response of Labeo rohita as attractive alternatives against antibiotics and vaccines and has shown no negative side effects on fish health as well as on its environment.

Um estudo foi conduzido para avaliar o efeito do extrato da folha de Piper nigrum (pimenta-do-reino) sobre o desempenho de crescimento, composição centesimal, parâmetros hematológicos e resposta imune de alevinos de Labeo rohita com peso médio de 22,14 ± 0,98g. Após aclimatação por duas semanas, os peixes (n = 25) foram selecionados aleatoriamente e colocados em quatro aquários de vidro (T0, T1, T2 e T3) em temperatura constante da água (30,0 ± 1,0 °C), pH (7,50 ± 0,5) e dureza total (200 ± 2,0 mgL-¹) por um período de 12 semanas, com três repetições cada. Os peixes foram alimentados com ração suplementada com extrato de folha de P. nigrum @ 0,0%, 1,0%, 2,0% e 3,0% em T0, T1, T2 e T3, respectivamente. Ao final do experimento, cinco peixes foram selecionados aleatoriamente de cada aquário para composição centesimal, carga microbiana intestinal e cutânea e parâmetros hematológicos. Proteínas totais, albuminas e globulinas também foram registradas para avaliar a memória imunológica. O resultado revelou que os peixes em T2 apresentaram melhor desempenho de crescimento com ganho de peso médio de 56,11 ± 0,51 g. Assim, concluiu-se que Piper nigrum, uma planta medicinal, também pode ser usado para melhorar o desempenho de crescimento e resposta imunológica de Labeo rohita como alternativas atraentes contra antibióticos e vacinas e não mostrou efeitos colaterais negativos na saúde dos peixes, bem como sobre seu ambiente.

Effects of neutrophil extracellular traps during human respiratory syncytial virus infection in vitro / Efeitos das redes extracelulares dos neutrófilos durante a infecção in vitro pelo vírus sincicial respiratório

The human respiratory syncytial virus (hRSV) is the most common cause of severe lower respiratory tract diseases in young children worldwide, leading to a high number of hospitalizations and significant expenditures for health systems. Neutrophils are massively recruited to the lung tissue of patients with acute respiratory diseases. At the infection site, they release neutrophil extracellular traps (NETs) that can capture and/or inactivate different types of microorganisms, including viruses. Evidence has shown that the accumulation of NETs results in direct cytotoxic effects on endothelial and epithelial cells. Neutrophils stimulated by the hRSV-F protein generate NETs that are able to capture hRSV particles, thus reducing their transmission. However, the massive production of NETs obstructs the airways and increases disease severity. Therefore, further knowledge about the effects of NETs during hRSV infections is essential for the development of new specific and effective treatments. This study evaluated the effects of NETs on the previous or posterior contact with hRSV-infected Hep-2 cells. Hep-2 cells were infected with different hRSV multiplicity of infection (MOI 0.5 or 1.0), either before or after incubation with NETs (0.5–16 μg/mL). Infected and untreated cells showed decreased cellular viability and intense staining with trypan blue, which was accompanied by the formation of many large syncytia. Previous contact between NETs and cells did not result in a protective effect. Cells in monolayers showed a reduced number and area of syncytia, but cell death was similar in infected and non-treated cells. The addition of NETs to infected tissues maintained a similar virus-induced cell death rate and an increased syncytial area, indicating cytotoxic and deleterious damages. Our results corroborate previously reported findings that NETs contribute to the immunopathology developed by patients infected with hRSV.

O vírus sincicial respiratório humano (hRSV) é a causa mais comum de doenças graves do trato respiratório inferior em crianças pequenas em todo o mundo, resultando em grande número de hospitalizações e gastos significativos para os sistemas de saúde. Neutrófilos são recrutados em massa para o tecido pulmonar de pacientes com doenças respiratórias agudas. No local da infecção, eles liberam armadilhas extracelulares de neutrófilos (NETs) que podem capturar e/ou inativar diferentes tipos de microrganismos, incluindo vírus. Evidências demonstraram que o acúmulo de NETs resulta em efeitos citotóxicos diretos nas células endoteliais e epiteliais. Os neutrófilos estimulados pela proteína F do vírus sincicial respiratório (hRSV-F) geram NETs que são capazes de capturar partículas virais, reduzindo assim sua transmissão. No entanto, a produção maciça de NETs obstrui as vias aéreas e aumenta a gravidade da doença. Assim, um maior conhecimento sobre os efeitos das NETs durante as infecções por hRSV é essencial para o desenvolvimento de novos tratamentos específicos e eficazes. Este estudo avaliou os efeitos das NETs no contato prévio ou posterior à infecção de células Hep-2 com hRSV. As células Hep-2 foram infectadas com diferentes quantidades de hRSV (multiplicidade de infecção ou MOI 0,5 ou 1,0), antes ou após a incubação com NETs (0,5–16 μg/mL). Células infectadas e não tratadas mostraram redução da viabilidade celular e intensa coloração com azul de tripano, que foi acompanhada pela formação de sincícios numerosos e grandes. O contato prévio entre as NETs e as células não resultou em efeito protetor. As células em monocamadas mostraram um número e área de sincícios reduzidos, mas a morte celular foi semelhante àquela apresentada por células infectadas e não tratadas. A adição de NETs aos tecidos infectados manteve taxa de morte celular e formação de sincícios [...].

Impact of dietary leaf extracts of Black pepper Piper nigrum L. on the growth, hematological and immunological parameters of Labeo rohita (Hamilton, 1822) cultured in glass aquaria

Abstract A study was conducted to evaluate the effect of Piper nigrum (black pepper) leaf extract on on the growth performance, proximate composition, hematological parameters, and immune response of Labeo rohita fingerlings with an average weight of 22.14 ± 0.98g. Aftrer acclimation for two weeks, fish (n=25) were randomly selected and placed in four glass aquaria (T0, T1, T2 and T3) at constant water temperature (30.0 ± 1.0 °C), pH (7.50 ± 0.5) and total hardness (200 ± 2.0 mgL,-1) for a period of 12 weeks, with three replicates each. Fish were fed with P. nigrum leaf extract supplemented feed @ 0.0%, 1.0%, 2.0% and 3.0% in T0, T1,T2 and T3, respectively. At the end of experiment, five fish were randomly selected from each aquaria for proximate composition, gut and skin microbial load, hematological parameters. Total proteins, albumins, and globulins were also recorded to evaluate immunological memory. The result revealed that fish in T2 showed better growth performance with an average weight gain of 56.11 ± 0.51 g. Thus, it had been concluded that Piper nigrum, a medicinal plant, can also be used to enhance the growth performance and immune response of Labeo rohita as attractive alternatives against antibiotics and vaccines and has shown no negative side effects on fish health as well as on its environment.

Resumo Um estudo foi conduzido para avaliar o efeito do extrato da folha de Piper nigrum (pimenta-do-reino) sobre o desempenho de crescimento, composição centesimal, parâmetros hematológicos e resposta imune de alevinos de Labeo rohita com peso médio de 22,14 ± 0,98g. Após aclimatação por duas semanas, os peixes (n = 25) foram selecionados aleatoriamente e colocados em quatro aquários de vidro (T0, T1, T2 e T3) em temperatura constante da água (30,0 ± 1,0 °C), pH (7,50 ± 0,5) e dureza total (200 ± 2,0 mgL-1) por um período de 12 semanas, com três repetições cada. Os peixes foram alimentados com ração suplementada com extrato de folha de P. nigrum @ 0,0%, 1,0%, 2,0% e 3,0% em T0, T1, T2 e T3, respectivamente. Ao final do experimento, cinco peixes foram selecionados aleatoriamente de cada aquário para composição centesimal, carga microbiana intestinal e cutânea e parâmetros hematológicos. Proteínas totais, albuminas e globulinas também foram registradas para avaliar a memória imunológica. O resultado revelou que os peixes em T2 apresentaram melhor desempenho de crescimento com ganho de peso médio de 56,11 ± 0,51 g. Assim, concluiu-se que Piper nigrum, uma planta medicinal, também pode ser usado para melhorar o desempenho de crescimento e resposta imunológica de Labeo rohita como alternativas atraentes contra antibióticos e vacinas e não mostrou efeitos colaterais negativos na saúde dos peixes, bem como sobre seu ambiente.

Effects of neutrophil extracellular traps during human respiratory syncytial virus infection in vitro

Abstract The human respiratory syncytial virus (hRSV) is the most common cause of severe lower respiratory tract diseases in young children worldwide, leading to a high number of hospitalizations and significant expenditures for health systems. Neutrophils are massively recruited to the lung tissue of patients with acute respiratory diseases. At the infection site, they release neutrophil extracellular traps (NETs) that can capture and/or inactivate different types of microorganisms, including viruses. Evidence has shown that the accumulation of NETs results in direct cytotoxic effects on endothelial and epithelial cells. Neutrophils stimulated by the hRSV-F protein generate NETs that are able to capture hRSV particles, thus reducing their transmission. However, the massive production of NETs obstructs the airways and increases disease severity. Therefore, further knowledge about the effects of NETs during hRSV infections is essential for the development of new specific and effective treatments. This study evaluated the effects of NETs on the previous or posterior contact with hRSV-infected Hep-2 cells. Hep-2 cells were infected with different hRSV multiplicity of infection (MOI 0.5 or 1.0), either before or after incubation with NETs (0.516 g/mL). Infected and untreated cells showed decreased cellular viability and intense staining with trypan blue, which was accompanied by the formation of many large syncytia. Previous contact between NETs and cells did not result in a protective effect. Cells in monolayers showed a reduced number and area of syncytia, but cell death was similar in infected and non-treated cells. The addition of NETs to infected tissues maintained a similar virus-induced cell death rate and an increased syncytial area, indicating cytotoxic and deleterious damages. Our results corroborate previously reported findings that NETs contribute to the immunopathology developed by patients infected with hRSV.

Resumo O vírus sincicial respiratório humano (hRSV) é a causa mais comum de doenças graves do trato respiratório inferior em crianças pequenas em todo o mundo, resultando em grande número de hospitalizações e gastos significativos para os sistemas de saúde. Neutrófilos são recrutados em massa para o tecido pulmonar de pacientes com doenças respiratórias agudas. No local da infecção, eles liberam armadilhas extracelulares de neutrófilos (NETs) que podem capturar e/ou inativar diferentes tipos de microrganismos, incluindo vírus. Evidências demonstraram que o acúmulo de NETs resulta em efeitos citotóxicos diretos nas células endoteliais e epiteliais. Os neutrófilos estimulados pela proteína F do vírus sincicial respiratório (hRSV-F) geram NETs que são capazes de capturar partículas virais, reduzindo assim sua transmissão. No entanto, a produção maciça de NETs obstrui as vias aéreas e aumenta a gravidade da doença. Assim, um maior conhecimento sobre os efeitos das NETs durante as infecções por hRSV é essencial para o desenvolvimento de novos tratamentos específicos e eficazes. Este estudo avaliou os efeitos das NETs no contato prévio ou posterior à infecção de células Hep-2 com hRSV. As células Hep-2 foram infectadas com diferentes quantidades de hRSV (multiplicidade de infecção ou MOI 0,5 ou 1,0), antes ou após a incubação com NETs (0,516 g/mL). Células infectadas e não tratadas mostraram redução da viabilidade celular e intensa coloração com azul de tripano, que foi acompanhada pela formação de sincícios numerosos e grandes. O contato prévio entre as NETs e as células não resultou em efeito protetor. As células em monocamadas mostraram um número e área de sincícios reduzidos, mas a morte celular foi semelhante àquela apresentada por células infectadas e não tratadas. A adição de NETs aos tecidos infectados manteve taxa de morte celular e formação de sincícios semelhantes àqueles induzidos pelo vírus em células não tratadas, indicando danos citotóxicos e deletérios. Nossos resultados corroboram achados relatados anteriormente de que as NETs contribuem para a imunopatologia desenvolvida por pacientes infectados com hRSV.

Serum lymphocytes and cytokines: diagnostic value and influence on the immune status in patients with pulmonary tuberculosis / Linfócitos e citocinas séricas: valor diagnóstico e influência no estado imunológico de pacientes com tuberculose pulmonar

ABSTRACT Objective: To determine the absolute number of serum T lymphocytes and cytokine levels and the characteristics of patients with active pulmonary tuberculosis and to assess their effect on the immune status of these patients and their diagnostic and predictive value for tuberculosis. Methods: We included 1,069 patients with active tuberculosis, 51 patients with latent tuberculosis infection, and 600 health individuals. Absolute serum T-lymphocyte counts and cytokine levels were quantified. Results: T lymphocytes were significantly reduced in patients with active tuberculosis when compared with healthy individuals. The immune function of patients gradually decreased with age and was stronger in female patients than in males. Th1 cells expressed higher levels of cytokines than did Th2 cells. Logistic regression analysis showed that reduced CD3+ T, CD8+ T, and NK cell counts, as well as reduced IL-4 and IFN-g expression, were independent influencing factors for active tuberculosis. ROC analysis showed that the sensitivity and specificity of absolute CD3+ T and CD8+ T lymphocyte counts and combined factors were significantly higher than were those of IL-4 and IFN-g for diagnosing active tuberculosis. Conclusions: Serum T-lymphocyte counts and cytokine levels can assess the immune status of tuberculosis patients; they are also useful biomarkers for predicting and diagnosing tuberculosis.

RESUMO Objetivo: Determinar o número absoluto de linfócitos T séricos e os níveis de citocinas séricas, bem como as características, de pacientes com tuberculose pulmonar ativa e avaliar o efeito desses no estado imunológico desses pacientes e seu valor diagnóstico e preditivo para tuberculose. Métodos: Foram incluídos 1.069 pacientes com tuberculose ativa, 51 pacientes com tuberculose latente e 600 indivíduos saudáveis. Foram realizadas a contagem absoluta de linfócitos T séricos e a quantificação de citocinas séricas. Resultados: Os linfócitos T estavam significativamente reduzidos nos pacientes com tuberculose ativa em comparação com os indivíduos saudáveis. A função imunológica dos pacientes diminuiu gradativamente com a idade e mostrou-se mais forte nas mulheres do que nos homens. As células Th1 expressaram maiores níveis de citocinas do que as células Th2. A análise de regressão logística mostrou que contagens reduzidas de células T CD3+, T CD8+ e NK e expressão reduzida de IL-4 e IFN-g foram fatores de influência independentes para tuberculose ativa. A análise ROC mostrou que a sensibilidade e especificidade dos valores absolutos de linfócitos T CD3+ e T CD8+ e de fatores combinados foram significativamente maiores do que as da IL-4 e do IFN-g para o diagnóstico da tuberculose ativa. Conclusões: A contagem de linfócitos T séricos e os níveis de citocinas séricas podem avaliar o estado imunológico de pacientes com tuberculose; também são biomarcadores úteis na predição e diagnóstico da tuberculose.

Predominantly antibody deficiency: case report / Deficiência predominantemente de anticorpos: relato de caso

Abstract Objectives: present a case of Inborn errors of immunity (IEI) as a potential diagnosis in pediatric patients with recurrent infections. Description: male patient, 13 years old, since he was eight months old had recurrent diarrhea, sinusitis, otitis, abscesses and urinary tract infections. At the age of ten, he presented mastoiditis progressing to meningitis, he was admitted to a tertiary hospital, where an immunological evaluation was performed, which led to the diagnosis of Predominantly Antibody Deficiency (PAD), with suspected X-linked Agammaglobulinemia (XLA). Treatment was initiated with administration of intravenous gamma globulin 400 mg/kg every four weeks, with a significant improvement of the condition. Discussion: usually, the diagnosis of XLA tends to be made in the first three years of life. However, in this report, although the first manifestations started at eight months of age, there was a delay of ten years before starting the treatment. In fact, the diagnosis of children and adults with IEI can be delayed if healthcare professionals are unable to find the true cause of recurrent infections. Therefore, the relevance of considering such pathologies in the presence of risk signs is highlighted, as early diagnosis being essential in treating and preventing morbidities.

Resumo Objetivos: apresentar um caso de Erro Inato da Imunidade (EII) como diagnóstico em potencial de pacientes pediátricos com infecções de repetição. Descrição: paciente masculino, 13 anos, desde os oito meses de idade apresentou quadros repetidos de diarreias, sinusites, otites, abscessos e infecções do trato urinário; destacando-se a otite, sinusite e diarreia pela maior recorrência. Aos dez anos, quando apresentou mastoidite evoluindo para meningite, foi internado em um hospital terciário, onde foi realizada avaliação imunológica, a qual levou ao diagnóstico de Deficiência Predominantemente de Anticorpos (DPAs), tendo como suspeita a agamaglobulinemia ligada ao cromossomo X (ALX). Foi iniciado tratamento com administração de gamaglobulina endovenosa 400 mg/kg a cada quatro semanas, ocorrendo melhora significativa do quadro. Discussão: normalmente, o diagnóstico da ALX tende a ser feito nos primeiros três anos de vida. Neste relato, entretanto, embora as primeiras manifestações tenham iniciado aos oito meses de idade, ocorreu um atraso de dez anos até o início do tratamento. De fato, o diagnóstico de crianças e adultos com EII pode ser retardado se os profissionais de saúde não conseguirem encontrar a causa das infecções recorrentes. Destaca-se, portanto, a relevância de se considerar tais patologias na vigência de sinais de riscos, pois o diagnóstico precoce é fundamental para tratar e prevenir morbidades.

Subgingival microbiota and immune response modulation of osseointegrable implants / Modulação da microbiota subgengival e resposta imune dos implantes osseointegráveis

ABSTRACT Osseointegrable dental implants are biomaterials made of titanium or other alloys mixed with titanium, which have high biocompatibility and allow osseointegration. However, this process can be modulated by changes in the complex mechanisms between microbiota, immune response and host. The present study aims to present how the immune system-microbiota-host interaction influences the osseointegration process of titanium dental implants and its alloys. A literature review was performed through electronic and manual searches in several databases, including PubMed, LILACS, Google Scholar, SciELO and Web of Science for articles published in the last 20 years in English and Portuguese. The formation of a temporary fibrin matrix on the implants surface after implantation implies the recruitment, adhesion and activity of immune cells at this site, with the release of pro-inflammatory molecules and recruitment of neutrophils. In the second moment, monocytes and macrophages (M1) are recruited, producing, in this step, reactive oxygen species. In the later stage of inflammation, macrophages (M2) help in tissue regeneration with expression of anti-inflammatory cytokines. In addition, the implants surface provides a site for microbial colonization mediated by salivary pellicle and topographical features. Thus, in symbiosis the modulation of the immune response will be favorable to osseointegration. However, the dysbiotic process exacerbates the inflammatory progression modulating the immune response influencing abnormal tissue healing or scar and fibrosis formation, compromising osseointegration. Different conditions of the subgingival microbiota will influence different immunological cascades, generating different cellular responses and positive or negative modulation of the osseointegration process.

RESUMO Os implantes dentários osseointegráveis são biomateriais constituídos de titânio ou outras ligas misturadas com titânio, as quais possuem alta biocompatibilidade e permitem a osseointegração. Esse processo pode ser modulado por alterações nos mecanismos complexos entre microbiota, resposta-imune e hospedeiro. O presente estudo busca apresentar como a interação sistema imune-microbiota-hospedeiro influenciam no processo de osseointegração proveniente de implantes dentários de titânio. Foi realizada uma revisão de literatura através de busca eletrônica e manual em diversas bases de dados, incluindo PubMed, LILACS, Google Acadêmico, SciELO e Web of Science para artigos publicados nos últimos 20 anos em inglês e português. A formação de uma matriz provisória de fibrina na superfície dos implantes após a implantação implica no recrutamento, adesão e atividade das células imunes, com a liberação de moléculas pró-inflamatórias e recrutamento de neutrófilos. No segundo momento, monócitos e macrófagos (M1) são recrutados, produzindo espécies reativas a oxigênio. Já no estágio posterior da inflamação, macrófagos (M2) ajudam na regeneração do tecido com expressão de citocinas anti-inflamatórias. Além disso, a superfície dos implantes oferece um local para colonização microbiana mediada pela película salivar e características topográficas. Assim, em simbiose a modulação da resposta imune vai ser favorável à osseointegração. Contudo, em estado de doença periodontal, o processo disbiótico exacerba a progressão inflamatória modulando a resposta imune influindo em um processo cicatricial comprometendo a osseointegração. Diferentes condições da microbiota subgengival vão influenciar em cascatas imunológicas diferentes gerando respostas celulares diferentes e modulação positiva ou negativa do processo de osseointegração.

Diminuição dos Níveis Séricos do Receptor Solúvel da Oncostatina M (sOSMR) e Glicoproteína 130 (sgp130) em Pacientes com Doença Arterial Coronariana / Decreased Serum Levels of Soluble Oncostatin M Receptor (sOSMR) and Glycoprotein 130 (sgp130) in Patients with Coronary Artery Disease

Resumo Fundamento A oncostatina M (OSM) é uma citocina pleiotrópica que, após lesão arterial, demonstra ser expressa rapidamente. Objetivos Correlacionar os níveis séricos da OSM, do receptor solúvel de oncostatina M (sOSMR) e da fração solúvel de glicoproteína 130 (sgp130) em pacientes com doença arterial coronariana (DAC) a parâmetros clínicos. Métodos Os níveis de sOSMR e sgp130 foram avaliados por ELISA, enquanto os de OSM foram avaliados por Western Blot, em pacientes com SCC (n=100), pacientes com SCA (n=70) e 64 voluntários do grupo de controle sem manifestações clínicas da doença. Valores de p <0,05 foram considerados estatisticamente significativos. Resultados Pacientes com DAC exibiram níveis significativamente mais baixos de sOSMR e sgp130 e níveis mais altos de OSM em comparação ao grupo de controle (ambos p <0,0001). A análise clínica mostrou níveis mais baixos de sOSMR em homens ([OR] = 2,05, p = 0,026), jovens (OR = 1,68, p = 0,0272), hipertensos (OR = 2,19, p = 0,041), fumantes (OR = 2,19, p = 0,017), pacientes que não apresentavam dislipidemia (OR = 2,32, p = 0,013), pacientes com infarto agudo do miocárdio [IAM] (OR = 3,01, p = 0,001) e pacientes não tratados com estatina (OR = 1,95, p = 0,031), antiplaquetário (OR = 2,46, p = 0,005), inibidores dos canais de cálcio (OR = 3,15, p = 0,028) e antidiabéticos (OR = 2,97, p = 0,005). Os níveis de sOSMR também foram correlacionados a sexo, idade, hipertensão e uso de medicamentos na análise multivariada. Conclusões Nossos dados sugerem que o aumento dos níveis séricos de OSM e a diminuição dos níveis de sOSMR e sGP130 em pacientes com injúria cardíaca podem desempenhar um papel importante no mecanismo fisiopatológico da doença. Além disso, níveis mais baixos de sOSMR foram associados a sexo, idade, hipertensão e uso de medicamentos.

Abstract Background Oncostatin M (OSM) is a pleiotropic cytokine which, after arterial injury, has proven to be to be rapidly expressed. Objectives To correlate the serum levels of OSM, soluble OSM receptor (sOSMR), and soluble fraction of glycoprotein 130 (sgp130) in patients with coronary artery disease (CAD) with clinical parameters. Methods Levels of sOSMR and sgp130 were evaluated by ELISA and OSM by Western Blot, in patients with CCS (n=100), patients with ACS (n=70), and 64 control volunteers without clinical manifestations of the disease. P-values < 0.05 were considered to be statistically significant. Results CAD patients exhibited significantly lower levels of sOSMR and sgp130 and higher levels of OSM when compared to the controls (both p < 0.0001). Clinical analysis displayed, lower levels of sOSMR in men ([OR] = 2.05, p = 0.026), youth (OR = 1.68, p = 0.0272), hypertensives (OR = 2.19, p = 0.041), smokers (OR = 2.19, p = 0.017), patients that did not present dyslipidemia (OR = 2.32, p = 0.013), patients with Acute Myocardial Infarction [AMI] (OR = 3.01, p = 0.001) and patients not treated with statin (OR = 1.95, p = 0.031), antiplatelet agent (OR = 2.46, p = 0.005), inhibitors of calcium channels (OR = 3.15, p = 0.028), and antidiabetic drugs (OR = 2.97, p = 0.005). The levels of sOSMR were also correlated with gender, age, hypertension, and use of medications in multivariate analysis. Conclusions Our data suggest that the enhanced serum levels of OSM, and decreased levels of sOSMR and sGP130 in patients with cardiac injury may play an important role in the pathophysiological mechanism of the disease. Furthermore, lower levels of sOSMR were associated with gender, age, hypertension, and the use of medications.