Silenciamiento de genes mediante RNA interferencia consideraciones sobre el mecanismo y diseño de los sistemas efectores / Silencing genes by RNAi interference considerations on the mechanism and system design effectors

La interferencia por RNA es una nueva poderosa herramienta molecular para silenciar genes a nivel post-transcripcional. Es utilizada para la búsqueda de las funciones asociadas a varios genes mediante, genómica reversa y como herramienta terapéutica para reducir o bloquear la expresión de genes alterados o sobre expresados, en terapia genética. La interferencia por RNA proporciona una estrategia fácil y rápida para degradar los RNA mensajeros mediante la introducción de un RNA pequeño de doble cadena homólogo (siRNA) al RNA mensajero celular de interés, removiéndolo de una manera secuencia específica. En este artículo de revisión se resumen el mecanismo básico propuesto para producir silenciamiento vía interferencia por RNA, algunos de los requisitos para producir los siRNA intracelulares capaces de producir silenciamiento, así como los posibles sistemas efectores para transferir éstos a las células o tejidos. La misma pretende ayudar a divulgar información sobre tópicos de Biología Molecular de actual interés médico.

Métodos de diagnóstico no convencionales para la tuberculosis / Non conventional diagnostic methods for tuberculosis

En esta revisión se muestran las ventajas y desventajas de algunos de los métodos dirigidos al diagnóstico de la tuberculosis y la identificación de micobacterias

Diagnóstico de meningitis tuberculosa por la determinación de la actividad de adenosina deaminasa y la amplificación de secuencias nucleotídicas por PCR / Diagnosis of tubercular meningitis by detection of adenosine deaminase activity and amplification of nucleotide sequences with PCR

La tuberculosis meningea (TBM) es la forma más severa y letal de la tuberculosis. El diagnóstico bacteriológico rápido en TBM es casi imposible con los métodos convencionales. Por esto muchos pacientes son tratados con drogas anti-TBC sin tener un diagnóstico definitivo. Un método de diagnóstico más rápido y efectivo es necesario, para poder iniciar tratamiento a tiempo y evitar las secuelas neurológicas irreversibles o la muerte. En este trabajo se evaluó la actividad de la adenosina deaminasa (ADA) y amplificación de las secuencias IS6110 y mtp40 por reacción en cadena de la polimerasa (PCR), en líquido cerebroespinal de pacientes con meningitis crónica. Para la actividad de ADA > 8 U/L la sensibilidad fue de 80 por ciento y la especificidad de 91 por cieto. PCR para IS6110 mostró valores de sensibilidad de 80 por ciento y 97 por ciento de especificidad. La actividad de ADA y la PCR a partir de muestras de LCR son útiles como herramientas complementarias en el diagnóstico de TBM

Utilidad de la actividad de adenosina deaminasa en el diagnóstico de derrame pleural por tuberculosis / Utility of the adenosine deaminasa activity in the diagnostic of tuberculous pleural effusions

La aparición de marcadores enzimáticos ha abierto un nuevo campo en la investigación de la etiología de los derrames pleurales (DP) de naturaleza inflamatoria. En este sentido se determinó la actividad enzimática de la Adenosina deaminasa (ADA) en líquido pleural (LP) y plasma, en 48 pacientes los cuales se distribuyeron en cinco grupos de acuerdo a criterios bien definidos: Grupo I: constituído por 20 casos de Tuberculosis Pleural (TBC), Grupo II: Infecciones diferentes a TBC 9 casos, Grupo III: DP malignos 13 casos, Grupo IV: 4 casos de transudados, y Grupo V: Pleuritis crónica inespecífica 2 casos. A todos se les realizó historia clínica, radiología de tórax, y exámenes de laboratorio de rutina, análisis citoquímico del LP y biopsia pleural. Se demostraron cambios en las características de los DP por TBC. Estos ocurren con mayor frecuencia en adultos jóvenes con sintomatología de menos de 4 semanas de evolución, sin antecedentes previos de TBC, con radiología que reveló DP de pequeño a moderado tamaño,sin evidencia de lesión parenquimatosa sugestiva de TBC en las mismas, y con PPD que resultó inespecífico. En base a estas características la TBC Pleural debe considerarse como primaria, en nuestro medio. Se establecieron las características del estudio citoquímico del LP procedente de los DP de diferente etiología y comparadas estas con las del TBC se encontró que el estudio del Ph, niveles de glucosa y proteínas, y el contenido celular de predominio linfocítico no son de utilidad en el diagnóstico diferencial de los DP por TBC, evidenciado por sus valores de sensibilidad, especificidad, valor predictivo positivo (VPP) y valor predictivo negativo (VPN) calculados. La biopsia pleural demostró especificidad de 0,90 para el diagnóstico del DP por TBC. En ningún caso el examen directo y los cultivos de DP, y la biopsia pleural fueron positivos para detectar Mycobacterium tuberculosis en este estudio. La actividad de la ADA en LP resultó tener una utilidad superior a las pruebas convencionales en el diagnóstico diferencial de los DP exudativos. Para valores superiores a 33.33 UI/L la actividad de ADA en el LP de los pacientes con DP reportó una especificidad de 0.89 y el VPN de la prueba fue 1 para el diagnóstico de TBC pleural. El valor medio de ADA en LP fue mayor en los grupos I y II que en los otros pacientes (p < 0.001). Al determinar ADA en plasma y la relación ADA LP/ADA Plasma, los valores medios no fueron significativos al comparar el grupo de DP por

Efecto de la adenosina, teofilina y nifedipina sobre el transporte de calcio en el músculo liso de las vías aéreas / Effect of the adenosine, theophiline and nifedipine on calcium transportation in airway smoth muscle

El músculo liso traqueobronquial es la entidad patobiológica responsable de la broncoconstricción que existe en el asma bronquial y el conocimiento de los eventos que están relacionados a los procesos de contracción y relajación de este músculo es importante para el desarrollo de una terapia racional del asma bronquial. La elevación intracelular de calcio en el músculo liso traqueobronquial está asociada con el inicio de la contracción, mientras que la remoción de este catión del citoplasma está relacionada con el proceso de relajación. Esto último puede ocurrir mediante una remoción activa de este catión a través de la membrana plasmática del músculo liso. La finalidad de este trabajo fue el estudio del transporte activo de calcio en las fracciones de membranas plasmáticas del músculo liso traqueobronquial de bovino en comparación con el del humano. Así mismo, la acción de la adenosina, teofilina y nifedipina sobre el mismo. Para lograr esta meta, se realizó el fraccionamiento sub-celular del músculo liso traqueobronquial de bovino y humano. Las fracciones subcelulares obtenidas mediante centrifugación diferencial en medio isotónico fueron denominados Nuclear (N), Mitocondrial (M), Microsomal (P) y fase soluble (S). Para obtener fracciones altamente puras de membranas plasmáticas se procedió al fraccionamiento de la fracción P, empleando un gradiente discontinuo de sacarosa, lográndose obtener 3 sub-fracciones: P1, P2, P3, de las cuales la fracción P1 resultó la más rica en vesículas derivadas de membranas plasmáticas; demostrada por microscopía electrónica y actividad de 5' Nucleotidasa..