Standardization of a rapid quadruplex PCR method for the simultaneous detection of bovine, buffalo, Salmonella spp, and Listeria monocytogenes DNA in milk / [Padronização de um método rápido de PCR quadriplex para a detecção simultânea de DNA de bovino, bubalino, Salmonella spp. e Listeria monocytogenes em leite]

The objective of the present study was to Standardize a Polymerase Chain Reaction (PCR) protocol for the authentication of bovine and buffalo milk, and to detect the presence of Salmonella spp. and Listeria monocytogenes. For this, the target DNA was extracted, mixed, and subjected to a PCR assay. Milk samples were defrauded and experimentally contaminated with microorganisms to assess the detection of target DNA at different times of cultivation, bacterial titers, and concentration of genetic material. In addition, the protocol was tested with DNA extracted directly from food, without a pre-enrichment step. The proposed quadruplex PCR showed good accuracy in identifying target DNA sequences. It was possible to simultaneously identify all DNA sequences at the time of inoculation (0h), when the samples were contaminated with 2 CFU/250mL and with 6h of culture when the initial inoculum was 1 CFU/250mL. It was also possible to directly detect DNA sequences from the food when it was inoculated with 3 CFU/mL bacteria. Thus, the proposed methodology showed satisfactory performance, optimization of the analysis time, and a potential for the detection of microorganisms at low titers, which can be used for the detection of fraud and contamination.

O objetivo do presente estudo foi padronizar um protocolo de reação em cadeia da polimerase (PCR) para a autenticação de leite bovino e bubalino e a detecção da presença de Salmonella spp. e Listeria monocytogenes. Para isso, o DNA-alvo foi extraído, misturado e submetido ao ensaio de PCR. Amostras de leite foram fraudadas e contaminadas experimentalmente com os micro-organismos, para se avaliar a detecção do DNA-alvo em diferentes tempos de cultivo, os títulos bacterianos e a concentração de material genético. Além disso, o protocolo foi testado com DNA extraído diretamente do alimento, sem a etapa de pré-enriquecimento. A PCR quadriplex proposta mostrou boa precisão na identificação de sequências de DNA-alvo. Foi possível identificar simultaneamente todas as sequências de DNA no momento da inoculação (0h), quando as amostras estavam contaminadas com 2 UFC/250mL, e com seis horas de cultura, quando o inóculo inicial foi de 1 UFC/250mL. Também foi possível detectar diretamente as sequências de DNA do alimento quando este foi inoculado com 3 UFC/mL de bactérias. Dessa forma, a metodologia proposta apresentou desempenho satisfatório, otimização do tempo de análise e potencial para detecção de micro-organismos em baixos títulos, podendo ser utilizada para detecção de fraude e contaminação.

Use of infrared thermography to evaluate the inflammatory reaction in cat testis after intratesticular injection of 0. 9% NaCl or 20% CaCl2 with 1% lidocaine / O uso da termografia infravermelha para avaliar a reação inflamatória após a injeção intratesticular de NaCL 0, 9 % e cloreto de cálcio 20% com lidocaína 1%

Due to the doubts and questions about the inflammatory reaction caused by chemical castration, this study aimed to use infrared thermography to detect, evaluate and monitor the inflammatory reaction caused by the intratesticular injection of calcium chloride (CaCl2) 20% with lidocaine 1%. For this, thermographic measurements were taken before (M0), 10 minutes (M1), 1 and 6 hours (M2 and M3), for 7 consecutive days (M4 to M10), at 15 (M11), 30 (M12) and 60 (M13) days after intratesticular injection. Additionally, changes to testicular tissue and effects over spermatogenesis were evaluated by andrological exam before (M0) and 60 days (M13) after intratesticular injection. All cats were orchiectomized at M13, and testicles were submitted to histological analysis. CaCl2 (20%) with lidocaine (1%) administration produced testicular tissue damage and interfered with the spermatogenesis in 70% of treated cats without exacerbating the inflammatory reaction or impairing the cat's welfare. It was concluded that thermographic evaluation is a useful, efficient, easy and quick method to diagnose and monitor cat testicular inflammatory reactions.(AU)

Devido a constantes dúvidas e questionamentos sobre a reação inflamatória ocasionada pela castração química, este estudo objetivou o uso da termografia infravermelha para detectar, avaliar e monitorar a reação inflamatória causada pela injeção intratesticular de cloreto de cálcio (CaCl 2 ) 20% associada à lidocaína 1%. Para isso, medidas termográficas foram aferidas antes (M0), 10 minutos (M1), uma e seis horas (M2 e M3), por sete dias consecutivos (M4 a M10), aos 15 (M11), 30 (M12), e 60 (M13) dias após injeção intratesticular, nos grupos tratado e controle. Todos os gatos foram orquiectomizados no M13, e os testículos submetidos à análise histológica. A injeção CaCl 2 a 20% associada com lidocaína a 1% produziu lesão testicular e interferiu na espermatogênese de 70% dos gatos tratados, sem exacerbar a reação inflamatória ou prejudicar o bem-estar do animal. Foi concluído que a avaliação termográfica é uma ferramenta útil, eficiente, rápida e fácil para o diagnóstico e o monitoramento da reação inflamatória em gatos.(AU)

Alterações fisiológicas e comportamentais de bovinos de corte após o manejo de castração / Physiological and behavioral changes of beef cattle after castration management

Objetivou-se avaliar o desempenho, parâmetros fisiológicos e temperamentais de bovinos de corte não castrados ou submetidos à castração cirúrgica ou à imunocastração. O período experimental foi dividido em dois subperíodos de observações: primeiros 15 dias pós-castração (período de cicatrização) e os 25 dias seguintes à cicatrização. Nos primeiros 15 dias de avaliação, os animais não castrados obtiveram maior ganho médio diário de peso em relação aos castrados cirurgicamente. A frequência cardíaca foi maior para os animais castrados cirurgicamente, com 126,51 batimentos/minuto, em relação aos demais tratamentos. A distância de fuga foi superior para os novilhos castrados cirurgicamente, com valor de 12,22 metros. Nos 25 dias seguintes à castração cirúrgica, o ganho médio diário de peso foi superior nos bovinos castrados cirurgicamente em relação aos bovinos não castrados ou imunocastrados. A velocidade de fuga, no segundo subperíodo de avaliação, foi superior nos bovinos castrados em relação aos não castrados. O período imediato à castração, os primeiros 15 dias, prejudicou o ganho médio diário e o ganho de peso total, o que causou maior reatividade, com alterações nos parâmetros fisiológicos e temperamentais de bovinos castrados cirurgicamente em comparação com bovinos não castrados, entretanto, transcorrido o período de cicatrização, essas diferenças diminuíram ou desapareceram.(AU)

The aim of this study was to evaluate the performance, physiological and temperamental parameters of uncastrated beef cattle or those submitted to surgical castration or immunocastration, in the post-castration period. The experimental period was divided into two subperiods of observations: the first 15 days post-castration (healing period) and the 25 days following healing. In the first 15 days of evaluation, the non-castrated animals obtained a greater average daily gain of weight in relation to surgically castrated. The heart rate was higher for surgically castrated animals with 126,51 beats/minute, compared to the other treatments. The distance of escape was higher for the surgically castrated steers, with a value of 12,22 meters, when compared to the other groups studied. During the next 25 days of surgical castration, the mean daily gain of weight was higher in surgically castrated cattle than in non-castrated or immunocastrated cattle. The escape velocity, in the second evaluation subperiod, was superior in the castrated cattle, in relation to the not castrated. The immediate castration period, the first 15 days, altered the mean daily gain and the total weight gain, the physiological and temperamental parameters of surgically castrated cattle, however, after the healing period, these differences diminish or disappear.(AU)

Duffy blood group genotypes among African-Brazilian communities of the Amazon region

Duffy blood group genotype was studied in 95 unrelated subjects from four African-Brazilian communities of the Amazon region: Trombetas, Pitimandeua, Curiaú, and Mazagão Velho. Genotyping was performed using an allele-specific primer polymerase chain reaction technique for determining the three major alleles at FY blood group, and as expected, FY*O allele was the most common one, with frequencies ranging from 56.4% in Mazagão Velho to 72.2% in Pitimandeua, whereas the FY*O/FY*O genotype was found with frequencies between 32.3% in Mazagão Velho and 58.8% in Curiaú. Genotype and allele distributions in the four Amazonian communities are consistent with a predominantly African origin with some degree of local differentiation and admixture with people of Caucasian ancestry and/or Amerindians. These results reveal that the impact of the FY*O/FY*O genotype on the transmission and endemicity of the vivax malaria deserves to be investigated in full detail in an attempt to identify the contribution of host biological factors and explain the non-homogeneous prevalence of malaria in the region expressed by its different levels of exposure

Autoinmunidade en distiroidismo secundario a amiodarona: aspectos heredofamiliares / Autoinmunity in amiodarone induced thyroid disease: heredofamilial aspects

El distiroidismo espontáneo autoinmune (DE) tiene agregación familiar positiva. Se ha identificado distiroidismo en pacientes que reciben amiodarona (DIA). Hemos observado que este grupo muestra predisposición genética y ahora se analizó en forma prospoectiva, la presencia de autoanticuerpos y la historia familiar para identificar factores de riesgo en 140 enfermos que reciben amiodarona (A), 40 de estos con DIA y 30 sujetos con DE. Se estudió tambíen un grupo testigo formado por personas sanas, y sin historia familiar de distiroidismo. En todos se investigaron los antecedentes de distiroidismo en familiares de primer grado y se buscaron anticuerpos anti-tiroglobulina, músculo liso mucosa gástrica, miocardio, mitocondrias, sustancia intercelular del epitelio y membrana basal epitelial, así como anticuerpos antinucleo y factores reumatoides. Los anticuerpos anti-tiroglobulina, mucosa gastríca y miocardio se encontraron con mayor frecuencia en los tres grupos de enfermos que entre los testigos (P < 0.05). Los Ac anti tiroglobulina fueron iguales en frecuencia en los individuos que reciben A, tengan o no distiroidismo. La estratificación pronóstica de las dos poblaciones con A indicó que la presencia de este antoanticuerpo es independiente del sexo, edad, dosis o tiempo de tratamiento con la droga. La expresión clínica del padecimiento tiroideo, depende de la predisposición genética individual, los antecedentes familiares de distiroidismo se encontraron con mayor frecuencia en las familias de los pacientes con DE y DIA que en ls sujetos que reciben la droga y no alteraron la función (P < 0.005). El análisis de asociación entre antecedentes familiares y la manifestación clínica de distiroidismo secundario al tratamiento con A indicó riesgo mayor en los pacientes con uno o más familiares distiroideos (riesgo relativo 7.6)