Development of monoclonal antibodies against prM of Dengue virus 4 / Desenvolvimento de anticorpos monoclonais para prM de Dengue vírus 4

Introduction: dengue is a most common mosquito-borne viral disease in the Americas and tropical countries. Objective: in this work, mice were hyperimmunized with DENV 4 antigen to produce monoclonal antibodies (mAbs). Methodology: DENV 4 (GenBank KC806069) was inoculated in C6/36 cell monolayers cultivated in Leibovitz's 15 medium supplemented with 5% fetal bovine serum and incubated at 28 oC. The virus stock was submitted to concentration and ultracentrifugation and stored at -80 oC until use (VC DENV 4). Balb/c mice were injected intraperitoneally with 50µg of DENV-4 and successive intraperitoneal injections of 25 µg of VCDENV 4 with Freund's incomplete adjuvant were performed. The spleen cells were fused to SP2/0 myeloma cells with PEG 1540 and distributed in 96-well microplates with Iscove's modified medium with Hipoxantina­Aminopterina­Timidina. Hybridoma screening by indirect ELISA showed positive results for six mAbs, and their characterization was performed by Western blotting and Indirect Immunofluorescence (IFI) techniques. Results: the six mAbs showed strong recognition of prM (24/29 kDa), and minor reaction to E protein (66 kDa), E/E protein dimer (105 kDa), and NS1 (49 kDa) protein in two mAbs. The use of mAbs anti-prM as a diagnostic tool using IFI has been demonstrated to detect DENV-4 antigen in infected cells or tissues. Conclusion: DENV 4 generate mAbs with strong reactivity to prM with potential use to confirm the presence of DENV 4 antigen in tissues or infected cells.

Introdução: a dengue é uma doença viral transmitida por mosquitos comumente das Américas e países tropicais. Objetivo: neste trabalho, camundongos foram hiperimunizados com antígeno DENV 4 para produzir anticorpos monoclonais (mAbs). Metodologia: DENV 4 (GenBank KC806069) foi inoculado em monocamadas de células C6 / 36 cultivadas em meio Leibovitz 15 suplementado com 5% de soro fetal bovino e incubadas a 28oC. O estoque viral foi submetido à concentração, ultracentrifugação e armazenado a -80 oC (VC DENV 4). Camundongos Balb / c foram injetados intraperitonealmente com 50 µg de VC DENV-4 e injeções intraperitoneais sucessivas de 25 µg de antigeno com adjuvante incompleto de Freund. As células do baço foram misturadas a células SP2/0 com PEG 1540 e distribuídas em microplacas de 96 poços com meio Iscove Modificado em presença de Hipoxantina ­ Aminopterina ­ Timidina. A triagem de hibridomas por ELISA indireto apresentou resultados positivos para seis mAbs, e sua caracterização foi realizada por técnicas de Western blotting e Imunofluorescência Indireta (IFI). Resultados: os seis mAbs mostraram forte reconhecimento de prM (24/29 kDa) e reação menor à proteína E (66 kDa), dímero de proteína E / E (105 kDa) e proteína NS1 (49 kDa) em dois mAbs. O uso de mAbs anti-prM como uma ferramenta de diagnóstico utilizando IFI demonstrou eficacia em detectar o antígeno DENV-4 em células ou tecidos infectados. Conclusão: o mAbs produzidos para DENV 4 demonstraram uma forte reatividade contra prM, e poderiam ser uma ferramenta de uso potencial no diagnóstico de DENV 4 .

Increased capture of Aedes aegypti (Linnaeus, 1762) (Diptera: Culicidae) by removing one ADULTRAP component

Abstract INTRODUCTION: Aedes aegypti is the main vector responsible for the transmission of numerous arboviruses. Adultrap® has been developed to catch these insects. METHODS: We tested the effectiveness of capturing adults with and without one of the components of Adultrap®. RESULTS: The mean number of insects caught by the original trap was 1.25 (standard deviation = 1.28), while the average obtained with the modified trap was 8.88 (standard deviation = 3.44). The medians were statistically different (p = 0.001) according to the Mann-Whitney test. CONCLUSIONS: The modification of Adultrap® increased the average catch of Ae. aegypti by up to seven times.

Seroepidemiological survey of canine visceral leishmaniasis in a continental island of northeast Brazil / Investigação soroepidemiológica da leishmaniose visceral canina em uma ilha continental do Nordeste do Brasil

Introduction: Visceral leishmaniasis (VL) is endemic disease in the neighboring municipalities of the continental island Ilha de Maré, Salvador, Bahia, Brazil. Nevertheless, VL has not been reported in the island itself. Objective: the present study aimed to investigate the seroprevalence and clinical signs of Canine Visceral Leishmaniasis (CVL) and to identify the sand fly population present in the village of Botelho, Ilha de Maré. Methodology: sera of local dogs were tested for anti-Leishmania IgG by immunoassays (screening with TR DPP ™ rapid test and confirmatory with indirect ELISA, Bio-Manguinhos/Fiocruz) and an entomological survey was conducted to estimate and identify the phlebotomine fauna of the region. Results: seven out of 106 samples (6.6%) were positive using rapid test. These positive samples were sent to the Central Laboratory of Bahia for confirmation by indirect ELISA. However, all samples presentednegative results. Nine specimens of Pressatia choti, subfamily Phlebotominae were identified, being this species frequently found in areas with cutaneous leishmaniasis transmission in Brazil. Conclusion: although this work did not confirm the presence of CVL in Ilha de Maré, new serological and entomological studies in a larger area are required for the maintenance of the epidemiological surveillance in the emphasized insular area.

Introdução: Leishmaniose Visceral (LV) é uma doença endêmica em municípios vizinhos à Ilha de Maré, situada na plataforma continental do município de Salvador, Bahia, Brasil. Entretanto, casos de LV não tem sido notificados nesta Ilha. Objetivo: O presente trabalho objetivou investigar a soroprevalência e sinais clínicos de Leishmaniose Visceral Canina (LVC) e identificar a população de flebótomos presentes no povoado de Botelho, Ilha de Maré. Metodologia: soro de cães locais foram testados para IgG anti-Leishmania por imunoensaios (triagem com teste rápido TR DPP™ e confirmatório com Elisa Indireto, Bio-Manguinhos/Fiocruz) e uma investigação entomológica foi conduzida para estimar e identificar a fauna flebotomínea da região. Resultados: sete de 106 amostras (6,6%) foram positivas usando o teste rápido. As amostras positivas foram encaminhadas ao Laboratório Central da Bahia para a confirmação por ELISA indireto. Entretanto, essas amostras apresentaram resultado negativo. Foram encontrados nove exemplares da espécie Pressatia choti, subfamília Phlebotominae, espécie frequentemente encontrada em áreas de transmissão de leishmaniose cutânea no Brasil. Conclusão: apesar deste trabalho não ter confirmado a presença de LVC na Ilha de Maré, novos inquéritos sorológicos e analises entomológicas em uma maior área são necessários para a manutenção de uma vigilância epidemiológica na região insular em destaque.

Estudo experimental sobre a ação de larvicidas em populações de Aedes aegypti do município de Itabuna, Bahia, em condições simuladas de campo / Estudio experimental sobre la acción de larvicidas en poblaciones de Aedes aegypti del municipio brasileño de Itabuna, BA, en condiciones simuladas de campo / Experimental study on the action of larvicides in Aedes aegypti populations collected in the Brazilian municipality of Itabuna, Bahia, under simulated field conditions

Objetivo: avaliar, em condições simuladas de campo, a eficácia do pyriproxyfen (hormônio juvenil), do novaluron (inibidor de quitina) e do spinosad (biolarvicida) no controle do Aedes aegypti. Métodos: exposição periódica de larvas de Ae. aeypti obtidas em Itabuna a recipientes tratados com os larvicidas, e comparação do efeito residual do tratamento com cepa Rockfeller. Resultados: o efeito inibitório na emergência de adultos, após 60 dias, foi de 89,5% spinosad, 96,5% novaluron e 75,4% pyriproxifen para larvas de Itabuna, não havendo diferença estatística (p=0,412) entre os tratamentos; spinosad e novaluron apresentaram maior percentual de mortalidade na fase larval, 98,8% e 97,9% respectivamente; pyriproxifen apresentou mortalidade maior na fase pupal, 95,1%. Conclusão: os três larvicidas apresentaram controle semelhante; no entanto, o pyriproxifen pode deixar a falsa impressão de positividade dos criadouros, por agir em fase pupal, comprometendo os indicadores de infestação que são parâmetros estratégicos para as ações de controle.

Objetivo: evaluar en condiciones simuladas de campo la eficacia del piriproxifén (hormona juvenil), novaluron (inhibidor de quitina) y spinosad (biolarvicida) en el control del Ae. Aegypti. Métodos: exposición periódica de larvas obtenidas de Itabuna, BA, Brasil, a recipientes tratados con larvicida y comparación del efecto residual con cepa Rockefeller. Resultados: el efecto inhibidor en la emergencia de adultos, después de 60 días, fue de 89,5% spinosad, 96,5% novaluron y 75,4% piriproxifén para larvas de Itabuna, no habiendo diferencia estadística (p=0,412) entre los tratamientos; spinosad y novaluron presentaron mayor mortalidad en la fase larval, 98,8% y 97,9% respectivamente; piriproxifén presentó mayor mortalidad en la fase de pupa, 95,1%. Conclusión: los tres larvicidas fueron eficaces en el control de larvas de Ae. Aegypti; sin embargo, piriproxifén puede dejar falsa positividad de los criaderos, por actuar en fase de pupa, comprometiendo los indicadores de infestación, parámetros estratégicos para las acciones de control.

Objective: to evaluate, under simulated field conditions, the efficacy of pyriproxyfen (juvenile hormone), novaluron (chitin inhibitor) and spinosad (biolarvicide) in controlling Aedes aegypti. Methods: periodic exposition of Ae. aegypti larvae collected in Itabuna, BA, Brazil, to recipients treated with larvicides and comparison of residual effect of treatment with the Rockefeller strain. Results: the inhibitory effect on adult emergence after 60 days was spinosad 89.5%, novaluron 96.5% and pyriproxifen 75.4% for Itabuna larvae, with no statistical difference (p=0.412) between treatments; spinosad and novaluron had a higher percentage of mortality in the larval stage, 98.8% and 97.9% respectively; pyriproxyfen showed higher mortality (95.1%) in the pupal stage. Conclusion: the three larvicides demonstrated similar control; however, pyriprofyxen might give a false impression of breeding ground positivity as it acts at the pupal stage, compromising the indicators of infestation that are strategic parameters for control actions.

Consideraçöes sobre pulga (Siphonaptera) da raposa Cerdocyon thous (Canidae) da área endêmica de leishmanioe visceral de Jacobina, Bahia, Brasil / Notes on fleas (Siphonaptera) of the fox Cerdocyon thous (Canidae) from the visceral leishmaniasis endemic area of Jacobina, Bahia, Brazil

No período de julho a setembro de 1998 foram coletadas 152 pulgas em 18 exemplares da raposa Cerdocyon thous capturados na área endêmica de leishmaniose visceral de Jacobina, Estado da Bahia. As pulgas foram identificadas como: 136 Rhopalopsyllus lutzi lutzi, 11 Pulex irritans, 2 Ctenocephalides canis, 1 Ctenocephalides felis felis e 2 Xenopsylla