Evaluación de la inmunofluorescencia indirecta como prueba suplementaria para el diagnóstico de la infección por HIV-1 / Evaluation of indirect inmunofluorescence as a confirmatory test for the diagnosis of HIV-1 infection

Se comparó la eficiencia diagnóstica de la inmunofluorescencia indirecta (IFI) como método confirmatorio de la infección por HIV-1 en muestras de suero de 362 personas con conductas de alto y bajo riesgo. El panel compuesto por 220 positivos, 122 negativos y 20 indeterminados por Western blot (WB) fue ensayado por una técnica de IFI desarrollada en nuestro laboratorio. La sensibilidad calculada fue 98,63 por ciento y la espicificidad 98,36 por ciento, indicando que la IFI es un método alternativo para la confirmación de la presencia de anticuerpos contra el HIV-1. Dado que su costo es menor que el 10 por ciento comparado con el del WB, se justifica su introducción en el algoritmo de diagnóstico serológico de HIV-1. Se observó también una relación directa entre la reactividad de las proteínas del WB y los resultados de IFI. En 15 muestras con resultado indeterminado por WB e inespecífico por IFI, las bandas más observadas fueron la p24 seguida de la gp160; por otro lado los anticuerpos contra las glicoproteínas virales son los que presentan mayor frecuencia en las muestras positivas débiles, demostrando su alto valor predictivo

Detección de la carga viral y su uso como marcador virológico en el seguimiento de pacientes HIV-1 positivos / Viral load detection and its role as virological marker for the monitoring of HIV-1 positive patients

Se realizaron los primeros estudios de carga viral en pacientes HIV-1 positivos provenientes de diferentes instituciones asistenciales de la Ciudad de Buenos Aires. Se evaluó la carga viral como marcador virológico y su correlación con la clínica y el recuento de los linfocitos CD4+ para 216 pacientes HIV-1 positivos. La técnica utilizada fue bDNA (Quantiplex HIV RNA 2.0 assay, Chiron Corporation). Se observó una tendencia al aumento de la carga viral en los pacientes con menor cantidad de linfocitos CD4+ y en los estadíos clínicos con sintomatología. En pacientes que no recibieron ninguna terapia antirretroviral se encontraron valores desde < 10000 copias de ARN viral/ml de plasma hasta 48995 c/ml. En aquéllos que recibieron terapia antirretroviral se observó mayor variación en los valores de la carga viral como lo mostró un rango de < 10000 c/ml hasta 96605 c/ml. Se obtuvieron muestras consecutivas en 25 pacientes y se observaron diferencias entre ambas muestras que permitieron corroborar la utilidad de la técnica en el seguimiento de los pacientes infectados con HIV

HIV-1 viral load: comparative evaluation of three commercially available assays in Argentina

Viral load (HIV-RNA copies per milliliter of plasma) has good correlation to prognosis considering progression to AIDS. The evaluation of commercial kits to measure viral load has become a need to find the most specific, sensitive and reproducible procedure to follow up HIV-infected patients. Hereby, a comparative analysis was done by using three different assays available in Argentina for quantitation of HIV-RNA in plasma. A plasma panel: 20 from HIV-1 infected individuals (9 asymptomatic and 11 symptomatic) and 9 from HIV-1 seronegative individuals was studied. Samples were run by Amplicor HIV-1 Monitor (Roche Diagnostic System, USA) Quantiplex HIV-1 RNA 2.0 Assay (Chiron Corporation, USA) and NASBA HIV-1 RNA QT (Organon Teknika, Holland). RNA was extracted from 0.2 ml of plasma for Amplicor, 0.1 ml and 1 ml of plasma for NASBA and, duplicates of 1 ml of plasma was centrifuged and pellet was used for bDNA assay no RNA extraction step. For a given specimen, a log difference of <0.5 between assays was considered as concordant result. All seronegative samples were bellow the detection limit of all assays (Amplicor 200 c/ml, NASBA 400 c/ml and Quantiplex (bDNA) 500 c/ml). Two samples from asymptomatic patients were not detectable by NASBA (Sensitivity: 90 per cent) Sensitivity was increased to 100 per cent by using 1 ml of plasma. All samples were detectable by the other assays (sensitivity: 100 per cent). For NASBA-bDNA, 74 per cent samples were concordant, 35 per cent for Amplicor-bDNA and 53 per cent for NASBA-Amplicor. By using 1 ml of plasma from asymptomatic patients, concordance was 65 per cent for NASBA-bDNA and 60 per cent for NASBA Amplicor. Comparing samples from asymptomatic patients, only 22 per cent was concordant in both cases. Reproducibility of NASBA was low (33 per cent, with differences lower than 0.5 Log) when 0.1 and 1 ml were used. Due to the levels of concordance of these results, it would be suggested to use always the same technique to follow up HIV-1 infection. The reproducibility of the assays should be tested by every laboratory and for every technician in charge of the assay in order to have confidence in the results specially to follow up HIV-infected patients or to monitor anti-viral therapies.