Protective effect of Tribulus terrestris hydroalcoholic extract against cisplatin­induced apoptosis on testis in mice / Efecto protector del extracto hidroalcohólico de Tribulus terrestris contra la apoptosis inducida por cisplatino sobre los testículos en ratones

Cisplatin is an anti-cancer drug used in chemotherapy. One of the limiting side effects of cisplatin is decreasing genital gland function, azoospermia and oligospermia. Tribulus terrestris (TT) has been used as an aphrodisiac. The present study amid to investigate protective effect of TT hydroalcoholic extract against cisplatin-induced apoptosis on testis in mice. Male adult mice (n=30) were divided into control and 4 experimental groups (n=6). Control group received saline, first experimental group received cisplatin (5.5 mg/kg) and other three experimental group received cisplatin (5.5 mg/kg) and different doses of hydroalcoholic extact of TT (100, 300 and 500 mg/kg/i.p) respectively. Day after the last injection, histopathology and histomorphic analysis and also TUNEL assay on mice testis were performed. Weights of body and testis, seminiferous tubules diameter and apoptotic index were assessed. Data analysis was performed using one-way ANOVA followed by Tukeys' test. The results showed that cisplatin lead to a reduction in the weight of body and testes, and significantly increased apoptotic index compared to the control group (P<0.001), while in treated groups with TT, the weights of body and testis and seminiferous tubules diameter were significantly higher compared with cisplatin group (P<0.001), but apoptotic index did not show significant differences. The study demonstrates that extract of TT could protective effect of on cisplatin-induced apoptosis of testis and seminiferous tubules diameter that may be related to the presence of antioxidant components acting via a multitude of central and peripheral mechanisms.

El cisplatino es un medicamento anticancerígeno utilizado en tratamientos de quimioterapia. Uno de los efectos secundarios que limitan el uso del cisplatino es la disminución en la función de la glándula genital, provocando azoospermia y oligospermia. El Tribulus terrestris (TT) se ha utilizado como un afrodisíaco. El objetivo fue investigar el efecto protector del extracto hidroalcohólico de TT contra la apoptosis inducida por el cisplatino en los testículos de ratones. Ratones machos adultos (n=30) fueron divididos en un grupo control y cuatro grupos experimentales (n=6). Al grupo control se le administró una solución salina, mientras que el primer grupo experimental recibió cisplatino (5,5 mg/kg) y los tres restantes recibieron cisplatino (5,5 mg/kg) con diferentes dosis del extracto hidroalcohólico de TT (100, 300 y 500 mg/kg/ip), respectivamente. El día posterior a la última inyección, se realizaron análisis histopatológicos y morfométricos, junto al ensayo TUNEL, de los testículos de los ratones. Se registró el peso corporal y testicular de cada ratón, así como el diámetro de los túbulos seminíferos e índice de apoptosis. Los datos fueron analizados mediante ANOVA de una vía, seguida de la prueba de Tukey. El cisplatino provocó una reducción del peso corporal y testicular, y un aumento del índice de apoptosis, que fue significativo en comparación con el grupo control (P<0,001), mientras que en los grupos tratados con TT, el peso corporal y testicular, junto al diámetro de los túbulos seminíferos fueron significativamente mayores en comparación con el grupo tratado con cisplatino (P<0,001), sin embargo, el índice de apoptosis no mostró diferencias significativas. El estudio demuestra que el extracto de TT podría poseer un efecto protector de la apoptosis inducida por cisplatino sobre los testículos, así como en el diámetro de los túbulos seminíferos, lo que podría relacionarse con la presencia de componentes antioxidantes que actúan a través de diversos mecanismos, centrales y periféricos.

Adiponectin effect on nitric oxide secretion by normal and endometriotic human endometrial stromal cells: in vitro study / Efecto de la adiponectica sobre la secreción de óxido nítrico por células estromales de endometrio humano, normales y con endometriosis: estudio in vitro

Endometriosis is an estrogen-dependent disease in reproductive age women. Adiponectin and Nitric oxide (NO) have an important role in physiologic functions especially in human reproductive system. Levels of NO increased in the endometriosis patients but serum adiponectin levels decreased in woman with endometriosis. The aim of this study was to determine adiponectin effect on nitric oxide secretion by cultured normal and endometriotic human endometrial stromal cells. In this experimental study, normal (n= 10) and endometriotic endometrial biopsies (n= 10) were taken in sterile condition. Stromal cells isolated and cultured in in DMEM/ F12 medium and treated with adiponectin concentrations (0, 10, 100, and 200 ng/ml) for 24 and 48 hours. NO assay was done on their supernatants by Greiss method. Data was analyzed by one way ANOVA and p<0.05 was considered significant. There was significant difference between endometriosis groups in NO secretion in all dose of adiponectin and time (p<0.05). In normal groups there was significant difference in 48 hours (p<0.05) but no significant change in 24 hours (p>0.05). Adiponectin effects nitric oxide secretion of cultured human endometriotic stromal cells.

La endometriosis es una enfermedad dependiente de estrógenos que se presenta en mujeres en edad reproductiva. La adiponectina y el óxido nítrico (ON) tienen un papel importante en las funciones fisiológicas, especialmente en el sistema reproductivo humano. Los niveles de ON aumentan en los pacientes con endometriosis, pero los niveles de adiponectina en suero disminuyen. El objetivo fue determinar el efecto de la adiponectina sobre la secreción de ON por las células estromales de endometrio humano, tanto normales como con endometriosis, en medio de cultivo. En este estudio experimental, las células estromales de endometrio normales (n= 10) y las biopsias de endometrio con endometriosis (n= 10) se tomaron en condiciones de esterilidad. Las células estromales fueron aisladas y cultivadas en un medio DMEM/F12, y se sometieron a distintas concentraciones de adiponectina (0, 10, 100, y 200 ng/ml) durante 24 y 48 horas. El ensayo con ON se realizó a los sobrenadantes obtenidos por el método de Greiss. Los datos recolectados fueron analizados por ANOVA de una vía y un valor p<0,05 se consideró significativo. Entre los grupos con endometriosis, en referencia a la secreción de ON, no hubo diferencia significativa en todas las dosis de adiponectina y los tiempos estipulados (p<0,05). En los grupos normales, hubo diferencia significativa a las 48 horas (p<0,05), pero ningún cambio significativo a las 24 horas (p>0,05). La adiponectina tiene efectos sobre la secreción de óxido nítrico por las células estromales endometriales humanas en cultivo.

Sonic hedgehog inhibition induces mouse embryonic stem cells to differentiate toward definitive endoderm.

In the experimental group (shh inhibited group), there were significant decreases in the expression of Oct4, Nanog, Shh, GATA4, Brachyury and Goosecoid, while increases were observed for TAT and Pdx1. The expression of Sox17 did not differ between two control and experimental groups. In experimental group, the amount of GSC positive cells was somehow lower but it seems that there was no difference for Sox17. Shh inhibition induces ESCs to differentiate toward definitive endoderm by committing mesendodermal lineages.

Maternal water deprivation affects the spermatogenesis of the offspring rats / La privación del agua en la etapa materna de ratas afecta la espermatogénesis de sus crías

Prenatal stresses such as water deprivation affect developmental process of embryo. This study evaluated the effects of water deprivation in pregnant mother on histological parameters of testis of offspring. Pregnant rats were divided into two groups (control and experimental). In experimental animals, water was removed from the ewes for 48h at the end of third trimester of gestation (19-21th days). Histopathology and histomorphic analysis and also TUNEL assay on offspring's testes were performed at pubertal age (60 days). The sperm motility either compared between two groups. The results showed that prenatal water deprivation induced histopathological alteration such as epithelium vacuolization, sloughing and detachments (P<0.01). Morphometrical data showed that prenatal water deprivation decreased tubular diameter and reduce epithelium height (P<0.01). Johnsen's score showed poor spermatogenesis in experimental group (P=0.001). The percent of germ cell apoptosis was increased in offspring's testes of rats born to mothers exposed to stress during pregnancy (P=0.000). The increased number of Multinucleated cells in the seminiferous lumen (P=0.000) in parallel with decreased number of sertoli cells (P=0.03) showed adverse effect of prenatal water deprivation on blood testis barrier. Present study revealed that prenatal water deprivation had injurious effect on developmental process of testes that affects on both germ cells and sertoli cells and had noxious effect on sperm parameters. These data confirm that prenatal stress disrupts normal spermatogenesis of offspring.

El estrés prenatal, como la privación del agua, afecta el proceso de desarrollo embrionario. Este estudio evaluó los efectos de la falta de agua en la rata preñada sobre los parámetros histológicos del testículo de las crías. Las ratas preñadas fueron divididas en dos grupos (control y experimental). En los animales de experimentación, se eliminó el agua durante 48 h al final del término de la gestación (19-21 días). Junto al análisis histopatológico e histomorfométrico se realizó el ensayo TUNEL en los testículos de las crías en la edad puberal (60 días). La motilidad de los espermatozoides se comparó entre los dos grupos. Los resultados mostraron que la privación de agua prenatal induce alteraciones histopatológicas tales como vacuolización del epitelio, descamación y desunión (P<0,01). Los datos morfométricos mostraron que con la privación de agua prenatal hubo disminución del diámetro tubular y se redujo la altura del epitelio (P<0,01). El score de Johnsen mostró una espermatogénesis deficiente en el grupo experimental (p = 0,001). El porcentaje de apoptosis de las células germinales se incrementó en los testículos de las crías de las ratas nacidas de madres expuestas a estrés durante el embarazo (p = 0,000). Un aumento del número de células multinucleadas en el lumen seminífero (P = 0,000) junto a la disminución del número de células de Sustento (P = 0,03) demostró el efecto adverso de la privación de agua prenatal en la barrera hemato-testicular. El presente estudio reveló que la falta de agua prenatal tuvo un efecto perjudicial en el proceso de desarrollo de los testículos, lo que afecta a las células germinales y los sustentocitos, y tuvo un efecto nocivo sobre los parámetros seminales. Estos datos confirman que el estrés prenatal altera la espermatogénesis normal de la descendencia.