A biolistic process for in vitro gene transfer into chicken embryos

Chicken embryos kept in culture medium were bombarded using a high helium gas pressure biolistic device. To optimize the factors that affect transformation efficiency, the lacZ gene under control of the human cytomegalovirus immediate early enhancer/promoter was used as a reporter gene. There was an inverse relationship between survival rate and transformation efficiency. The best conditions obtained for high embryo survival and high transformation efficiency were achieved with 800 psi helium gas pressure, 500 mmHg vacuum, gold particles, an 8 cm DNA-coated microparticle flying distance to the embryo and embryo placement 0.5 cm from the center of the particle dispersion cone. Under these conditions, transformation efficiency was 100 percent, survival rate 25 percent and the number of expression units in the embryo body cells ranged from 100 to 1,000. Expression of green fluorescent protein was also detected in embryos bombarded under optimal conditions. Based on the results obtained, the biolistic process can be considered an efficient method for the transformation of chicken embryos and therefore can be used as a model system to study transient gene expression and tissue-specific promoters

Liberaçäo de espermatozóides das glândulas de armazenamento em poedeiras semi-pesadas / Sequence of sperm release from host glands in hens

Utilizaram-se, em dois experimentos, 224 galinhas e 30 galos brancos (SS) e 30 galos vermelhos (MM) de linhagens para ovos castanhos. No experimento I efetuaram-se duas inseminaçöes artificiais, com intervalo de 4 h, utilizando-se, na sequência, galos SS e MM. Os tratamentos definidos pela relaçäo de sêmen em ml, foram: T11 (0,05/0,05); T12 (0,02/0,05); T13 (0,05/0,02) e T14 (0,02/0,02). No experimento II realizaram-se duas inseminaçöes por semana, com alternância de galos, iniciando-se com SS, e reforços após 48 h (MM). Os tratamentos foram: T21 (0,05/0,05); T22 (0,03/0,05); T23 (0,05/0,03) e T24 (0,03/0,03). Realizaram-se quatro incubaçöes com quatro dias de coleta, para determinaçäo da fertilidade e porcentagem de pintos vermelhos (PPV). No experimento I, a utilizaçäo de 0,02 ml de sêmen resultou em baixa fertilidade (79,61 por cento). A PPV foi maior em T12 que T13 e T14, näo diferindo de T11. O maior volume de sêmen de machos vermelhos foi responsável pela maior PPV. Näo houve diferença significativa para fertilidade no experimento II. O fenótipo da maior parte dos pintos nascidos coincidiu com o fenótipo do galo utilizado na última inseminaçäo. Concluiu-se que a liberaçäo de expermatozóide obedece uma sequência, onde os espermatozóides da última inseminaçäo säo liberados com maior intensidade, dependendo, porém, do volume do sêmen